RSV毛細(xì)支氣管炎患兒血ECP和尿LTE4水平及價值

黨媛媛，嚴(yán) 華，馮 雪，田慶玲，洪 源，楊 碩

(唐山市婦幼保健院感染性疾病科，河北 唐山 063000)

毛細(xì)支氣管炎為1歲以下，特別是2～6月齡的嬰幼兒中最常見的呼吸道疾患，具有較高的發(fā)病率。呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)為一種副黏病毒科肺炎屬RNA病毒，約占毛細(xì)支氣管炎病原體的52%以上，是毛細(xì)支氣管炎最常見的感染病原體[1]。目前對RSV感染性毛細(xì)支氣管炎病情嚴(yán)重程度主要依靠臨床癥狀診斷，具有較高的主觀性；此外，對于RSV毛細(xì)支氣管炎患兒繼發(fā)支氣管哮喘尚缺乏預(yù)判指標(biāo)[2]。血嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)、尿白三烯E4(LTE4)是反應(yīng)機(jī)體免疫反應(yīng)的指標(biāo)，為了探究毛細(xì)支氣管炎患兒血ECP、尿LTE4水平與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性和預(yù)測繼發(fā)哮喘的效能，本文對105例RSV毛細(xì)支氣管炎患兒進(jìn)行了一項前瞻性研究，現(xiàn)匯報如下。

1材料與方法

1.1一般資料

選擇2015年3月至2016年3月間于唐山市婦幼保健院住院治療并確診的毛細(xì)支氣管炎患兒，并進(jìn)行分析和隨訪。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡為1個月～2歲；②病史資料完整；③癥狀、體征和相關(guān)輔助檢查符合《毛細(xì)支氣管炎診療與預(yù)防專家共識(2014版)》[3](簡稱指南)的診斷要點；④經(jīng)咽拭子或鼻咽部抽吸等呼吸道分泌物病原學(xué)檢測明確為RSV感染。排除標(biāo)準(zhǔn)：①病史資料不足；②病原體檢測受到污染；③存在免疫缺陷或繼發(fā)肺結(jié)核等肺部感染。本次共納入RSV毛細(xì)支氣管炎患兒105例，男性56例，女性49例；平均年齡為(12.8±4.2)個月。癥狀評分根據(jù)指南[3]制定，評分≤7為輕度組(79例)，>7為中-重度組(26例)，見表1。另外，選擇同期同年齡段的26例健康體檢者作為對照組。

表1毛細(xì)支氣管炎癥狀評分

Table 1 Symptom score of bronchiolitis

項目1分2分3分喂養(yǎng)量正常下降<1/2下降>1/2或拒食呼吸頻率正常/稍快>60次/分鐘>70次/分鐘吸氣性三凹征無/輕度中度重度鼻翼煽動/呻吟無/輕度無有血氧飽和度>92%88%～92%<88%精神狀況正常輕微煩躁煩躁不安/嗜睡

1.2檢測方法

RSV病原學(xué)檢測：患兒入院后8小時內(nèi)采集咽拭子，使用七項呼吸道病毒檢測試劑盒(美國Merck Millipore)進(jìn)行直接免疫熒光檢測[4]。對確診為RSV感染毛細(xì)支氣管炎患兒進(jìn)一步做血ECP及尿LTE4水平測定。

于清晨采集納入研究兒童空腹靜脈血和清潔中段尿，離心后分別采用嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白ELISA試劑盒(采購自上海西唐生物)、人白三烯E4定量檢測試劑盒(采購自上海西唐生物)，使用HBS-1096A全自動酶標(biāo)儀定量檢測患兒血清ECP水平和尿LTE4水平。

1.3隨訪情況

每6個月對所有患兒通過電話、郵件和微信等進(jìn)行隨訪，主要終點事件為哮喘發(fā)作，次要事件為失訪。中位隨訪時間為(20.6±5.1)個月，共有18例患兒繼發(fā)支氣管哮喘。哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南(2016年版)》[5]，即存在支氣管哮喘典型的發(fā)作癥狀(如反復(fù)喘息、咳嗽、氣促和胸悶)和體征(發(fā)作時雙肺可聞及散在或彌漫性哮鳴音)，及支氣管舒張試驗陽性。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法

