牡丹根際溶磷真菌的篩選及其促生效應(yīng)

薛冬，黃向東，宋根娣，楊瑞先，王慧敏，羅秋玲

洛陽(yáng)理工學(xué)院環(huán)境工程與化學(xué)學(xué)院，河南 洛陽(yáng) 471023

磷是植物生長(zhǎng)發(fā)育的重要物質(zhì)基礎(chǔ)，但土壤中95%以上的磷是難以被植物吸收利用的難溶性磷（Pérez et al．，2007）。通過(guò)施肥進(jìn)入土壤的磷大部分與鈣、鐵、鋁等金屬陽(yáng)離子相結(jié)合形成難溶性磷酸鹽而在土壤中積累，容易造成磷礦資源浪費(fèi)以及土壤板結(jié)、環(huán)境污染等生態(tài)環(huán)境問(wèn)題（李海云等，2015）。溶磷微生物能夠?qū)⑼寥乐须y溶性磷轉(zhuǎn)化為植物可吸收利用的形態(tài)，提高磷肥利用率，減少環(huán)境污染，被認(rèn)為是安全、高效活化土壤難溶磷的生物措施（Sharma et a1.，2013）。溶磷微生物在土壤中存活及其溶磷能力易受植物種類和根際土壤環(huán)境等因素影響，因此，從特定植物根際環(huán)境篩選獲得與植物親和性好、易于在根際定殖的高效溶磷微生物，是當(dāng)前亟待解決的科學(xué)問(wèn)題。

迄今為止，從植物根際土壤篩選得到的溶磷微生物主要包括細(xì)菌、真菌和放線菌，并且溶磷真菌的數(shù)量和種類遠(yuǎn)少于溶磷細(xì)菌，但其溶磷能力普遍高于溶磷細(xì)菌，并具有較強(qiáng)的溶磷遺傳穩(wěn)定性（趙小蓉等，2002；王光華等，2003；于群英等，2012）。目前，已研究報(bào)道的溶解難溶無(wú)機(jī)磷能力較強(qiáng)的真菌主要有曲霉屬（Aspergillus）和青霉屬（Penicillium），其中，拜萊青霉（Penicillium bilaii）能顯著提高土壤有效磷含量，促進(jìn)多種作物產(chǎn)量的提高，是國(guó)際上普遍認(rèn)可的溶磷效果非常好的溶磷真菌，應(yīng)用該菌制成的溶磷微生物肥料已在加拿大被商業(yè)化生產(chǎn)（王光華等，2003；Elias et al.，2016）。國(guó)內(nèi)主要應(yīng)用巨大芽孢桿菌（Bacillus megatarium）生產(chǎn)溶磷微生物肥料（史發(fā)超等，2014）。因此，不斷挖掘高效溶磷真菌菌種資源具有重要意義和應(yīng)用前景。

牡丹（Paeonia suffruticosa）屬于毛茛科芍藥屬落葉小灌木，素有“國(guó)色天香”、“花中之王”之美譽(yù)，隨著牡丹產(chǎn)業(yè)由觀賞、藥用拓展至食用、保健等多個(gè)領(lǐng)域，其種植面積逐年增加。施肥是非常重要的牡丹栽培管理措施，為使牡丹花大色艷和高產(chǎn)，過(guò)量施用無(wú)機(jī)磷肥已成為普遍現(xiàn)象，這造成牡丹園土壤理化性狀及結(jié)構(gòu)惡化、微生物種群結(jié)構(gòu)失衡、病害嚴(yán)重（Xue et al.，2014；Huang et al.，2014）。然而，有關(guān)牡丹根際土壤溶磷微生物的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究從牡丹根際土壤中篩選溶磷效果較好的溶磷真菌，研究確定其對(duì)不同難溶磷的溶磷效果及其對(duì)牡丹生長(zhǎng)的影響，旨在為牡丹高效生物肥料的研制提供優(yōu)良菌種資源以及為維持牡丹產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 培養(yǎng)基

