血液標本放置時間和溫度對全血細胞分析的影響

周后蓉，田大斌，張金花

(1.中國人民解放軍成都軍區(qū)總醫(yī)院核醫(yī)學科，四川 成都 610083；2.西南石油大學校醫(yī)院；3.川北醫(yī)學院附屬醫(yī)院檢驗科，四川 南充 637000)

為保證檢驗結果能更好的滿足臨床工作需要，檢驗科在接到全血細胞分析標本后應及時進行檢測，但因為某些特殊情況，如三方檢驗、區(qū)域檢驗等，不能及時檢測，導致標本周轉(zhuǎn)時間延長[1]，需將標本存放于合適的條件下數(shù)天，以便于復核。目前，血細胞分析儀由于計數(shù)結果的準確性及重復性高，精密度好，操作簡便易行已取代傳統(tǒng)手工法，成為實驗室的主要檢測手段[2]。然而，血液標本隨著保存時間和溫度的變化，一些參數(shù)可能會發(fā)生變化，為全面了解標本放置時間和溫度對結果的影響，實驗將40例臨床血液標本分別存放于室溫和4 ℃，進行0 h 、2 h、4 h、 8 h 、12 h 、24 h時間段的研究，現(xiàn)將結果分析報告如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源

標本均來源于成都軍區(qū)總醫(yī)院門診患者共40例，其中男性13例，女性27例。年齡20～65歲，平均(48±10.8)歲。

1.2 儀器與試劑

邁瑞5180全自動血細胞分析儀及配套原裝試劑由深圳邁瑞生物電子醫(yī)療有限公司提供，EDTA-K2真空采血管由BD公司提供。

1.3 研究方法與檢測指標

按照操作規(guī)程[3]抽取患者靜脈血4 mL/人，分兩組注入EDTA-K2真空采血管，編號記錄，即刻檢測結果作為初始值(0 h)，一組室溫放置，另一組存放于4 ℃冰箱，然后每份標本在2 h、4 h、8 h、12 h、24 h分別進行測定。存放在4 ℃冰箱中的標本檢測前在室溫中平衡10 min，各組檢測前均進行實驗前空白、室內(nèi)質(zhì)量控制等質(zhì)控監(jiān)測，質(zhì)控均符合要求。

檢測指標：白細胞數(shù)量(WBC)、血紅蛋白濃度(Hb)、紅細胞數(shù)量(RBC)、紅細胞平均體積(MCV)、紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH)、紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞分布寬度(RDW)、血小板平均體積(MPV)、紅細胞壓積(HCT)、血小板數(shù)量(PLT )。

1.4 統(tǒng)計學分析

2 結果

2.1 室溫條件下放置標本不同時間段檢測結果

在室溫條件下放置標本檢測結果與即時檢測結果相比，MPV在4 h后、MCV在12 h后增加，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其余檢測項目在各時間段與即時檢測結果相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 4 ℃儲存條件下血液標本不同時間段檢測結果

在4 ℃儲存條件下放置標本檢測結果與即時檢測結果相比，MPV在24 h后增加，差異有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)，其余檢測項目在各時間段與即時檢測結果相比，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 不同儲存條件下相同時間段檢測結果比較

相同時間室溫放置于4 ℃冰箱存放標本檢測結果相比，MCHC在8 h后出現(xiàn)顯著差異(P﹤0.05)，MCV在12 h后有統(tǒng)計學意義(P﹤0.05)，其他檢測各時間段兩種儲存條件檢測結果相比無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)。見表3。

表1 室溫條件下放置標本不同時間段檢測結果

*P<0.05，與即時檢測結果相比。

表2 4 ℃儲存條件下血液標本不同時間段檢測結果

*P<0.05，與即時檢測結果相比。

表3 不同儲存條件下相同時間段檢測結果比較

*P<0.05，與相同時間段4 ℃儲存條件下檢測結果相比。

3 討論

人體血液離開人體后即使采用了相應的抗凝劑抗凝也很難保證血液化驗結果不會發(fā)生大的波動，而血細胞分析結果對于臨床疾病的診斷和鑒別診斷、治療都有著重要意義[4]。邁瑞5180采用庫爾特原理測定紅細胞、血小板的數(shù)目和體積，采用半導體激光流式技術對白細胞進行計數(shù)和分類計數(shù)，具有良好的精密度和準確度。但現(xiàn)在患者的急速增加，無論是住院部還是門診都無法保證每個標本的及時檢驗，血標本采集后的不及時將導致細胞分層，產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物導致層微環(huán)境，形成各自的滲透壓和酸堿度[5]，細胞檢測參數(shù)將發(fā)生變化。所以標本儲存的時間和條件對血細胞分析的影響程度必須做相應分析，以保證檢驗結果的準確性。

本研究發(fā)現(xiàn)，室溫和4 ℃冰箱存放標本一定時間后，4 ℃冰箱條件下存放的標本MPV在24 h后檢測結果增加,在室溫條件下放置標本檢測結果與即時檢測結果相比，MPV在4 h后、MCV在12 h后結果增加，這與路則寶等[6-8]人的研究相一致。張慶玲[9]，楊玉芳[10]在研究中發(fā)現(xiàn)血液標本稀釋后在3 h 時PLT、MPV變化明顯。這與血小板自身的結構及生理機能有關，血液離體后滲透壓變化及塑料抗凝劑管壁會誘使血小板結構發(fā)生改變，隨存放時間的延長，血小板膨脹或構型發(fā)生改變，使MPV增大。本研究還發(fā)現(xiàn)相同時間室溫放置與4 ℃冰箱存放標本檢測結果相比，室溫放置標本的MCHC在8 h后結果降低，MCV在12 h后結果增加。原因可能在于低溫環(huán)境時，冷凝現(xiàn)象對RBC、MCV的影響， RBC自凝，將其誤認為是大的RBC引起RBC計數(shù)偏低。血小板等檢測項目在低溫保存下變化不大是因為低溫條件下細胞受滲透壓的影響沒有室溫明顯，低溫使細胞的各項生理功能受到抑制[11-12]。此外,全血標本不論是存放于室溫環(huán)境,還是4 ℃條件下,MPV與即刻檢測的結果均出現(xiàn)顯著性差異，由此可見MPV的穩(wěn)定性較低，這是由于PLT形態(tài)結構發(fā)生變化，反應其體積變化參數(shù)MPV變化最快，血小板系統(tǒng)的穩(wěn)定性最容易受到環(huán)境因素的影響，所以MPV的檢測要在4 h內(nèi)完成，才能保證準確性[13]。

綜上所述，血細胞分析應在短時間內(nèi)盡快完成,如不能及時送檢,應保存在4 ℃條件下，延遲檢測的標本，應該結合臨床資料，綜合考慮存放時間和溫度對結果的影響，以保證臨床檢驗結果的準確性。