逍遙丸中薄荷鑒別方法的實(shí)驗(yàn)研究

馬 敏，崔宇宏，馬 鑫

（山西省食品藥品檢驗(yàn)所，山西太原030001）

逍遙丸是《中國(guó)藥典》收載品種，具疏肝健脾、養(yǎng)血調(diào)經(jīng)之功效，用于肝氣不舒所致月經(jīng)不調(diào)，胸脅脹痛，頭暈?zāi)垦?，食欲減退。原標(biāo)準(zhǔn)中收載了茯苓、白芍、炒白術(shù)、炙甘草及柴胡顯微鑒別，當(dāng)歸、炙甘草及白芍的薄層色譜鑒別和芍藥中芍藥苷的高效液相色譜含量測(cè)定等項(xiàng)目［1］，而處方中薄荷作為主要藥材，沒有任何檢測(cè)方法對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行有效控制。在對(duì)逍遙丸處方中藥材進(jìn)行市場(chǎng)調(diào)研中發(fā)現(xiàn)不僅薄荷質(zhì)量有優(yōu)劣之分，而且還與同為唇形科植物的留蘭香性狀相近，極易混淆，但二者主要成分、功能主治等方面均存在較大差異，故有必要建立逍遙丸中薄荷的檢查方法。

通過(guò)查閱文獻(xiàn)可知，薄荷中含有薄荷腦，不含香芹酮，留蘭香中主要含有香芹酮，同時(shí)含有少量薄荷腦［2］，故基于二者含有成分的區(qū)別建立了本方法，不僅對(duì)逍遙丸中的薄荷質(zhì)量?jī)?yōu)劣有所評(píng)價(jià)，同時(shí)還能快捷得知是否用最易混品留蘭香代替薄荷在處方中使用。本次國(guó)家評(píng)價(jià)性抽驗(yàn)中共抽取282批次逍遙丸樣品，涉及49個(gè)生產(chǎn)企業(yè)、49個(gè)批準(zhǔn)文號(hào)、4個(gè)劑型，試驗(yàn)中增加了其氣相色譜定性方法［3］，對(duì)逍遙丸處方中的薄荷進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)及控制。

1 儀器與試藥

Agilent7890A氣相色譜儀，F(xiàn)ID檢測(cè)器，DM-5（5%二苯基95%-二甲基聚硅氧烷固定液）毛細(xì)管色譜柱（30 mm×0.32mm，0.53μm），薄荷腦對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院購(gòu)置，批號(hào)0728-200005），香芹酮對(duì)照品（德國(guó)Dr.Ehrenstorfer GmbH購(gòu)置，批號(hào)00610），薄荷對(duì)照藥材（中國(guó)食品藥品檢定研究院購(gòu)置，批號(hào)120916-200508），留蘭香對(duì)照藥材（采自山西藥科職業(yè)學(xué)院及山東商河縣殷巷鎮(zhèn)留蘭香種植基地），逍遙丸（某制藥公司提供，批號(hào)20111204），水為去離子試驗(yàn)用水，乙酸乙酯等試劑均為分析純（北京化工廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：DM-5（5%二苯基95%-二甲基聚硅氧烷固定液）毛細(xì)管色譜柱（30 mm×0.32mm，0.53μm），進(jìn)樣口溫度：200℃，檢測(cè)器：FID檢測(cè)器，檢測(cè)器溫度：300 ℃，柱流量：3 mL/min，進(jìn)樣量：1 μL，不分流；柱溫箱升溫程序見表1。

表1 柱溫箱升溫程序

2.2 溶液的制備

2.2.1 對(duì)照品溶液的制備 取薄荷腦、香芹酮對(duì)照品適量，精密稱定，加乙酸乙酯制成每1 mL含15 μg的對(duì)照品溶液。

2.2.2 供試品溶液的制備 稱取本品適量，研細(xì)，取約9 g，精密稱定，加水250 mL，按揮發(fā)油測(cè)定法提取揮發(fā)油（3 h），加接收液乙酸乙酯2 mL，分取乙酸乙酯部分定容至2 mL刻度試管中，即得。