2結(jié)果

2.1各組患兒血ECP和尿LTE4水平的對比

中-重度組血ECP和尿LTE4水平均顯著高于對照組(t值分別為11.230和13.086，均P<0.05)和輕度組(t值分別為7.616和7.245，均P<0.05)，輕度組血ECP和尿LTE4水平均顯著高于對照組(t值分別為10.914和6.673，均P<0.05)；

繼發(fā)哮喘組血ECP和尿LTE4水平均顯著高于對照組(t值分別為10.868和11.934，均P<0.05)和非哮喘組(t值分別為4.538和7.150，均P<0.05)，非哮喘組血ECP和尿LTE4水平均顯著高于對照組(t值分別為8.460和7.668，均P<0.05)，見表2。

組別例數(shù)(n)血ECP(ng/mL)尿LTE4(pg/mL)對照組2636.31±10.57352.11±122.32病情 輕度組7964.76±11.82*561.53±143.66* 中-重度組2690.68±22.31*#973.46±208.91*#F(對照組與病情各組)94.233111.255P<0.001<0.001預(yù)后非哮喘組7566.55±17.22*606.82±153.11*哮喘組1887.89±20.68*△906.82±186.46*△F(對照組與預(yù)后各組)61.57683.749P<0.001<0.001

注：*與對照組比較P<0.05；#與輕度組比較P<0.05；△與非哮喘組比較P<0.05。

2.2患兒病情評分與血ECP和尿LTE4水平的相關(guān)性

經(jīng)線性相關(guān)分析顯示，毛細(xì)支氣管炎病情評分與血ECP(r=0.776，P<0.05)和尿LTE4(r=0.765，P<0.05)水平具有明顯的相關(guān)性，見圖1A、圖1B。

圖1患兒病情評分與血ECP和尿LTE4水平的相關(guān)性

Fig.1 Correlation of children's disease severity score with blood ECP and urinary LTE4 levels

2.3應(yīng)用血ECP和尿LTE4水平單獨或聯(lián)合預(yù)測繼發(fā)哮喘效能情況

ROC曲線顯示，血ECP和尿LTE4單獨預(yù)測繼發(fā)哮喘的曲線下面積均低于0.9(AUC值分別為0.806、0.855)；聯(lián)合預(yù)測毛細(xì)支氣管炎后繼發(fā)哮喘風(fēng)險的效能較高(AUC=0.908，P<0.05)，見圖2、表3。

圖2應(yīng)用血ECP和尿LTE4水平單獨或聯(lián)合預(yù)測繼發(fā)哮喘的ROC曲線

Fig.2 ROC curves for predicting secondary asthma by blood ECP or urinary LTE4 level alone or by combination of them

表3應(yīng)用血ECP和尿LTE4水平單獨或聯(lián)合預(yù)測繼發(fā)哮喘效能的比較結(jié)果

Table 3 Comparison of efficacy of ECP and LTE4 levels alone or in combination in prediction of secondary asthma

檢驗結(jié)果變量AUC標(biāo)準(zhǔn)誤差P95%CI尿LTE40.8550.044<0.050.789～0.922血ECP0.8060.056<0.050.697～0.916尿LTE4+血ECP0.9080.042<0.050.826～0.991

3討論

毛細(xì)支氣管炎常表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱、憋喘和呼吸困難，甚至出現(xiàn)紫紺，是1歲以下幼兒住院治療的最常見原因，在世界各地廣泛流行，冬春季節(jié)常出現(xiàn)暴發(fā)疫情[6]。盡管多數(shù)毛細(xì)支氣管炎患兒臨床表現(xiàn)較輕，且具有明顯的自限性，但對于<12周、低出生體重和先天性疾病的患兒，仍具有較高的死亡率[7]。此外，流行病學(xué)研究顯示，超過34%的毛細(xì)支氣管炎患兒可能繼發(fā)氣道高反應(yīng)性疾病，而哮喘是其中最常見的類型[8]。探討毛細(xì)支氣管炎患兒繼發(fā)哮喘的有效預(yù)測方法，能夠?qū)Ω呶；純翰扇♂槍π缘姆乐未胧?，有效地降低患兒哮喘的發(fā)生風(fēng)險或延緩哮喘的發(fā)生。

