用碘伏“制服”病毒

張之遠(yuǎn)

經(jīng)濟(jì)高速發(fā)展的今天，國(guó)民素質(zhì)正在提高，但隨地吐痰的現(xiàn)象仍屢見(jiàn)不鮮，這不僅有損我國(guó)的形象，也易導(dǎo)致疾病的傳播。痰液尤其是病人的痰液中含有大量致病菌，易傳播疾病。

我對(duì)痰液處理的問(wèn)題產(chǎn)生了好奇，于是和同學(xué)一起著手研究常見(jiàn)消毒劑對(duì)痰液的殺菌效果，希望能找到處理痰液的好方法。

查閱資料時(shí)發(fā)現(xiàn)我校2014級(jí)同學(xué)曾做過(guò)關(guān)于痰液的研究性學(xué)習(xí)課題，他們的課題研究給我提供了參考。

一、研究目標(biāo)

通過(guò)閱讀學(xué)長(zhǎng)們的研究材料，我發(fā)現(xiàn)他們的實(shí)驗(yàn)過(guò)程存在兩個(gè)問(wèn)題：一是將實(shí)驗(yàn)用的痰液稀釋1000倍，即用痰液稀釋液進(jìn)行痰液的消毒實(shí)驗(yàn)是如何確定的，依據(jù)不清楚。二是實(shí)驗(yàn)用的痰液稀釋液標(biāo)本源自一個(gè)人，實(shí)驗(yàn)結(jié)果有極大的偶然性，實(shí)驗(yàn)結(jié)論是由個(gè)別例子得出的普遍結(jié)論。

由此，我明確了研究方向：1.通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定痰液稀釋液的濃度，以便觀察痰液中菌落的個(gè)數(shù)。2.在做好第一步的基礎(chǔ)上，采集多個(gè)不同年齡段、不同性別的人的痰液標(biāo)本進(jìn)行消毒對(duì)比實(shí)驗(yàn)，判斷碘伏對(duì)痰液的消毒效果。

二、確定痰液稀釋濃度的預(yù)實(shí)驗(yàn)

1.實(shí)驗(yàn)用品

（1）營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1瓶，一次性培養(yǎng)皿500個(gè)，一次性手套100雙，實(shí)驗(yàn)用酒精1瓶，84消毒液1瓶，碘伏1瓶。

（2）用可密封塑料袋取痰液，并記錄研究對(duì)象的姓名、性別、年齡。

（3）配制營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。稱(chēng)取16g瓊脂溶于500ml蒸餾水中，加熱溶解后分裝于4個(gè)可密封塑料瓶中，高壓滅菌后備用。

（4）取4支試管用報(bào)紙包好，可密封塑料瓶裝入50ml清水，3支平板涂布器用報(bào)紙包好，高壓蒸汽滅菌后備用。一次性吸管、移液槍待紫外滅菌后備用。

2.操作步驟

（1）將滅菌后的培養(yǎng)基快速分裝至13個(gè)培養(yǎng)皿中，并進(jìn)行編號(hào)。

（2）對(duì)痰液進(jìn)行濃度梯度稀釋。

將4支試管編號(hào)為1、2、3、4，用一次性吸管吸取1ml痰液放入1號(hào)試管中，加入9ml無(wú)菌水混合均勻，制得稀釋10倍的痰液。

用一次性吸管吸取1ml 1號(hào)試管中的液體注入2號(hào)試管中，再加入9ml無(wú)菌水，混合均勻，制得稀釋100倍的痰液。

用一次性吸管吸取1ml 2號(hào)試管中的液體注入3號(hào)試管中，加入9ml無(wú)菌水混合均勻，制得稀釋1000倍的痰液。

用一次性吸管吸取1ml 3號(hào)試管中的液體注入4號(hào)試管中，加入9ml無(wú)菌水混合均勻，制得稀釋10 000倍的痰液。

（3）分別用移液槍吸取0.1ml 1號(hào)試管中的痰液稀釋液注入1-1、1-2、1-3培養(yǎng)皿中，吸取0.1ml 2號(hào)試管中的痰液稀釋液注入2-1、2-2、2-3培養(yǎng)皿中， 吸取0.1ml 3號(hào)試管中的痰液稀釋液注入3-1、3-2、3-3培養(yǎng)皿中，吸取0.1ml 4號(hào)試管中的痰液稀釋液注入4-1、4-2、4-3培養(yǎng)皿中，吸取0.1ml無(wú)菌水注入對(duì)照培養(yǎng)基中，并用平板涂布器涂布均勻。

將培養(yǎng)皿封好，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后觀察結(jié)果，取菌落個(gè)數(shù)在30至300的稀釋濃度為最佳痰液稀釋濃度。

3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

痰液被稀釋10倍時(shí)，1-1、1-2、1-3平板中的菌落數(shù)均遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于300。當(dāng)痰液被稀釋100倍時(shí)，2-1、2-2、2-3平板中的菌落數(shù)均遠(yuǎn)大于300。痰液被稀釋1000倍時(shí)，3-1、3-2、3-3平板中的菌落數(shù)仍大于300。痰液被稀釋10 000倍時(shí)，4-1、4-2、4-3平板中的菌落數(shù)位于30至300之間。

所以，痰液稀釋到10 000倍時(shí)，更加便于觀察菌落的個(gè)數(shù)。

三、滅菌實(shí)驗(yàn)

1.實(shí)驗(yàn)用品

（1）用可密封塑料袋取痰液（8種），對(duì)其進(jìn)行如下標(biāo)號(hào)：青年男、青年女、中年男、中年女、老年女、老年男、病男、病女，并記錄研究對(duì)象的姓名、性別、年齡。

（2）準(zhǔn)備試管12支，密封瓶16個(gè)，平板涂布器16個(gè)，3個(gè)可密封塑料瓶各裝入60ml清水以及配置好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，移液槍槍頭若干，待高壓滅菌后備用，一次性吸管、移液槍待紫外滅菌后備用。

2.操作步驟

（1）將滅菌后的培養(yǎng)基快速分裝至49（4×12+1）個(gè)培養(yǎng)皿中。

（2）將試管編號(hào)為青年男1、青年男2、青年男3；青年女1、青年女2、青年女3；中年男1、中年男2、中年男3；中年女1、中年女2、中年女3。

將密封瓶編號(hào)為青男84、青男酒精、青男碘伏、青男水；青女84、青女酒精、青女碘伏、青女水；中男84、中男酒精、中男碘伏、中男水；中女84、中女酒精、中女碘伏、中女水，培養(yǎng)皿編號(hào)如表1。

（3）分別取1ml痰液稀釋液于密封瓶中，分別加入不同的消毒液，在搖床上搖動(dòng)10min。

（4）分別取消毒過(guò)后的痰液0.1ml涂布到培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)皿封好，放入37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24h后觀察結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，84消毒液和碘伏對(duì)痰液中的細(xì)菌均有顯著的殺菌效果，碘伏效果最好，酒精效果最差。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

針對(duì)痰液的消毒，使用碘伏消毒效果優(yōu)于使用84消毒液消毒。因此我建議，在醫(yī)院的傳染病室可用碘伏對(duì)病人排出的體液消毒。（指導(dǎo)老師：熊梅初）