例析酵母菌計(jì)數(shù)方法與其種群密度調(diào)查方法的區(qū)別

黃淑彬

【摘 要】本文從學(xué)生解題中對(duì)酵母菌的計(jì)數(shù)方法和酵母菌的種群密度調(diào)查方法存在的疑惑出發(fā)，對(duì)人教版高中生物必修三中提到的酵母菌種群密度的調(diào)查方法和選修一中微生物的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行解釋，以便學(xué)生理解應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】酵母菌；計(jì)數(shù)方法；種群密度；調(diào)查方法

【中圖分類號(hào)】G633.91 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】2095-3089（2018）21-0070-01

一、題目

在“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”的實(shí)驗(yàn)中：

（1）采用的方法對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)。

學(xué)生1的答案：顯微鏡直接計(jì)數(shù)

學(xué)生2的答案：血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)

學(xué)生3的答案：抽樣檢測(cè)

參考答案：抽樣檢測(cè)

學(xué)生的疑惑：參考答案只給了抽樣檢測(cè)一個(gè)答案，此問難道答顯微鏡直接計(jì)數(shù)和血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)是錯(cuò)誤的嗎？

經(jīng)了解，學(xué)生有此疑惑的原因是，他們?cè)谄綍r(shí)練習(xí)中做過以下題目：

例1.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)敘述，正確的是（ ）

A.探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化，可采用抽樣檢測(cè)的方法對(duì)酵母菌計(jì)數(shù)

B.模擬探究細(xì)胞大小與物質(zhì)運(yùn)輸關(guān)系，正方體瓊脂塊的體積是無關(guān)變量

C.探究植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)扦插枝條生根作用，插條生根數(shù)是因變量

D.探究光照強(qiáng)弱對(duì)光合作用強(qiáng)度影響，小圓形葉片表面的氣泡數(shù)是因變量

答案：A

例2.（多選）要達(dá)到下列各項(xiàng)研究目的，所采用的研究方法正確的是（ ）

A.種群的數(shù)量變化——抽樣調(diào)查法

B.有絲分裂中染色體的變化規(guī)律——對(duì)比實(shí)驗(yàn)法

C.酵母菌的種群密度——抽樣檢測(cè)法和顯微直接計(jì)數(shù)法

D.土壤小動(dòng)物豐富度統(tǒng)計(jì)——記名計(jì)算法或目測(cè)估計(jì)法

答案：CD

例3.下列有關(guān)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是（ ）

A.在觀察洋蔥細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)中，解離的目的是使組織中的細(xì)胞相互分離

B.在綠葉中色素的提取實(shí)驗(yàn)中，研磨綠葉時(shí)應(yīng)加入一些有機(jī)溶劑，如無水乙醇等

C.進(jìn)行酵母菌計(jì)數(shù)時(shí)，可采用抽樣檢測(cè)的方法，利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)

D.檢測(cè)梨汁中是否含有葡萄糖，可加入適量斐林試劑，搖勻后觀察顏色變化

答案：D

人教版高中生物教材中有兩處涉及到微生物數(shù)量的計(jì)數(shù)，一處是必修三中“探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化”，運(yùn)用抽樣檢測(cè)法，在顯微鏡下觀察統(tǒng)計(jì)血球計(jì)數(shù)板上酵母菌數(shù)量并推算出培養(yǎng)液中酵母菌的個(gè)體數(shù)[2]；另一處是選修一中“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”，介紹了三種微生物的計(jì)數(shù)方法，分別是顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、稀釋涂布平板法和濾膜法[1]。學(xué)生通過練習(xí)，再結(jié)合教材自行總結(jié)：酵母菌的種群密度的調(diào)查方法有抽樣檢測(cè)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法，酵母菌的計(jì)數(shù)方法有抽樣檢測(cè)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法、稀釋涂布平板法。所以該題就出現(xiàn)如學(xué)生1和學(xué)生2的答案。

二、辨析

1.顯微鏡直接計(jì)數(shù)法。

顯微鏡直接計(jì)數(shù)法適用于各種含單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮液，如有雜菌或雜質(zhì)，常不易分辨。菌體較大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球計(jì)數(shù)板（也叫做血細(xì)胞計(jì)數(shù)板），一般細(xì)菌則采用彼得羅夫.霍澤（Petrof Hausser）細(xì)菌計(jì)數(shù)板，兩種計(jì)數(shù)板的原理和部件相同，只是細(xì)菌計(jì)數(shù)板較薄，可以使用油鏡觀察。而血球計(jì)數(shù)板較厚，不能使用油鏡，計(jì)數(shù)板下部的細(xì)菌不易看清[3]。由此筆者認(rèn)為微生物的計(jì)數(shù)方法，如果計(jì)數(shù)的微生物是菌體較大的酵母菌或霉菌孢子，則抽樣檢測(cè)法，顯微鏡直接計(jì)數(shù)法和血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法是等同的。

2.抽樣檢測(cè)法。

調(diào)查玻璃容器中酵母菌數(shù)量應(yīng)該使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行抽樣檢測(cè)的方法，來調(diào)查酵母菌的種群數(shù)量變化，通過取多次調(diào)查的平均值進(jìn)行估算，而不能準(zhǔn)確計(jì)數(shù)。利用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板進(jìn)行抽樣檢測(cè)的方法用到像調(diào)查植物種群數(shù)量變化的樣方法，但不等同于樣方法。

抽樣檢測(cè)法調(diào)查酵母菌種群密度的具體操作：先將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取培養(yǎng)液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，稍待片刻，待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，計(jì)數(shù)一個(gè)小方格內(nèi)的酵母菌數(shù)量，再以此為根據(jù)，估算試管中的酵母菌總數(shù)。

三、結(jié)論

抽樣檢測(cè)法對(duì)酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，要用到顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板。由此筆者認(rèn)為抽樣檢測(cè)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法的原理相似，所以這三種方法是等同的。也就是說酵母菌的計(jì)數(shù)方法有抽樣檢測(cè)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、血球（血細(xì)胞）計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法，而酵母菌的種群密度的調(diào)查必須對(duì)其進(jìn)行計(jì)數(shù)，故酵母菌的種群密度的調(diào)查方法和計(jì)數(shù)方法是一致的。所以該題學(xué)生1、學(xué)生2、學(xué)生3的答案都是正確的。

參考文獻(xiàn)

[1]朱正威，孫萬儒，趙占良主編.普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書生物選修一生物技術(shù)實(shí)踐[M].北京：人民教育出版社，2016：21.

[2]朱正威，孫萬儒主編.普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書生物必修三穩(wěn)態(tài)與環(huán)境[M].北京：人民教育出版社，2013：68.

[3]韓翠翠.“題說”2015年高考題中的微生物計(jì)數(shù)法[J].生物學(xué)教學(xué)，2016，44（1）：47.