無(wú)機(jī)磷培養(yǎng)基：葡萄糖10.0 g，NaCl 0.3 g，KCl 0.3 g，(NH4)2SO40.5 g，MgSO4·7H2O 0.3 g，F(xiàn)eSO4·4H2O 0.036 g，MnSO4·4H2O 0.03 g，Ca3(PO4)25.0 g，瓊脂 18.0 g，蒸餾水 1000 mL，pH 7.0～7.5。

PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯 200 g，葡萄糖20 g，瓊脂18 g，蒸餾水1000 mL，自然pH值。

1.2 根際土壤樣品的采集

從河南省洛陽(yáng)市國(guó)家牡丹園選擇品種為洛陽(yáng)紅的牡丹健康植株，隨機(jī)挖出5株，抖落根系外圍土，再用毛刷將粘在根上的根際土壤收集到無(wú)菌塑料袋中混勻，立即保存于4 ℃冰箱中，用于牡丹根際溶磷真菌的篩選。

1.3 溶磷真菌的篩選

稱取10 g根際土壤樣品于250 mL三角瓶中，加90 mL無(wú)菌水，180 r·min-1振蕩15 min制備土壤懸液，再用 10倍稀釋法，依次制備 10-2、10-3和 10-4的土壤稀釋液，分別涂布于無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基上，然后置于28 ℃生化培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)，待菌落長(zhǎng)出后，挑取有明顯溶磷圈且培養(yǎng)特征有明顯區(qū)別的菌落進(jìn)行分離純化，保存。將純化菌株接種于無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基，于28 ℃培養(yǎng)4 d，測(cè)量菌落的溶磷圈直徑（D）與菌落直徑（d），每個(gè)菌株重復(fù)3次。

將純化菌株接種于PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)，使其大量產(chǎn)孢，然后洗入無(wú)菌水中，振蕩分散孢子，制備成1×108cfu·mL-1的孢子懸浮液，按照1%的接種量接入到無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基，同時(shí)以加入等量的無(wú)菌水作為對(duì)照，每個(gè)處理 3次重復(fù)。于28 ℃、180 r·min-1下振蕩培養(yǎng) 7 d，將培養(yǎng)液于4 ℃、10000 r·min-1下離心 10 min，采用鉬銻抗比色法測(cè)定上清液中有效磷含量（中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部種植業(yè)管理司，2010）。

根據(jù)菌株在無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基上的D/d值和液體培養(yǎng)基中的溶磷量，篩選出溶磷效果較好的菌株，對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步研究。

1.4 溶磷菌株的鑒定

將菌株接種于 PDA培養(yǎng)基平板，參照《真菌鑒定手冊(cè)》觀察其培養(yǎng)特征，顯微鏡下觀察菌絲有無(wú)隔膜、孢子的形狀、顏色及其著生方式等菌體形態(tài)特征（魏景超，1979）。

采用真菌基因組DNA抽提試劑盒提取菌株的基因組 DNA，以通用真菌引物 NS1（ 5′-GTAGTCATATGCTTGTCTC-3′） 和 NS6（5′-GCATCACAGACCTGTTATTGCCTC-3′）擴(kuò)增菌株的18S rDNA序列，測(cè)序由上海生工生物工程股份有限公司完成，將所測(cè)得序列通過(guò)NCBI的Blast程序與GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中核酸序列進(jìn)行比對(duì)，將該菌株序列以及相似性較高序列使用ClustalX 2.1軟件進(jìn)行完全比對(duì)分析，然后采用MEGA 6.06軟件的Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。

1.5 菌株的溶磷遺傳穩(wěn)定性試驗(yàn)

將菌株接種到PDA培養(yǎng)基上傳代培養(yǎng)30次，將每代培養(yǎng)物接種于無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基中，于28 ℃、180 r·min-1下振蕩培養(yǎng)7 d，測(cè)定其有效磷含量，分析菌株溶磷量隨傳代次數(shù)的變化。

