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    外源性添加磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油及關(guān)鍵代謝酶含量的影響

    2018-08-07 11:44:40任萬平雒誠龍
    畜牧獸醫(yī)學(xué)報 2018年7期
    關(guān)鍵詞:三酰丙酮甘油

    任萬平,邵 偉,2,雒誠龍,余 雄

    (1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院,烏魯木齊 830052; 2.新疆肉乳用草食動物營養(yǎng)重點(diǎn)實驗室,烏魯木齊 830052)

    動物肌內(nèi)脂肪的含量和積累使肌肉表現(xiàn)出大理石花紋狀,影響和決定著肉的品質(zhì);尤其是高檔雪花牛肉,肌肉中的脂肪含量和分布越豐富,牛肉的品質(zhì)也就越好,因此,如何實現(xiàn)動物肌內(nèi)脂肪的合成與沉積具有重要的現(xiàn)實和科學(xué)意義。磷酸二羥基丙酮(dihydroxyacetone phosphate,DHAP)作為糖脂代謝的重要中間產(chǎn)物,參與到生物代謝,其代謝途徑主要有兩條:(1)糖代謝生成的二羥基丙酮,經(jīng)二羥基丙酮激酶磷酸化,生成磷酸二羥基丙酮,在磷酸丙糖異構(gòu)酶的催化下,生成3-磷酸甘油醛,經(jīng)一系列酶催化最終生成丙酮酸,進(jìn)入三羧酸循環(huán),再經(jīng)過一系列酶促反應(yīng)生成生脂原料乙酰輔酶A,用來合成脂肪;(2)二羥基丙酮經(jīng)二羥基丙酮激酶磷酸化后,生成磷酸二羥基丙酮,經(jīng)擴(kuò)散作用進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),在α-磷酸甘油脫氫酶的作用下,還原成α-磷酸甘油,再經(jīng)甘油轉(zhuǎn)酰基酶催化,與脂酰輔酶A最終合成三酰甘油[1-2]。國內(nèi)針對磷酸二羥基丙酮的研究主要是利用其合成稀有單糖[3-4],而磷酸二羥基丙酮直接使用對脂肪代謝的影響尚未見報道;作為其代謝前體的二羥基丙酮,用作新型飼料添加劑,用來提高生長降低體脂沉積和改善肉品品質(zhì)[5-6]。

    本試驗旨在研究磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油及其關(guān)鍵代謝酶含量的影響,通過試驗結(jié)果分析其對脂肪代謝的影響機(jī)制,為調(diào)控動物肌內(nèi)脂肪的沉積提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    小鼠前脂細(xì)胞(3T3-L1)購于上海賽笠生物技術(shù)公司;磷酸二羥基丙酮(DHAP)、DMEM高糖培養(yǎng)基、胎牛血清(FBS)、蛋白消化液(EDTA)、磷酸鹽緩沖液(PBS)、青鏈霉素試劑、3-異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX)、地塞米松(DEX)、胰島素(INS)購于美國GIBCO公司;試驗所用ELISA試劑盒均由上海美軒生物技術(shù)公司生產(chǎn)。

    1.2 試驗設(shè)計

    試驗于2016年10月至2017年7月在新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)肉乳用草食動物營養(yǎng)重點(diǎn)實驗室進(jìn)行。按照單因素試驗設(shè)計,在細(xì)胞培養(yǎng)液中分別加入不同劑量的磷酸二羥基丙酮作為不同試驗組:20 μmol·L-1(試驗Ⅰ組)、50 μmol·L-1(試驗Ⅱ組)、200 μmol·L-1(試驗Ⅲ組)以及不添加的空白對照組(ck組),并于0、36和72 h收集細(xì)胞及培養(yǎng)液凍存,以備送檢;每組試驗3個平行樣,每個平行樣3次重復(fù)。

    1.3 測定指標(biāo)及方法

    1.3.1 測定指標(biāo) 試驗收集的細(xì)胞凍存后送由上海賽笠生物技術(shù)公司檢測。檢測項目:果糖-6-磷酸激酶(6-PFK)、醛縮酶(FDA)、葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)、丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)、二硫辛酸轉(zhuǎn)乙?;?DLAT)、二硫辛酰胺脫氫酶(DLD)、乙酰CoA羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)、甘油二酯轉(zhuǎn)移酶2(DGAT2)、激素敏感脂肪酶(HSL)、三酰甘油水解酶(TGH)、肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ(CPT1)、三酰甘油(TG)、甘油二酯(DG)、游離脂肪酸(FFA)、丙酮酸(PA)、檸檬酸(CA)。

