自擬四物紫草方對(duì)大鼠抗生育作用的實(shí)驗(yàn)研究

劉泓金 魏微 唐俊玲 馬露 枉季秋 余庭

現(xiàn)代口服避孕藥多為人工合成的甾體激素避孕藥，不可用于類固醇藥物禁忌證者，且可能導(dǎo)致類早孕反應(yīng)、月經(jīng)改變、乏力、嗜睡等不良反應(yīng)[1]。目前，關(guān)于中藥抗生育作用的研究，主要集中在單味中藥的作用機(jī)制，如紫草能明顯降低大鼠血清FSH和LH水平，并抑制胚胎絨毛的生長和胚胎的發(fā)育[2-4]，金銀花[5]、穿心蓮[6-7]、牡丹皮[8]等中藥也有一定的抗生育作用。在中醫(yī)經(jīng)典中，也有四物湯等中藥用于避孕的記載[9-11]。因此，筆者擬將紫草與四物湯進(jìn)行配伍，研究四物紫草方的抗生育作用和停藥后生育恢復(fù)能力，并為臨床使用具有抗生育作用的復(fù)方中藥提供新的研究基礎(chǔ)。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

SPF級(jí)生育期雌性SD大鼠112只，體質(zhì)量（280±50）g，由西南醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)：SYXK（川）2013-181。將大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白組，單藥紫草組，四物紫草方組和四物湯組，每組28只。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥及給藥方法

生理鹽水，四川科倫藥業(yè)。紫草水浸劑、四物紫草方水浸劑和四物湯水浸劑根據(jù)灌胃劑量濃縮成生藥濃度分別為1 g/ml、4 g/ml、3 g/ml的藥液，每只大鼠3 ml/d，每日1次，連續(xù)21天。藥物由西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院提供。

1.3 觀察指標(biāo)

卵泡雌激素（FSH）和促黃體生成素（LH）（試劑盒由天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司生產(chǎn)）。分別于灌胃21天后和停藥21天后，各組隨機(jī)選取9只大鼠，采用同位素放射免疫測(cè)定血清FSH、LH含量。

1.4 合籠實(shí)驗(yàn)

按照雌雄比例為2∶1進(jìn)行持續(xù)合籠，連續(xù)觀察大鼠的妊娠、生育情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 大鼠血清FSH、LH水平

連續(xù)灌胃 21 天后，與空白組相比，單藥紫草組（t=18.95，P＜0.001），四物紫草方組（t=20.78，P＜0.001）和四物湯組（t=3.57，P=0.023）三組FSH水平明顯降低，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；單藥紫草組（t=4.29，P=0.01）和四物紫草方組（t=8.19，P=0.001）LH水平明顯降低，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。停藥21天后，與空白組相比，單藥紫草組（t=3.03，P=0.039）FSH水平下降明顯，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。四物湯組與四物紫草方組比較，連續(xù)灌胃21天后，F(xiàn)SH（t=7.12，P=0.002），LH（t=3.71，P=0.021）均下降明顯，P＜0.05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，停藥后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)無意義。見表1。

2.2 合籠實(shí)驗(yàn)結(jié)果

連續(xù)灌胃21天后，以雌雄比2∶1的比例持續(xù)合籠。空白組、單藥紫草組、四物紫草方組、四物湯組的妊娠率分別為60%、0%、0%、70%。

單藥紫草組和四物紫草方組未孕大鼠，停藥21天后，再次以雌雄比2∶1的比例持續(xù)合籠。單藥紫草組、四物紫草方組的妊娠率分別為60%、70%，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為“宮寒不孕”，歷代醫(yī)家多選用寒涼藥物抑制生育機(jī)能。文獻(xiàn)記載，桃紅四物湯有緊急避孕的作用[12]；《婦人大全良方》將四物湯與蕓苔子組成的復(fù)方用于避孕的記載；《馮建中驗(yàn)方》中記有四物湯加知母、黃柏組成的復(fù)方可用于女性避孕。本研究所用自擬四物紫草方中，紫草具有祛心腹邪氣，療五瘡，補(bǔ)中益氣，利九竅通水道，涼血解毒等諸多功效，取其苦寒藥性及涼血解毒之功效為君藥。同時(shí)輔以的四物湯中，當(dāng)歸、熟地、白芍、川芎四味合用，補(bǔ)而不滯，滋而不膩，養(yǎng)血活血，可使宮血調(diào)和，用于緩和紫草之寒性，有利于停藥后大鼠生育能力的恢復(fù)。

表1 4組大鼠血清FSH、LH水平

本研究表明，四物紫草方與單藥紫草都能通過抑制下丘腦-垂體-性腺軸（HPGA）功能顯著降低大鼠血清FSH和LH水平，從而產(chǎn)生抗生育作用。綜上所述證明，自擬四物紫草方的抗生育作用與單藥紫草無顯著差異且抗生育效果和停藥后生育恢復(fù)能力均優(yōu)于單藥紫草。指導(dǎo)臨床運(yùn)用紫草進(jìn)行避孕時(shí)，在辨明體質(zhì)和健康狀況后，可用四物紫草方代替單藥紫草。

目前，對(duì)紫草抗生育作用實(shí)驗(yàn)研究中，不同文獻(xiàn)對(duì)方藥劑型、藥物劑量、煎煮方法、用藥時(shí)長和恢復(fù)生育能力所需時(shí)間的記載均不相同。明確四物紫草方的作用機(jī)制、相關(guān)用量和使用條件是其能否作為臨床常用的抗生育復(fù)方中藥的必要條件，因此有必要進(jìn)一步研究。