1.6 菌株對(duì)難溶磷源的溶解能力分析

以無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，將難溶磷源分別設(shè)置為等量的磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉，培養(yǎng)基的其他成分不變，按照 1%的接種量將菌株的孢子懸液接入到含不同難溶磷源的培養(yǎng)基中，同時(shí)設(shè)不接菌對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)，28 ℃、180 r·min-1下振蕩培養(yǎng)7 d，分別于第24、48、72、96、120、144、168小時(shí)測(cè)定培養(yǎng)液中有效磷含量和pH值。

1.7 菌株的土壤溶磷效果及促生效果試驗(yàn)

供試土壤取自河南省洛陽(yáng)市國(guó)家牡丹園褐土，有機(jī)碳 13.2 g·kg-1，全氮 1.26 g·kg-1，有效磷 12.8 mg·kg-1，pH 值 7.40。采用口徑為 16 cm，深為 15 cm的塑料盆缽進(jìn)行試驗(yàn)，每盆裝土1 kg。試驗(yàn)設(shè)置對(duì)照處理（不接菌，分別施用磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅、磷礦粉）、接種菌株處理（接菌，分別施用磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅、磷礦粉），每種處理6個(gè)重復(fù)。將無(wú)菌水制備的菌株孢子懸液（1×108cfu·mL-1）以 10 mL·kg-1的用量均勻施加到土壤中，每種難溶磷源以 1 g·kg-1的用量與其充分混勻。采用沙藏層積和低溫處理洛陽(yáng)紅牡丹種子，選取生根長(zhǎng)度一致的種子種植于盆中，每盆1株，80 d后，測(cè)量牡丹株高、葉面積、根長(zhǎng)、地上部干重、地下部干重，同時(shí)測(cè)定土壤有效磷含量（鮑士旦，2000）。

1.8 數(shù)據(jù)分析

運(yùn)用Microsoft Excel 2007對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，圖表中數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。運(yùn)用軟件 SPSS 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析（One-way ANOVA），在0.05顯著性水平下進(jìn)行LSD差異顯著性檢驗(yàn)和多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 溶磷真菌的篩選

經(jīng)過(guò)初篩，能在無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基上形成明顯溶磷圈的真菌菌株共 3株（表 1），將菌株編號(hào)為PPSF1-3，其中，菌株P(guān)PSF1的溶磷圈D/d>2.0（圖1）。通過(guò)無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基復(fù)篩，菌株P(guān)PSF1的溶磷量顯著高于菌株P(guān)PSF2和PPSF3。無(wú)論采用無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基還是無(wú)機(jī)磷液體培養(yǎng)基，菌株P(guān)PSF1均表現(xiàn)出較好溶磷效果，因此，將其作為進(jìn)一步研究的供試菌株。

表1 牡丹根際溶磷真菌的溶磷能力Table 1 Phosphate solubilization capacity of strains isolated from Paeonia suffruticosa rhizosphere

圖1 菌株P(guān)PSF1在無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基上形成的溶磷圈Fig. 1 Soluble phosphorus halo generated by strain PPSF1 in inorganic phosphate solid medium

圖2 菌株P(guān)PSF1在PDA 培養(yǎng)基上的菌落（a）、菌絲（b）、分生孢子頭（c）及分生孢子（d）形態(tài)Fig. 2 Morphologies of the colony (a), mycelium (b), conidial head (c), and conidiophore (d) of strain PPSF1 on PDA medium

2.2 菌株的分類鑒定

菌株P(guān)PSF1在PDA固體培養(yǎng)基上的形態(tài)特征見(jiàn)圖2。該菌生長(zhǎng)迅速，菌落不透明，正面呈黑色，邊緣有白色絨狀菌絲，反面有放射性凹溝。菌絲多細(xì)胞有隔膜，分生孢子梗頂端膨大形成球形頂囊，表面以放射狀生出小梗，分生孢子為球形，呈褐黑色。根據(jù)以上特征，初步確定該菌株為曲霉屬（Aspergillus）的黑曲霉（Aspergillus niger）。

