GC—ECD檢測馬齒莧中六六六和滴滴涕的農藥殘留

谷勇 唐文麗 羅成 侯杰榮

【摘 要】 目的： 考察馬齒莧中六六六（BHC）和滴滴涕（DDT）農藥殘留量，為該藥食兩用藥材的質量控制提供依據。方法：采用GC-ECD對馬齒莧中BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、滴滴涕（PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT）8 種有機氯類農藥殘留的限量檢測。結果：所建立的含量測定方法線性關系良好，平均回收率為91.9%～97.3%，RSD為1.5%～4.2%，檢出限為0.0026～0.032μg·L-1。結論： 該方法測定結果準確，靈敏度高，適合于馬齒莧中有機農藥殘留量的測定。

【關鍵詞】 馬齒莧；六六六；滴滴涕；有機農藥殘留

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2018）04-0025-03

Abstract：Objective To establish a method for determination of hexachlorocyclohexane（BHC） and clofenotane （DDT） pesticide residues in Portulacae oleracea L. by GC-ECD，and provide the basis for quality control of the medicine and food dual-purpose. MethodsUsing gas chromatography （GC） for limited detecting the eight kinds of organochlorine pesticide residues， such as BHC （α-BHC，β-BHC， γ-BHC， and δ-BHC） and DDT （4，4'-DDE，4，4'-DDD，2，4'-DDT，and 4，4'-DDT） in Portulacae oleracea. Results The detection linearity of BHC and DDT were very good， the average recovery rates were 91.9%～97.3%，1.5%～4.2% RSD，The detection limitation was 0.0026～0.032μg·L-1. Conclusion The established method is accurate， highly sensitive， and can be used for the determination of organchlorinated pesticide residues in Portulacae oleracea L..

Keywords：Portulacae oleracea L.；BHC； DDT； Organochlorine pesticide residues

馬齒莧來源于馬齒莧科植物馬齒莧Portulaca oleracea L.的干燥地上部分。在《本草經集注》、《新修本草》等古籍中均有記載，又稱為五行草、馬齒菜、長命草等。我國南北各地均有分布，生于菜園、農田、路旁等，盛產于四川，在我國作為傳統中藥已經有數千年的歷史。其味酸性寒，歸肝、大腸經，具有清熱解毒、涼血止血、止痢的功效，用于熱毒血痢、膿腫、濕疹、丹毒、毒蛇咬傷、便血、痔血、婦女崩漏下血[1]。馬齒莧含有有機酸、黃酮、多糖等藥用成分，還富含氨基酸、維生素C、維生素B1及維生素B2等，具有較高的藥用及食用價值[2-3]。其被我國衛(wèi)計委列入101種藥食同源名單，屬藥食兩用植物，在各地被廣泛用作菜肴。為保障該藥食兩用植物的安全性，筆者實驗采用GC-ECD對其中的六六六（BHC）和滴滴涕（DDT）共8種有機氯農藥殘留量進行了檢測[4-6]，了解該類農藥在馬齒莧中的殘留水平，現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 7820A 氣相色譜儀系統（安捷倫科技有限公司），ECD檢測器；湖南湘儀TD3（800B）自動平衡離心機（湖南湘儀公司）；KQ-50B 型超聲清潔器（昆山舒美）；Sartorius BT 25S電子天平（德國賽多利斯）。

1.2 材料 二氯甲烷和石油醚（60～90℃）為色譜純，氯化鈉和無水硫酸鈉為分析純。8種有機農藥標準品：α-BHC（GBW（E）081427）、β-BHC（GBW（E）081428）、γ-BHC（GBW（E）081429）、δ-BHC（GBW（E）081430）、PP'-DDE（GBW（E）081683）、OP'-DDT（GBW（E）081635）、PP'-DDD（GBW（E）081632）、PP'-DDT（GBW（E）081662），由國家標準物質研究中心提供。

3批馬齒莧樣品購自宜賓市不同地，經西南醫(yī)科大學侯杰榮主管中藥師鑒定為馬齒莧科植物馬齒莧。

2 方法

2.1 GC色譜條件 彈性石英毛細管柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）OV-1701，63Ni-ECD 電子捕獲檢測器。進樣口和檢測器溫度分別為230℃、 300℃，進樣方式為不分流進樣，進樣量1μL。程序升溫：初始溫度150℃，8℃/min升至230℃，保持15 min。理論塔板數按α-BHC峰計算不低于1×106，相鄰2 個色譜峰均得到較好的分離，峰型對稱性良好。

2.2 對照品儲備液的制備 精密稱取各對照品適量，用石油醚制成每毫升約含0.25 mg的溶液，搖勻即得對照品儲備液，精密量取上述溶液50μL，置25 mL 量瓶中，用石油醚制成每毫升含250 ng的混合儲備液；再精密量取該混合儲備液1 mL置10 mL 量瓶中，用石油醚制成每毫升含25 ng 的混合對照品溶液，搖勻即得。

