鹽酸西那卡塞片的體內(nèi)外相關(guān)性研究

吳曉雯 龐婕 孫增先

中圖分類號(hào) R944 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2018）12-1673-05

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2018.12.20

摘 要 目的：考察鹽酸西那卡塞片的體外溶出行為和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程，并進(jìn)行體內(nèi)外相關(guān)性（IVIVC）評價(jià)。方法：采用高效液相色譜法（HPLC），測定鹽酸西那卡塞片在8種溶出介質(zhì)[pH 1.2鹽酸溶液、pH 2.0鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水、人工胃液（SGF）、飽腹人工腸液（FeSSIF）、空腹人工腸液（FaSSIF）]中的累積溶出度（Q），并繪制溶出曲線。采用HPLC-質(zhì)譜聯(lián)用法測定鹽酸西那卡塞片的血藥濃度；選擇12名健康男性受試者，在空腹或飽腹（高脂食物）狀態(tài)下單劑量口服鹽酸西那卡塞片75 mg，測定給藥前（0 h）與給藥后0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h時(shí)的血藥濃度，并繪制平均血藥濃度-時(shí)間曲線。采用DAS 3.0軟件計(jì)算飽腹組受試者體內(nèi)累積吸收百分?jǐn)?shù)（F），并與該制劑相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體外Q值作線性回歸，進(jìn)行IVIVC評價(jià)。結(jié)果：鹽酸西那卡塞片在8種溶出介質(zhì)中的溶出曲線存在較大差異；空腹組和飽腹組受試者的AUC0→t、AUC0→∞和cmax組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明高脂食物對該制劑的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程有明顯影響；該制劑在飽腹組受試者體內(nèi)的F值與其體外在FeSSIF中的Q值的相關(guān)系數(shù)最高（0.977 9），表明存在良好的IVIVC（A級(jí)）。結(jié)論：鹽酸西那卡塞片在FeSSIF中（槳法，50 r/min）的體外溶出行為與其體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程存在良好的相關(guān)性，可用于預(yù)測該制劑在體內(nèi)的釋放和吸收情況。

關(guān)鍵詞 鹽酸西那卡塞片；溶出度；藥動(dòng)學(xué)；體內(nèi)外相關(guān)性

ABSTRACT OBJECTIVE： To investigate the in vitro dissolution behavior and in vivo pharmacokinetics of Cinacalcet hydrochloride tablets， and to evaluate its in vivo-in vitro correlation （IVIVC）. METHODS： HPLC method was adopted to determine the accumulative dissolution（Q） of Cinacalcet hydrochloride tablets in 8 kinds of medium [pH 1.2 hydrochloric acid solution， pH 2.0 hydrochloric acid solution， pH 4.5 acetate buffer solution， pH 6.8 phosphate buffer solution， water， artificial gastric fluid （SGF）， full belly artificial intestinal fluid （FeSSIF）， fasting artificial intestinal fluid （FaSSIF）]， and the dissolution curves were drawn. HPLC-MS method was used to determine the blood concentrations of Cinacalcet hydrochloride tablets. A total of 12 healthy male volunteers were selected and given single oral dose of Cinacalcet hydrochloride tablets 75 mg under the state of fasting or satiety （high-fat food）. The blood concentration of cinacalcet hydrochlorid was determined before medication （0 h） and 0.5， 1， 2， 3， 4， 6， 8， 12， 24 h after medication. Average blood concentration-time curves were drawn. The in vivo accumulative absorption percentage （F） of satiety group was calculated by using DAS 3.0 software. Linear regression of F with in vitro Q was carried out to analyze its IVIVC. RESULTS： There was great difference among dissolution curves of Cinacalcet hydrochloride tablets in 8 kinds of dissolution mediums. There were differences of AUC0→t， AUC0→∞ and cmax between fasting group and satiety group， with statistical significance （P<0.05）， showing high-fat food had significant effect on in vivo pharmacokinetics. Correlation coefficient of in vivo F in satiety group with in vitro Q of the tablets in FeSSIF was highest （0.977 9）， manifesting good IVIVC （class A）. CONCLUSIONS： The in vitro dissolution behavior of Cinacalcet hydrochloride tablets in FeSSIF （paddle method，50 r/min） is well associated with its in vivo pharmacokinetics， which can be used for predicting in vivo dissolution and absorption of the tablets.