    1.3.2 試劑配制 完全培養(yǎng)基:89%DMEM高糖培養(yǎng)基+10%FBS胎牛血清+1%青鏈霉液;誘導(dǎo)液Ⅰ:完全培養(yǎng)基+0.5 mmol·L-1IBMX+1 μmol·L-1DEX+5 mg·L-1INS;誘導(dǎo)液Ⅱ:完全培養(yǎng)基+5 mg·L-1INS。

    1.3.3 細(xì)胞培養(yǎng) 參照郭秀玲等[7]方法將小鼠前脂細(xì)胞(3T3-L1)于含10%胎牛血清的完全培養(yǎng)基中,在37 ℃、5%CO2飽和濕度條件下培養(yǎng),待細(xì)胞融合度達(dá)80%左右,將細(xì)胞傳代接種到培養(yǎng)板中常規(guī)培養(yǎng),融合度達(dá)80%時誘導(dǎo),先用誘導(dǎo)液Ⅰ培養(yǎng)2 d,再換誘導(dǎo)液Ⅱ培養(yǎng)2 d,更換完全培養(yǎng)基培養(yǎng)第14天,加入含0、20、50、200 μmol·L-1的磷酸二羥基丙酮完全培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,于0、36、72 h收集細(xì)胞和培養(yǎng)基進(jìn)行后續(xù)檢測。

    1.3.4 代謝產(chǎn)物和酶含量的測定 試驗中各種代謝產(chǎn)物和酶含量的測定均參照閆莉等[8]的雙抗體夾心法。每個樣品平行測定3次。

    1.4 統(tǒng)計方法

    數(shù)據(jù)用“平均值(Means)±標(biāo)準(zhǔn)差(SD)”表示,用SPSS22進(jìn)行單因素方差分析,并用LSD方法進(jìn)行多重比較。

    2 結(jié) 果

    2.1 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油合成中關(guān)鍵限速酶含量的影響

    由表1 可知,在36和72 h時,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的G6PD水平均極顯著高于對照組(P<0.01),且試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);在36和72 h時,試驗各組DLAT、DLD和FAS的含量均極顯著高于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);試驗各組ACC含量差異均不顯著(P>0.05);在36和72 h時,試驗各組DGAT2的含量顯著或極顯著高于對照組(P<0.05,P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05)。

    表1磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油合成中關(guān)鍵限速酶含量的影響

    Table1Effectofdihydroxyacetonephosphateonkeyrate-limitingenzymecontentsinTGsynthesisinmouseadipocytes

    項目Item組別Group0 h36 h72 h果糖-6-磷酸激酶/(ng·mL-1) 6-PFKck85.97±5.4588.30±5.0583.99±5.14Ⅰ85.19±4.8792.08±5.1790.43±5.07Ⅱ81.46±5.0292.53±4.5690.43±5.07Ⅲ82.04±4.9692.83±4.6889.78±5.23葡萄糖-6-磷酸脫氫酶/(pg·mL-1)G6PDck1 692.65±98.511 684.51±96.86Bb1 688.56±96.51BbⅠ1 643.54±99.522 173.83±97.44Aa2 116.53±90.91AaⅡ1 753.38±95.272 158.56±95.97Aa2 019.46±85.14AaⅢ1 778.62±101.622 097.84±95.59Aa2 138.76±89.45Aa醛縮酶/(ng·mL-1)FDAck108.38±7.45107.19±6.46109.62±6.25Ⅰ106.79±7.58100.82±6.97107.17±6.46Ⅱ112.51±6.53107.56±7.05112.33±6.34Ⅲ111.01±6.41108.38±7.32109.98±6.26丙酮酸脫氫酶E1/(ng·mL-1)PDHE1ck14.29±1.0514.41±1.0314.31±1.04Ⅰ14.31±1.0113.73±1.0714.11±1.05Ⅱ14.49±1.0114.39±1.0814.54±1.01Ⅲ14.41±1.0214.41±1.0914.36±1.06二硫辛酸轉(zhuǎn)乙?;?(pg·mL-1)DLATck1 220.01±98.511 216.61±97.45Bb1 204.65±99.56BbⅠ1 212.53±97.021 573.93±95.74Aa1 497.78±93.21AaⅡ1 262.96±94.471 573.19±92.97Aa1 556.16±92.35AaⅢ1 204.65±99.521 525.14±95.83Aa1 617.21±89.87Aa二硫辛酰胺脫氫酶/(pg·mL-1)DLDck716.63±37.01714.82±34.07Bb686.52±36.46BbⅠ714.87±36.51898.03±32.73Aa828.38±30.37AaⅡ719.16±34.41904.12±30.48Aa882.35±28.73AaⅢ712.59±30.92958.87±27.86Aa879.41±29.21Aa