菌株 PPSF1的 18S rDNA序列經(jīng)測(cè)定長(zhǎng)度為1300 bp，提交于GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)，序列登錄號(hào)為MG890328。在NCBI上通過(guò)Blast同源性比對(duì)分析，以同源性較高的序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)（圖3），菌株P(guān)PSF1與黑曲霉（Aspergillus niger）的同源性達(dá)到100%，處于發(fā)育樹(shù)的同一分支，親緣關(guān)系最為接近。結(jié)合菌株的形態(tài)特征，進(jìn)一步確定菌株P(guān)PSF1為黑曲霉（Aspergillus niger）。

圖3 基于18S rDNA序列同源性構(gòu)建菌株P(guān)PSF1的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)Fig. 3 Phylogenetic tree of strain PPSF1 constructed based on the homology of 18S rDNA sequences

2.3 菌株的溶磷遺傳穩(wěn)定性

將菌株P(guān)PSF1傳代培養(yǎng)30次，隨傳代次數(shù)的增加，其溶磷量未發(fā)生顯著變化（圖4），基本穩(wěn)定在(711.2±22.8) mg·L-1范圍內(nèi)，表明菌株 PPSF1的溶磷能力具有較好的遺傳穩(wěn)定性，此特性有助于該菌株的后續(xù)深入研究及開(kāi)發(fā)應(yīng)用。

圖4 菌株P(guān)PSF1的溶磷遺傳穩(wěn)定性Fig. 4 Genetic stability of phosphate solubilizing strain PPSF1

2.4 菌株對(duì)不同磷源的溶解效果

由圖5可知，菌株P(guān)PSF1在以磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉為磷源的液體培養(yǎng)基中的溶磷量均隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)呈現(xiàn)先逐漸升高而后基本趨于穩(wěn)定的趨勢(shì)。以磷酸鈣和磷酸鋅為磷源時(shí)，溶磷量在培養(yǎng)的第 96小時(shí)達(dá)到最高；以磷酸鋁和磷酸鐵為磷源時(shí)，溶磷量在培養(yǎng)的第120小時(shí)達(dá)到最高；以磷礦粉為磷源時(shí)，溶磷量在培養(yǎng)的第144小時(shí)達(dá)到最高。菌株P(guān)SPSF1在不同無(wú)機(jī)難溶磷源下的最大溶磷量表現(xiàn)為磷酸鈣（720.6 mg·L-1）>磷酸鋅（633.3 mg·L-1）>磷酸鋁（495.7 mg·L-1）>磷酸鐵（386.4 mg·L-1）>磷礦粉（173.9 mg·L-1），表明菌株P(guān)PSF1對(duì)磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉均有較強(qiáng)的溶解能力，并且對(duì)不同難溶磷源的溶磷特性有較大差異。

圖5 菌株P(guān)PSF1在不同磷源條件下的溶磷量（a）及pH（b）Fig. 5 Phosphate solubilization capacity (a) and pH (b) of PPSF1 under different phosphorus sources

菌株培養(yǎng)液的pH在5種無(wú)機(jī)難溶磷源下均呈現(xiàn)先下降后趨于穩(wěn)定的變化趨勢(shì)。以磷酸鈣和磷酸鋅為磷源時(shí)，在培養(yǎng)的第 96小時(shí)下降到最低；以磷酸鋁和磷酸鐵為磷源時(shí)，在培養(yǎng)的第120小時(shí)下降到最低；以磷礦粉為磷源時(shí)，在培養(yǎng)的第144小時(shí)下降到最低。相關(guān)性分析顯示，在磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉培養(yǎng)液中，菌株溶磷量與pH的相關(guān)系數(shù)分別為-0.953、-0.957、-0.947、-0.962、-0.959，均呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系（P＜0.01）。

2.5 菌株對(duì)土壤難溶磷的溶解能力

圖6 菌株P(guān)PSF1對(duì)土壤有效磷含量的影響Fig. 6 Effect of strain PPSF1 on soil available phosphate contentn=3