KEYWORDS Cinacalcet hydrochloride tablets； Dissolution； Pharmacokinetics； in vivo-in vitro correlation

鹽酸西那卡塞（Cinacalcet hydrochloride）為第二代擬鈣劑，主要用于治療慢性腎病透析患者的繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)[1]。該藥于2004年首次由美國FDA批準(zhǔn)上市，現(xiàn)已在日本、歐盟、加拿大、中國等30多個(gè)國家/組織批準(zhǔn)上市，2016年其全球銷售額超過10億美元，市場空間巨大[2]。鹽酸西那卡塞的化合物專利已于2013年到期，現(xiàn)國內(nèi)多家企業(yè)的仿制藥正處于臨床研究和申報(bào)臨床研究的階段[3]。目前有關(guān)該藥的文獻(xiàn)主要集中在合成工藝、含量及有關(guān)物質(zhì)測定和制劑研究方面[4-6]，未見其體內(nèi)外相關(guān)性（in vivo-in vitro correlation，IVIVC）報(bào)道。鹽酸西那卡塞屬于生物藥劑學(xué)分類系統(tǒng)（BCS）2類藥物，具有良好的膜通透性，可能存在良好的IVIVC[7]。為降低鹽酸西那卡塞片的仿制藥開發(fā)風(fēng)險(xiǎn)、進(jìn)一步提高其人體生物等效性，本研究以進(jìn)口的鹽酸西那卡塞片為研究對象，進(jìn)行體外溶出行為和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究，并開展該藥的IVIVC評價(jià)，為其仿制制劑的研發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器

1260型高效液相色譜（HPLC）儀（美國Agilent公司，包括二元泵、自動(dòng)進(jìn)樣器、二級(jí)管陣列檢測器、液相色譜工作站，用于體外溶出行為研究）；1200/6100型HPLC串聯(lián)質(zhì)譜（MS）儀（美國Agilent公司，包括1200型HPLC系統(tǒng)、6100型MS檢測器，用于體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究）；VK7000型溶出度測試儀（美國瓦里安公司）；SevenMulti型pH計(jì)、XS105DU型十萬分之一電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；TG16-WS型臺(tái)式高速離心機(jī)（湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器開發(fā)有限公司）；SK3310HP型超聲波清洗器（上?？茖?dǎo)超聲儀器有限公司）；SI-0266型渦旋混合儀（美國Scientific Industries公司）。

1.2 藥品、試劑及血漿

鹽酸西那卡塞片（日本協(xié)和發(fā)酵麒麟株式會(huì)社，批號(hào)：EK13，規(guī)格：75 mg）；鹽酸西那卡塞對照品[我院藥學(xué)部自制，純度（化學(xué)滴定法）：99.6%]；芬地林對照品（內(nèi)標(biāo)，上海陶術(shù)生物科技有限公司，批號(hào)：T0327-1，純度：99.5%）；人工胃液（SGF）、飽腹人工腸液（FeSSIF）、空腹人工腸液（FaSSIF）粉末（英國Biorelevant公司，批號(hào)分別為：01-1608-02、03-1606-06、02-1408-19，市售生化級(jí)）；乙腈、三氟乙酸均為色譜純（美國Tedia公司）；其余試劑均為分析純，水為自制超純水。

血漿采集于參與本研究的健康受試者。

2 方法與結(jié)果

2.1 鹽酸西那卡塞片的體外溶出行為研究

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動(dòng)相：36 mmol/L磷酸二氫鈉溶液（用三乙胺調(diào)節(jié)pH至6.5）-乙腈（30 ∶ 70，V/V）；流速：1.0 mL/min；柱溫：40 ℃；檢測波長：283 nm；進(jìn)樣量：10 μL。

