食品中合成著色劑檸檬黃的測(cè)定儀器條件對(duì)比

□ 葉 琳 廣東省肇慶市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所

檸檬黃（tartrazine），化學(xué)名稱是1-(4-磺酸苯基)-4-(4-磺酸苯基偶氮)-5-吡唑啉酮-3-羧酸三鈉鹽，溶于水后呈現(xiàn)出鮮艷嫩黃色。由于檸檬黃安全、無(wú)毒、穩(wěn)定，大部分不會(huì)在人體內(nèi)積儲(chǔ)且小部分經(jīng)代謝的產(chǎn)物對(duì)人體無(wú)害，所以它是一種安全的食用合成著色劑。根據(jù)GB 2760-2014《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》中規(guī)定，不同類型的食品中檸檬黃的最大使用限量為0.04～0.5 g/kg。在GB 5009.35-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中合成著色劑的測(cè)定》[1]中規(guī)定了檸檬黃的檢測(cè)儀器條件為二極管陣列檢測(cè)器（DAD），波長(zhǎng)范圍400～800 nm，取428 nm；或者紫外吸收檢測(cè)器（UVD），波長(zhǎng)254 nm。本文將對(duì)這兩種儀器條件進(jìn)行對(duì)比分析。

1 原理

食品中人工合成著色劑用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，制成水溶液，注入高效液相色譜儀，經(jīng)反相色譜分離，根據(jù)保留時(shí)間定性和與峰面積比較進(jìn)行定量。

2 儀器和設(shè)備

高效液相色譜儀，帶二極管陣列檢測(cè)器（DAD）及紫外吸收檢測(cè)器（UVD）。

3 試劑和材料

除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

3.1 標(biāo)準(zhǔn)品

檸檬黃（CAS:1934-21-0）。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

3.2.1 合成著色劑檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)貯備液（1 mg/mL）

準(zhǔn)確稱取按其純度折算為100%質(zhì)量的檸檬黃0.1 g（精確至0.000 1 g）,置100 mL容量瓶中，加pH值為6的水到刻度，配成水溶液（1.00 mg/mL）。

3.2.2 合成著色劑檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)工作液

臨用時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)貯備液加水稀釋，經(jīng)0.45 μm 微孔濾膜過(guò)濾。配制成每毫升相當(dāng) 1.0、2.5、5.0、10、15 μg 的檸檬黃著色劑。

4 儀器條件

C18色 譜 柱，4.6 mm×250 mm，5 μm；進(jìn)樣量 10 μL；柱溫 35 ℃；二極管陣列檢測(cè)器（DAD）檢測(cè)波長(zhǎng)428 nm；紫外吸收檢測(cè)器（UVD）檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm。

5 測(cè)定

將檸檬黃標(biāo)準(zhǔn)工作液注入高效液相色譜儀，根據(jù)保留時(shí)間定性，外標(biāo)峰面積法定量。同時(shí)進(jìn)5針5.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液計(jì)算精密度[2]。

6 結(jié)果

使用二極管陣列檢測(cè)器（DAD），檢測(cè)波長(zhǎng)為428 nm的峰型及響應(yīng)值如圖1所示。

同條件下使用紫外吸收檢測(cè)器（UVD），檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm的峰型及響應(yīng)值如圖2所示。

圖1 使用DAD檢測(cè)波長(zhǎng)為428 nm的峰形圖

圖2 使用UVD，檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm的峰形圖

因此在檢測(cè)食品中的檸檬黃時(shí)，在其他條件相同下，使用二極管陣列檢測(cè)器（DAD），檢測(cè)波長(zhǎng)為428 nm比使用紫外吸收檢測(cè)器（UVD），檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)更高，峰型更好，響應(yīng)值更高。