由圖6可知，無(wú)論在施用哪種難溶磷源條件下，接種菌株 PPSF1的土壤有效磷含量均顯著高于未接菌對(duì)照。接種菌株P(guān)PSF1在施用磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉的土壤中有效磷含量分別比相應(yīng)的未接菌對(duì)照提高386.5%、265.3%、175.7%、327.6%和95.7%，菌株P(guān)PSF1對(duì)土壤中不同難溶磷源的溶解能力大小為磷酸鈣>磷酸鋅>磷酸鋁>磷酸鐵>磷礦粉，在以磷酸鈣為磷源條件下其溶磷效果最好。

2.6 菌株對(duì)牡丹生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

在施用磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉條件下，接種菌株P(guān)PSF1對(duì)牡丹生長(zhǎng)指標(biāo)的影響見(jiàn)表2。與未接菌對(duì)照相比，接種菌株P(guān)PSF1使牡丹株高、葉面積、根長(zhǎng)、地上部干重和地下部干重均顯著增加，分別提高了19.8%～40.7%、13.6%～22.7%、29.7%～46.2%、34.5%～58.5%和 41.2%～64.4%。菌株P(guān)PSF1在不同難溶磷源條件下對(duì)牡丹生長(zhǎng)的促進(jìn)效果表現(xiàn)為磷酸鈣>磷酸鋅>磷酸鋁>磷酸鐵>磷礦粉，在以磷酸鈣為磷源條件下對(duì)牡丹生長(zhǎng)的促進(jìn)效果最好，使牡丹的株高、葉面積、根長(zhǎng)、地上部干重和地下部干重分別增加40.7%、22.7%、46.2%、58.5%和64.4%。

3 討論

牡丹根際溶磷真菌相對(duì)較少，僅分離到3株能在無(wú)機(jī)磷固體培養(yǎng)基上形成明顯溶磷圈的真菌菌株，溶磷效果較好的菌株 PPSF1被鑒定為黑曲霉（Aspergillus niger），目前已有從小麥（Triticum aestivum）、大豆（Glycine max）、花生（Arachis hypogaea）、白菜（Brassica pekinensis）、西紅柿（Lycopersicon esculentum）、類蘆（Neyraudia reynaudiana）等植物根際土壤分離到具有溶磷能力的黑曲霉的研究（馮宏等，2010；劉文干等，2012；Lietal.，2015；Tallapragada，2015；Xiao et al.，2015；楊順等，2018）。然而，已報(bào)道的黑曲霉的溶磷能力有較大差異，其對(duì)磷酸鈣的溶磷量大都在300～500 mg·L-1。本研究從牡丹根際分離到的菌株P(guān)PSF1對(duì)磷酸鈣的最高溶磷量為720.6 mg·L-1?？赡苡捎诤谇狗蛛x地覆蓋植物不同，不同植物根系分泌物及根部脫落物長(zhǎng)期為其提供的生長(zhǎng)環(huán)境及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的差異，導(dǎo)致同種溶磷菌因來(lái)自不同環(huán)境而出現(xiàn)定殖能力及溶磷能力的差異（Dassen et al.，2017；丁晶等，2017；黃藝等，2018）。

液體培養(yǎng)試驗(yàn)及盆栽試驗(yàn)均表明，溶磷真菌PPSF1對(duì)磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉等不同無(wú)機(jī)難溶磷源均具有較強(qiáng)溶解能力，表明該菌應(yīng)用范圍很廣，在含有多種難溶態(tài)磷源的土壤中均能發(fā)揮溶磷作用。本研究發(fā)現(xiàn)，溶磷真菌PPSF1對(duì)不同難溶態(tài)磷源的溶解特性有較大差異，可能由于不同難溶態(tài)磷源的結(jié)構(gòu)和成分差異較大，導(dǎo)致溶磷微生物對(duì)其溶解能力顯著不同。

