鹽酸克林霉素棕櫚酸酯制劑的一致性評(píng)價(jià)研究

陳洪波

摘 要：建立反相高效液相色譜法測(cè)定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。方法：采用奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm），0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調(diào)pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯平均回收率分別為99.2%。結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可用于鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度測(cè)定。

關(guān)鍵詞：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片；含量；測(cè)定

鹽酸克林霉素棕櫚酸酯為克林霉素的衍生物，體外無(wú)抗菌活性，在體內(nèi)經(jīng)酯酶水解形成克林霉素而發(fā)揮抗菌活性。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯用于革蘭陽(yáng)性菌引起的下列各種感染性疾病，如扁桃體炎、慢性支氣管炎急性發(fā)作、前列腺炎、敗血癥、腹膜炎、肺炎、蜂窩組織炎、創(chuàng)傷、急性腎盂腎炎、化膿性中耳炎、口腔感染等。本實(shí)驗(yàn)采用反相高效液相色譜法測(cè)定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。

1儀器與試藥

1.1儀器：C806溶出試驗(yàn)儀（北京中西遠(yuǎn)大科技有限公司）；恒信C-1000柱溫箱（武漢恒信世紀(jì)科技有限公司）；IKA RV10數(shù)顯型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海泰坦科技股份有限公司）； 721數(shù)顯分光光度計(jì)（上海壘固儀器有限公司）；600220液相保護(hù)柱（天津琛航科苑科技發(fā)展有限公司）；BT-V20A/B高精度恒溫水槽（上海百典儀器設(shè)備有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統(tǒng)（大連依利特分析儀器有限公司）；電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；優(yōu)普ULUP-I微量分析型超純水器（四川優(yōu)普超純科技有限公司）；Edwards nXDS10i渦旋式干泵（北京帥恩科技有限責(zé)任公司）。

1.2色譜柱：奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm）。

1.3對(duì)照品：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯 購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：三乙胺（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）、乙腈（杭州蕭山創(chuàng)益化工儀器有限公司）、甲醇（昆山諾普森實(shí)驗(yàn)室用品科技有限公司）。

1.5試藥：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片

2測(cè)定方法確定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[1-6]。流動(dòng)相：0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調(diào)pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。

2.2對(duì)照品溶液的制備

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對(duì)照品適量，置容量瓶中，加流動(dòng)相制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3鹽酸克林霉素棕櫚酸酯溶出度測(cè)定方法

取本品，照溶出度測(cè)定法（中國(guó)藥典2015版附錄），分別以四種溶劑900毫升為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為55r/min，依法操作，經(jīng)5分鐘時(shí)，取溶液2mL，置10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，按2.1項(xiàng)下的色譜條件，取續(xù)濾液10μl，注入液相色譜儀。

2.4精密度試驗(yàn)

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對(duì)照品適量，加流動(dòng)相使溶解，制成濃度為0.5mg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積。結(jié)果，RSD=0.82%，表明本方法精密度良好。

2.5對(duì)照品的線性考察

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對(duì)照品85mg，置5ml容量瓶中，加入流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL，置于5mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量（X）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。結(jié)果表明，鹽酸克林霉素棕櫚酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.6重現(xiàn)性試驗(yàn)

稱取同一批的鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片樣品6份，按測(cè)定方法項(xiàng)下的方法溶出度測(cè)定方法并計(jì)算樣品的RSD值，結(jié)果RSD為0.81%，結(jié)果表明此方法的重現(xiàn)性良好。

2.7準(zhǔn)確度試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對(duì)照品，測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為99.2%，RSD為0.91%。

3討論

分別考察

0.01 mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20）；乙腈-水（體積比為65∶35）；甲醇-0.4%磷酸（47：53）；甲醇∶水∶冰乙酸（172∶27∶1）；0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調(diào)pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動(dòng)相，0.05mol/L磷酸二氫鉀—乙腈—三乙胺（60∶40：0.01）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調(diào)pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動(dòng)相為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調(diào)pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動(dòng)相為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)表明此方法可用于鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度測(cè)定。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度與參比制劑相當(dāng)，溶出曲線相似。本法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于本品中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯一致性評(píng)價(jià)。

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