2.1.2 專屬性試驗(yàn) 取空白輔料溶液[按處方比例取空白輔料（由微晶纖維素、預(yù)膠化淀粉、交聯(lián)聚維酮、聚維酮K30等組成）14 mg，以水制成100 mL溶液，濾過，即得]、對照品溶液（精密稱取鹽酸西那卡塞對照品適量，以流動(dòng)相制成80 μg/mL的溶液，即得）和供試品溶液（精密稱取鹽酸西那卡塞對照品適量，以空白輔料溶液制成80 μg/mL的溶液，即得）各適量，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜，詳見圖1。結(jié)果表明，空白輔料對鹽酸西那卡塞的測定無干擾，本方法專屬性良好。

2.1.3 線性關(guān)系考察 精密稱取鹽酸西那卡塞對照品適量，用流動(dòng)相制成900 μg/mL的對照品貯備液，再以流動(dòng)相分別稀釋制成90、45、12.5、6.25、3.13、2.25 μg/mL的系列對照品溶液，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定。以鹽酸西那卡塞質(zhì)量濃度（x，μg/mL）為橫坐標(biāo)、峰面積（y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，得回歸方程y=11 441x-129（r=0.999 6）。結(jié)果表明，鹽酸西那卡塞質(zhì)量濃度在2.25～90 μg/mL范圍內(nèi)與其峰面積線性關(guān)系良好，可滿足體外溶出度測定的要求。

2.1.4 準(zhǔn)確度試驗(yàn) 取“2.1.3”項(xiàng)下鹽酸西那卡塞對照品貯備液適量，以“2.1.2”項(xiàng)下空白輔料溶液為溶劑稀釋成低、中、高質(zhì)量濃度（8、40、80 μg/mL，相當(dāng)于溶出量的10%、50%、100%）的溶液，每個(gè)質(zhì)量濃度平行制備3份，共9份，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定并計(jì)算空白加樣回收率。結(jié)果，空白加樣回收率平均值為99.16%（RSD=1.21%，n=9），表明本方法準(zhǔn)確度較好。

2.1.5 精密度試驗(yàn) 取“2.1.4”項(xiàng)下的高質(zhì)量濃度（80 μg/mL）溶液適量，按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測定6次，并在同日內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)和3 d內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)分別進(jìn)樣測定6次，記錄峰面積。結(jié)果，鹽酸西那卡塞峰面積的進(jìn)樣精密度和日內(nèi)、日間精密度RSD均小于2.0%（n=6），表明本方法精密度良好。

2.1.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取“2.1.7”項(xiàng)下溶出試驗(yàn)1 h時(shí)的8種溶出介質(zhì)中的溶出液各適量，濾過，于室溫下放置0、1、2、4、8、12、16、24 h時(shí)分別按“2.1.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果，鹽酸西那卡塞峰面積的RSD均未超過2.0%（n=8），表明在室溫下各介質(zhì)溶出液放置24 h內(nèi)的穩(wěn)定性良好。

2.1.7 溶出曲線繪制 參照文獻(xiàn)[8]，以2015年版《中國藥典》（四部）通則0931“槳法”，取鹽酸西那卡塞片6片進(jìn)行溶出試驗(yàn)。設(shè)置轉(zhuǎn)速為50 r/min，溶出介質(zhì)溫度為（37.0±0.5）℃，分別采用pH 1.2鹽酸溶液、pH 2.0鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液、pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水、SGF、FeSSIF、FaSSIF等8種溶出介質(zhì)各900 mL進(jìn)行操作。分別于 5、10、15、30、45 min和1、1.5、2、3、4、5、6 h時(shí)取溶出液10 mL（同時(shí)立即補(bǔ)充等溫、等體積的溶出介質(zhì)），經(jīng)0.45 μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，按“2.1.1” 項(xiàng)下色譜條件測定鹽酸西那卡塞的含量并計(jì)算其累積溶出度（Q）的平均值（n=6），繪制溶出曲線，詳見圖2。

由圖2可見，在pH 2.0鹽酸溶液和pH 4.5醋酸鹽緩沖液中，鹽酸西那卡塞片在15 min內(nèi)溶出完全；在pH 1.2鹽酸溶液和SGF中，其能在60 min內(nèi)溶出完全；而在其他介質(zhì)中，其在6 h內(nèi)均未能溶出完全。結(jié)果表明，鹽酸西那卡塞片在不同溶出介質(zhì)中的溶出行為差異明顯。