劉文干等（2012）從花生根際篩選到的溶磷菌黑曲霉（Aspergillus niger）B1-A，在不同接種量下，對(duì)磷酸鐵和磷酸鋁的溶磷量與培養(yǎng)液pH呈極顯著負(fù)相關(guān)。喬志偉等（2013）從石灰性土壤分離到的黑曲霉（Aspergillus niger）Z60，在磷酸鐵培養(yǎng)液中的有效磷含量與培養(yǎng)液pH呈顯著負(fù)相關(guān)，而在磷酸鋁培養(yǎng)液中的有效磷含量與 pH相關(guān)性不顯著。馮宏等（2010）從類蘆根際土壤分離到的黑曲霉（Aspergillus niger）FP1，在磷酸鈣、磷酸鋁和磷酸鐵培養(yǎng)液中的溶磷量與培養(yǎng)液的pH值均無(wú)顯著相關(guān)性。本研究發(fā)現(xiàn)，菌株P(guān)PSF1在磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉培養(yǎng)液中，菌株溶磷量與pH均呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系。這些結(jié)果表明，溶磷菌的溶磷量與培養(yǎng)液pH的關(guān)系比較復(fù)雜，即使是同種溶磷菌，也可能受菌株不同株型、不同種類難溶性磷酸鹽和不同種類碳氮源的影響。

表2 菌株P(guān)PSF1對(duì)牡丹生長(zhǎng)的影響Table 2 Effect of strain PPSF1 on the growth of Paeonia suffruticosa

有關(guān)溶磷真菌對(duì)植物促生效應(yīng)的研究已有報(bào)道。Singh et al.（2011）的研究發(fā)現(xiàn)，施加溶磷真菌草酸青霉（Penicillium oxalicum）使小麥和玉米植株的地上部生物量和地下生物量相對(duì)于對(duì)照均有顯著增加。Xiao et al.（2009）研究表明，土壤中施加溶磷真菌Penicillium expansumHB-1能顯著增加小麥植株的莖與根的干重。史發(fā)超等（2014）報(bào)道溶磷真菌斜臥青霉（Penicillium decumbens）P83對(duì)玉米生長(zhǎng)具有顯著作用，使玉米植株鮮重提高9.5%～89.2%、干重增加35%～231%。本研究顯示，施加Aspergillus nigerPPSF1使牡丹的株高、葉面積、根長(zhǎng)、地上部干重和地下部干重均顯著高于未接菌對(duì)照。眾所周知，植物體內(nèi)多種生理生化過(guò)程都需要磷的參與，磷促進(jìn)細(xì)胞分裂，促使植物生長(zhǎng)發(fā)育。牡丹生長(zhǎng)指標(biāo)的改善很可能由于該溶磷真菌能將土壤中的難溶態(tài)磷溶解為能被牡丹吸收利用的有效態(tài)磷所致（Reyes et al.，2002）。此外，溶磷真菌通過(guò)向根際分泌植物生長(zhǎng)素也可促使牡丹生長(zhǎng)（代金霞等，2017）。

4 結(jié)論

（1）從牡丹根際土壤分離到一株具有較強(qiáng)溶磷能力的真菌菌株 PPSF1，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征和 18S rDNA序列分析將其鑒定為黑曲霉（Aspergillus niger）。

（2）菌株P(guān)PSF1對(duì)磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉均具有較強(qiáng)溶解能力，其對(duì)不同磷源的溶磷量表現(xiàn)為磷酸鈣>磷酸鋅>磷酸鋁>磷酸鐵>磷礦粉，在 5種難溶磷源培養(yǎng)液中的溶磷量均與pH呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)。

（3）菌株P(guān)PSF1在含有磷酸鈣、磷酸鋁、磷酸鐵、磷酸鋅和磷礦粉的土壤中溶磷效果顯著，使牡丹的株高、葉面積、根長(zhǎng)、地上部干重和地下部干重均顯著增加，有望成為高效生物磷肥的優(yōu)良菌種資源。