2.3 專屬性考察

取處方中除薄荷腦外的全部藥味，按本品工藝及供試品溶液的制備方法制備去薄荷腦陰性供試品溶液，注入氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果：在薄荷腦對(duì)照品保留時(shí)間處無(wú)干擾。同時(shí)對(duì)留蘭香中主要揮發(fā)油成分香芹酮進(jìn)樣，在香芹酮對(duì)照品保留時(shí)間處無(wú)干擾。并通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)行了峰確認(rèn)。由此表明陰性無(wú)干擾，專屬性良好，見圖1～圖8。

圖1 供試品溶液色譜圖

圖2 薄荷對(duì)照藥材色譜圖

2.4 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一份對(duì)照品溶液1 μL，按“2.1”色譜條件分析，連續(xù)進(jìn)樣6次，對(duì)照品峰面積值的RSD為1.1%，結(jié)果表明進(jìn)樣精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

圖3 薄荷腦對(duì)照品色譜圖

圖4 留蘭香對(duì)照藥材色譜圖

圖5 香芹酮對(duì)照品色譜圖

圖6 留蘭香為主的摻偽供試品溶液色譜圖

圖7 薄荷為主的摻偽供試品溶液色譜圖

圖8 兩種成分相當(dāng)?shù)膿絺喂┰嚻啡芤荷V圖

取同一批樣品（批號(hào)20111204）6份，按照“2.2.2”供試品溶液制備操作，按“2.1”色譜條件分析，測(cè)定峰面積，RSD為0.9%，結(jié)果表明，該方法的重復(fù)性良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取樣品（批號(hào) 20111204），按照“2.2.2”供試品溶液制備操作，按“2.1”色譜條件分析，分別于制備后 0 h、2 h、4 h、8 h、16 h、24 h 進(jìn)樣，測(cè)定峰面積，RSD為1.2%，結(jié)果表明，供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 檢出濃度的確定

分別用15 μg/mL的薄荷腦及香芹酮對(duì)照品溶液適當(dāng)稀釋進(jìn)樣，根據(jù)3倍基線噪音相當(dāng)?shù)牧坑?jì)算得薄荷腦檢出限為3.3 μg/mL；香芹酮檢出限為 1.5 μg/mL。

2.8 樣品的測(cè)定

對(duì)全國(guó)不同地域、不同生產(chǎn)企業(yè)的282批逍遙丸樣品按照“2.2.2”供試品溶液制備操作，按“2.1”色譜條件分析，進(jìn)行了薄荷質(zhì)量考察，有43批次樣品中不含有薄荷藥材，占比15.2%；有70批次為含有香芹酮的陽(yáng)性樣品，占比24.8%。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)建立之初首先考慮采用薄層色譜法進(jìn)行鑒別檢查，由于樣品成分復(fù)雜，干擾因素多，所以放棄。

本實(shí)驗(yàn)為減少干擾以及濃縮聚集作用，且所測(cè)目標(biāo)成分為揮發(fā)性成分，故供試品溶液的制備采取揮發(fā)油提取［3］。

本實(shí)驗(yàn)可以對(duì)逍遙丸中薄荷的質(zhì)量以及留蘭香摻偽情況進(jìn)行有效評(píng)價(jià)，同時(shí)還可以在此基礎(chǔ)上對(duì)逍遙丸中薄荷的主要活性成分薄荷腦進(jìn)行含量的測(cè)定。

對(duì)282批次逍遙丸樣品考察后可看出，由于原標(biāo)準(zhǔn)不完善，樣品中薄荷的質(zhì)量存在一些問(wèn)題，對(duì)療效肯定會(huì)有一定的影響，更加體現(xiàn)出增加此鑒別檢查方法對(duì)用藥有效性和安全性的重要意義。