2.3 供試品溶液的制備 取適量于60℃干燥3 h的樣品，粉碎成細粉，取3 g，精密稱定后置于200 mL 具塞錐形瓶中，加入20 mL水浸泡，過夜。精密加入50 mL丙酮，稱定質量，超聲處理35 min，放冷，再稱定質量，加丙酮補充減少質量，加入氯化鈉6 g，精密加二氯甲烷25 mL，稱定質量，超聲處理20 min，放冷，再稱定質量，用二氯甲烷補充減少質量，靜置分層，將有機相快速轉入裝有一定量無水硫酸鈉的具塞錐形瓶中，放置4 h。精密量取40 mL，在38 ℃水浴上減壓濃縮到近干，加入少量石油醚如前反復操作除凈二氯甲烷及丙酮，用石油醚溶解并轉移至10 mL具塞刻度離心管中，加石油醚精密稀釋至5 mL，小心加入硫酸1 mL，振搖1 min，離心（3000 r/min）10 min，吸取上清液備用。

3 方法學考察

3.1 溶劑空白試驗 以提取溶劑石油醚作為空白樣品直接進氣相色譜儀，考察石油醚溶劑的干擾。結果見圖1。

3.2 標準曲線及線性關系考察 精密吸取混合對照品溶液1、2、5、10、15、20 μL，按相應色譜條件進樣，以峰面積計算，得相應農藥的回歸方程。結果見表1。

3.3 精密度試驗 取同一混合對照品溶液，按2.1色譜條件連續(xù)進樣6次，得到各組分各次的峰面積，計算相對標準偏差，RSD在1.25%～2.92%，表明進樣精密度良好。

3.4 穩(wěn)定性試驗 取同一份供試品，按照擬定方法進行供試品的制備，分別于 0、6、12、24 h 間隔進樣4次，測定各對照品的峰面積積分值，α-BHC、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC的RSD值分別為2.8%、1.7%、2.6%、4.1%， PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT的RSD值分別為3.3%、3.1%、1.5%、2.7%。結果表明樣品在 24 h 內穩(wěn)定。

3.5 重復性試驗 取馬齒莧樣品 6 份，按照擬定的方法進行供試品的制備和檢測，測定結果α-BHC、γ-BHC、β-BHC、δ-BHC、 PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT的RSD值分別為2.4%、1.1%、2.9%、3.4%、1.5%、2.2%、2.7%、3.6%，表明該方法重復性良好。

3.6 加樣回收率試驗 精密稱定含量已知的馬齒莧樣品 6份，每份約1.5g，分別加入樣品含量80%、100%、120%的各成分對照品，照2.3方法制備供試液，計算各組分回收率及RSD值，結果見表2。

3.7 樣品測定 精密吸取供試品溶液平行進樣2次，取均值，按外標法以峰面積計算馬齒莧中8種有機氯農藥的殘留量，測定結果見表3。

4 討論

在中藥材生產中，存在肥料施用不科學、濫用農藥等問題，導致藥材質量不穩(wěn)定或者下降。大量使用的化肥、農藥，對我國的生態(tài)環(huán)境造成巨大破壞。中藥材在種植過程中，不可避免地會有農藥殘留。中藥材成為化學農業(yè)的“受害者”。農藥殘留是中藥材不可回避的問題，也是藥品安全性的重要指標之一，《藥用植物及制劑進出口綠色行業(yè)標準》規(guī)定：含總BHC（α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC ）不得超過0.1mg·kg-1；含總滴滴涕（PP′-DDE、OP′-DDT、PP′-DDD、PP′-DDT）不得超過0.1mg·kg-1。實驗的結果表明，馬齒莧藥材中BHC和DDT測定結果均低于限量。本實驗采用的是對鹵代烴有特殊選擇性的ECD檢測器，靈敏度高，選擇性好，所建立的檢測方法準確、可行， 可用于馬齒莧中8種有機氯農藥的含量檢測。

參考文獻

[1]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（一部）[M].2015版.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：49.

[2]牛廣財，朱丹.馬齒莧化學成分及其藥理作用研究進展[J].安徽農業(yè)科學，2005，33（6）：1090-1092.

[3]楊政.馬齒莧的研究概況及展望[J].福建中醫(yī)藥，2000，31 （5）：43-44.

[4]沈廷明， 劉知遠， 吳仲玉， 等. ICP-MS 法測定金線蓮中5 種重金屬元素 [J]. 中草藥， 2016， 47（8）： 1405-1408.

[5]李飛， 柴彥兵， 張耀廣， 等. 氣相色譜檢測牛乳中六六六、滴滴涕殘留方法研究 [J]. 食品安全導刊， 2015（3）： 98-100.

[6]劉桂寧， 強維， 鐘闈楨， 等. 固相萃取/毛細管氣相色譜法測定肉桂皮中六六六、滴滴涕農藥殘留量 [J]. 分析測試學報， 2014， 33（1）： 103-107.