2.2 鹽酸西那卡塞片的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究

2.2.1 色譜及質(zhì)譜條件 （1）色譜條件。色譜柱：Agilent ZORBAX SB-C18（150 mm×4.6 mm，5 ?m）；流動(dòng)相：0.05%三氟乙酸溶液-乙腈（20 ∶ 80，V/V）；流速：0.5 mL/min；柱溫：40 ℃；檢測波長：283 nm；進(jìn)樣量：20 μL。（2）質(zhì)譜條件。電噴霧離子源，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式；檢測質(zhì)荷比（m/z）：358.1→155.1（鹽酸西那卡塞），316.0→212.1（內(nèi)標(biāo)）；干燥氣體（氮?dú)猓┝魉伲?2.0 L/min，溫度：350 ℃；霧化器壓力：35 psi（1 psi=6.89 kPa）；毛細(xì)管電壓：3 000 V。

2.2.2 溶液制備 精密稱取鹽酸西那卡塞對照品20 mg置于20 mL量瓶中，加適量乙腈超聲（功率：180 W，頻率：59 kHz，下同）溶解后定容，搖勻；精密量取1 mL置于100 mL量瓶中，加乙腈定容后搖勻，即得10 μg/mL的對照品貯備液。精密稱取內(nèi)標(biāo)對照品20 mg置于200 mL量瓶中，加適量乙腈超聲溶解后定容，搖勻；精密量取1 mL置于1 000 mL量瓶中，加乙腈定容后搖勻，即得100 ng/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。

2.2.3 血漿樣品預(yù)處理 精密量取0.5 mL血漿至5 mL離心管中，加入“2.2.2”項(xiàng)下內(nèi)標(biāo)溶液50 μL、0.3 mol/L氨溶液100 μL，渦旋30 s；加入1.0 mL乙酸乙酯，渦旋1 min，12 000 r/min離心5 min（離心半徑：14 cm）；取上清液，于40 ℃下氮?dú)獯蹈?，加乙?0 μL溶解殘?jiān)∩锨逡?，待測。

2.2.4 專屬性試驗(yàn) 取受試者空白血漿和服藥4 h后的血漿各適量，按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理（空白血漿不加內(nèi)標(biāo)），并按“2.2.1”項(xiàng)下色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定。結(jié)果顯示，鹽酸西那卡塞和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間分別約為6.27、7.21 min，血漿中內(nèi)源性雜質(zhì)對兩者均無干擾，詳見圖3。

2.2.5 線性關(guān)系考察 取空白血漿適量，共6份，分別加入適量的“2.2.2”項(xiàng)下對照品貯備液，制成血藥濃度分別為0.1、0.5、2.0、5.0、10.0、25.0 ng/mL的系列血樣，渦旋混勻，按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理并按“2.2.1”項(xiàng)下色譜及質(zhì)譜條件進(jìn)樣測定。以鹽酸西那卡塞與內(nèi)標(biāo)峰面積之比（Y）對鹽酸西那卡塞質(zhì)量濃度（X，μg/mL）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程Y=1.274 6X+0.030 7（r=0.994 2）。結(jié)果表明，鹽酸西那卡塞血藥濃度在0.1～25 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2.6 提取回收率試驗(yàn) 按“2.2.5”項(xiàng)下方法配制低、中、高質(zhì)量濃度（0.1、2.0、25.0 ng/mL）的血漿樣品，平行5份操作，按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理后進(jìn)樣測定；取“2.2.2”項(xiàng)下對照品貯備液和內(nèi)標(biāo)溶液各適量，以乙腈稀釋制成相應(yīng)質(zhì)量濃度的溶液，直接進(jìn)樣測定。以經(jīng)血樣預(yù)處理后測得的鹽酸西那卡塞、內(nèi)標(biāo)的平均峰面積分別與其相應(yīng)乙腈溶液測得的兩者平均峰面積之比計(jì)算提取回收率。結(jié)果，鹽酸西那卡塞低、中、高質(zhì)量濃度血漿樣品的提取回收率分別為56.8%、65.9%、72.3%，RSD分別為9.71%、9.54%、9.13%（n=5）；內(nèi)標(biāo)的提取回收率為66.4%，RSD為6.43%（n=15）。