3.1不同病情和預(yù)后患兒血ECP和尿LTE4水平的分析

本研究通過對比不同病情程度患兒血ECP和尿LTE4的水平顯示，中-重度患兒血ECP和尿LTE4明顯高于對照組和輕度組，輕度組患兒顯著高于對照組(均P<0.05)。經(jīng)線性相關(guān)分析顯示，毛細(xì)支氣管炎病情評分與血ECP和尿LTE4水平呈明顯正相關(guān)。通過對所有患兒進(jìn)行中位隨訪時間為(20.6±5.1)個月的隨訪，共有18例患兒繼發(fā)支氣管哮喘，12例失訪，繼發(fā)支氣管哮喘的發(fā)生率為17.14%，這一發(fā)生率低于Balekian等[9]進(jìn)行的為期5年的研究結(jié)果(27.8%)，其原因可能與隨訪時間較短，樣本量較小，且存在12例失訪病例有關(guān)。盡管RSV感染性毛細(xì)支氣管炎后繼發(fā)支氣管哮喘的幾率較高，但目前尚無較好的預(yù)測方式，對于具有發(fā)生支氣管哮喘的患兒無法實施早期干預(yù)措施，以降低哮喘發(fā)生風(fēng)險，減少發(fā)作次數(shù)[10]。本研究應(yīng)用ROC曲線進(jìn)行評估，血ECP和尿LTE4聯(lián)合預(yù)測毛細(xì)支氣管炎后繼發(fā)哮喘風(fēng)險的效能較高(P<0.05)。

3.2血ECP和尿LTE4與RSV感染性毛細(xì)支氣管炎的相關(guān)性分析

RSV感染性毛細(xì)支氣管炎的病理基礎(chǔ)是RSV感染毛細(xì)支氣管引起的毛細(xì)支氣管黏膜水腫、上皮細(xì)胞脫落壞死和氣道堵塞等表現(xiàn)；而此時毛細(xì)支氣管周圍表現(xiàn)為較高水平的炎性細(xì)胞和炎性介質(zhì)浸潤，其中嗜酸性粒細(xì)胞和白三烯(leukotriene，LT)最為常見[11]。ECP是嗜酸性粒細(xì)胞釋放的一種特異性炎癥介質(zhì)，可反應(yīng)嗜酸性粒細(xì)胞的活化程度[12]。ECP還參與了氣道炎癥反應(yīng)，高水平的ECP能夠增加氣道的高反應(yīng)性[13]。LT主要由肥大細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞產(chǎn)生，I型半胱酰白三烯(CysLT1)受體廣泛分布于支氣管和細(xì)支氣管的平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞。CysLT1介導(dǎo)的一系列炎性反應(yīng)可以造成毛細(xì)支氣管周圍急性炎癥、黏膜水腫、黏膜上皮細(xì)胞的壞死及黏液分泌增多，從而引起RSV毛細(xì)支氣管炎的諸多癥狀[14]。RSV感染性毛細(xì)支氣管炎繼發(fā)支氣管哮喘與氣道的持續(xù)高反應(yīng)性有關(guān)，而各種炎性細(xì)胞和炎性因子的高水平在其中發(fā)揮了重要作用[15]。有研究顯示，在毛細(xì)支氣管炎的治療中應(yīng)用白三烯調(diào)節(jié)劑(如孟魯司特等)，能夠顯著抑制氣道的高反應(yīng)性[16]，明顯降低毛細(xì)支氣管炎后發(fā)生持續(xù)喘息的風(fēng)險[17]，也可降低繼發(fā)性支氣管炎的發(fā)生率[18]，尤其是用于存在過敏體質(zhì)和支氣管哮喘家族史的患兒[19]。

綜上所述，RSV毛細(xì)支氣管炎患兒血ECP、尿LTE4水平與病情嚴(yán)重程度呈正相關(guān)；血ECP聯(lián)合尿LTE4能夠較好地預(yù)測患兒繼發(fā)支氣管哮喘的風(fēng)險。