2.2.7 精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn) 按“2.2.5”項(xiàng)下方法配制低、中、高質(zhì)量濃度（0.1、2.0、25.0 ng/mL）的血漿樣品，平行5份操作，按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理后進(jìn)樣測定。各樣品在單日內(nèi)測定5次，并連續(xù)測定5 d，以考察日內(nèi)和日間精密度；以實(shí)測質(zhì)量濃度與理論質(zhì)量濃度計(jì)算空白加樣回收率。結(jié)果，鹽酸西那卡塞低、中、高質(zhì)量濃度血漿樣品的日內(nèi)RSD分別為8.21%、7.21%、4.18%（n=5），日間RSD分別為9.72%、8.43%、5.33%（n=5）；空白加樣回收率分別為92.4%、97.8%、104.8%，RSD分別為4.21%、3.48%、3.21%（n=5），表明本方法的精密度、準(zhǔn)確度均良好。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 按“2.2.5”項(xiàng)下方法配制血漿樣品（2.0 ng/mL），分別在-40 ℃冷凍7 d、反復(fù)凍融3次后按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理，室溫放置12 h后進(jìn)樣測定，考察其穩(wěn)定性。結(jié)果，上述條件下鹽酸西那卡塞血藥濃度的RSD分別為2.41%、3.19%、3.72%（n=6），表明血漿樣品在上述條件下均較穩(wěn)定。

2.2.9 人體藥動(dòng)學(xué)試驗(yàn) 將12名健康成年男性受試者以抽簽方式隨機(jī)分為飽腹組和空腹組，每組6人，兩組受試者年齡、體質(zhì)量等一般資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本試驗(yàn)方案經(jīng)連云港市第一人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過，受試者均知情同意并簽署知情同意書。

受試者在試驗(yàn)前均禁食過夜?？崭菇M受試者單劑量口服鹽酸西那卡塞片75 mg，4 h后進(jìn)食；飽腹組受試者食用高脂食物200 g后，立即單劑量口服鹽酸西那卡塞片75 mg。分別于給藥前（0 h）與給藥后0.5、1、2、3、4、6、8、12、24 h時(shí)抽取靜脈血5 mL，置于肝素鈉抗凝的離心管中，4 000 r/min離心5 min（離心半徑：14 cm），取上層血漿，于-40 ℃保存待用。檢測前，先將血漿樣品在室溫下解凍，再按“2.2.3”項(xiàng)下方法預(yù)處理后進(jìn)樣測定。根據(jù)隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算血藥濃度平均值（n=6），并繪制平均血藥濃度-時(shí)間曲線，詳見圖4。采用DAS 3.0軟件對血藥濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行參數(shù)計(jì)算和模型擬合。結(jié)果，鹽酸西塞卡那片在人體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征符合二室模型，主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)見表1。

由圖4和表1可知，飽腹組受試者的AUC0→t、AUC0→∞和cmax顯著高于空腹組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），表明高脂食物對鹽酸西那卡塞片在人體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)過程有明顯影響。

2.3 鹽酸西那卡塞片的IVIVC評價(jià)

由于空腹組受試者口服鹽酸西那卡塞片后的AUC0→t、AUC0→∞遠(yuǎn)低于飽腹組，且考慮到該制劑說明書建議的用法為與食物同服或餐后短時(shí)間內(nèi)服用，故本研究僅對飽腹組受試者的藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行IVIVC研究。采用DAS 3.0軟件，以Wagner-Nelson法計(jì)算飽腹組受試者口服鹽酸西那卡塞片后不同時(shí)間點(diǎn)的體內(nèi)累積吸收百分?jǐn)?shù)（F），并與相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的體外Q值作線性回歸，結(jié)果見表2（注：由于該制劑在pH 1.2鹽酸溶液、pH 2.0鹽酸溶液、pH 4.5醋酸鹽緩沖液和SGF中60 min內(nèi)即已溶出完全，無法與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)作相關(guān)性分析，因此僅采用其在pH 6.8磷酸鹽緩沖液、水、FeSSIF和FaSSIF中的體外溶出數(shù)據(jù)作IVIVC評價(jià)）。

由表2可見，該制劑在飽腹組受試者體內(nèi)的F值與其在FeSSIF介質(zhì)中（槳法，50 r/min）的Q值經(jīng)回歸分析后所得r值最高（0.977 9）。經(jīng)查詢相關(guān)系數(shù)臨界值表可知，r值超過臨界值0.974 1（n=6，P<0.001），則說明存在良好的A級(jí)IVIVC（即體外釋藥的程度及速率與體內(nèi)血藥濃度變化呈點(diǎn)對點(diǎn)對應(yīng)關(guān)系）[8-9]。因此，可采用鹽酸西那卡塞片在FeSSIF介質(zhì)中（槳法，50 r/min）的體外溶出曲線反映其在體內(nèi)的釋放和吸收情況。

3 討論

在鹽酸西那卡塞片體外溶出行為研究中，溶出介質(zhì)一般采用0.01 mol/L鹽酸（即pH 2.0鹽酸溶液）[10]。筆者采用2015年版《中國藥典》（四部）通則0931“槳法”（轉(zhuǎn)速50 r/min）測定該制劑在pH 2.0鹽酸溶液中的溶出度，發(fā)現(xiàn)在10 min時(shí)藥物溶出量已超過90%，與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)數(shù)據(jù)時(shí)間點(diǎn)無法對應(yīng)。因此筆者認(rèn)為，文獻(xiàn)[10]的溶出條件僅能用于該制劑的批間均一性評價(jià)，而不適宜用于考察和預(yù)測其體內(nèi)釋放和吸收情況。筆者參考文獻(xiàn)[8-9]考察了鹽酸西那卡塞片在不同介質(zhì)（pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水）中的體外溶出行為，發(fā)現(xiàn)IVIVC均較差。為更真實(shí)地反映藥物在胃腸液中的釋放情況，筆者選擇人工胃腸液（SGF、FeSSIF、FaSSIF）進(jìn)行該制劑的體外溶出行為研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在FeSSIF中，該制劑體外溶出行為與其體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程存在良好的相關(guān)性。由于FeSSIF為模擬飽腹情況下的腸液，因此筆者判斷該制劑的主要吸收部位在腸道。

在體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究中，血漿樣品中鹽酸西那卡塞提取回收率在70%左右，經(jīng)多次試驗(yàn)嘗試均未能明顯提高。為解決此問題，筆者選擇芬地林作為內(nèi)標(biāo)，其理化性質(zhì)與鹽酸西那卡塞相近[11]，且提取回收率也相當(dāng)。經(jīng)考察，體內(nèi)血藥濃度測定方法的空白加樣回收率為92.4%～104.8%，符合體內(nèi)試驗(yàn)的要求，故此提取方法雖然提取回收率偏低，但采用內(nèi)標(biāo)法仍可獲得較好的準(zhǔn)確度，能夠用于該制劑的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)研究。

為考察食物對該制劑生物利用度的影響，為后續(xù)人體生物等效性研究提供依據(jù)，筆者對不同進(jìn)食情況的受試者進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，空腹組受試者的AUC0→t、AUC0→∞和cmax均顯著低于飽腹組，說明該制劑與食物同時(shí)服用能增加藥物吸收。IVIVC評價(jià)結(jié)果表明，采用FeSSIF作為溶出介質(zhì)（槳法，50 r/min）得到的體外溶出曲線可用于反映鹽酸西那卡塞片的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程。

綜上所述，鹽酸西那卡塞片的體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)過程與其體外溶出行為（以FeSSIF為介質(zhì)，漿法，50 r/min）存在良好的IVIVC，故可采用體外溶出試驗(yàn)預(yù)測該制劑的體內(nèi)藥物釋放和吸收情況。本研究為鹽酸西那卡塞相關(guān)制劑的進(jìn)一步研發(fā)提供了方法基礎(chǔ)，有利于大幅提高其臨床生物等效性試驗(yàn)的成功率。

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（收稿日期：2017-10-17 修回日期：2018-05-07）

（編輯：段思怡）