    (轉(zhuǎn)下頁 Carried forward)

    各試驗組間,同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),肩標(biāo)不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),字母相同或無肩標(biāo)表示差異不顯著(P>0.05)。下同

    In the same column,values with different capital letter superscripts mean extremely significant difference(P<0.01), values with different small letter superscripts mean significant difference(P<0.05), while values with the same or no letter superscript mean no significant difference(P>0.05) among different groups. The same as below

    2.2 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油分解代謝中關(guān)鍵限速酶含量的影響

    由表2可知,在36和72 h時,試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組HSL含量均極顯著低于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);試驗各組TGH含量與對照組差異均不顯著(P>0.05);在36和72 h時,試驗各組CPT1含量均極顯著低于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05)。

    表2磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油分解代謝中關(guān)鍵限速酶含量的影響

    Table2Effectofdihydroxyacetonephosphateonkeyrate-limitingenzymecontentsinTGcatabolisminmouseadipocytes

    項目Item組別Group0 h36 h72 h激素敏感脂肪酶/(pg·mL-1)HSLck2 397.36±98.512 363.64±96.86Aa2 283.11±95.63AaⅠ2 402.34±96.051 165.86±81.08Bb1 319.47±83.77BbⅡ2 430.44±99.471 302.63±82.65Bb1 268.88±88.81BbⅢ2 461.73±93.991 197.08±80.21Bb1 139.09±81.09Bb三酰甘油水解酶/(pg·mL-1)TGHck1 622.25±121.011 591.93±121.861 677.91±123.22Ⅰ1 673.36±120.281 651.18±120.461 620.43±119.08Ⅱ1 665.33±125.321 687.51±121.311 660.82±121.34Ⅲ1 611.03±122.141 641.82±110.191 665.33±122.02肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ/(pg·mL-1)CPT1ck508.61±28.51541.41±27.79Aa563.27±29.05AaⅠ490.88±29.01353.61±23.81Bb245.14±20.21BbⅡ487.41±28.28342.54±24.62Bb220.41±19.44BbⅢ478.88±30.54314.74±24.08Bb202.68±18.74Bb

    2.3 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油代謝關(guān)鍵產(chǎn)物的影響

    由表3可知,在36和72 h時,試驗各組TG含量均極顯著高于對照組(P<0.01),且試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);在36和72 h時,試驗各組DG含量均顯著低于對照組(P<0.05),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);在36和72 h時,試驗各組FFA含量均極顯著低于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05);在36 h時,試驗各組PA含量與對照組差異不顯著(P>0.05),在72 h 時,試驗各組PA含量均顯著高于對照組(P<0.05);在36和72 h時,試驗各組CA含量均極顯著高于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05)。

    表3磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油代謝產(chǎn)物含量的影響

    Table3EffectofdihydroxyacetonephosphateonthecontentsofTGmetabolitesinmouseadipocytes

    項目Item組別Group0 h36 h72 h三酰甘油/(ng·mL-1)TGck453.53±23.51465.57±25.95Bb438.82±23.14BbⅠ442.17±25.63533.11±26.16Aa535.78±23.47AaⅡ465.91±28.01540.79±23.71Aa559.51±23.85AaⅢ474.26±26.19558.52±22.49Aa565.19±20.53Aa甘油二酯/(ng·mL-1)DGck10.46±0.6910.69±0.66a10.32±0.68aⅠ9.67±0.669.02±0.64b9.02±0.67bⅡ10.14±0.718.36±0.72b8.64±0.69bⅢ9.74±0.658.95±0.68b8.71±0.65b游離脂肪酸/(μg·mL-1)FFAck96.23±6.9194.88±6.89Aa95.76±6.75AaⅠ103.96±6.7568.77±6.75Bb67.67±6.12BbⅡ95.75±5.9270.03±5.99Bb74.99±5.86BbⅢ96.99±6.0574.52±6.16Bb75.22±6.07Bb丙酮酸/(nmol·mL-1)PAck9.21±0.699.06±0.679.16±0.68bⅠ9.29±0.729.63±0.7110.69±0.72aⅡ9.07±0.679.67±0.6510.89±0.67aⅢ9.15±0.669.79±0.6410.98±0.65a檸檬酸/(pg·mL-1)CAck1.62±0.061.70±0.07Bb1.65±0.07BbⅠ1.61±0.071.95±0.06Aa1.96±0.07AaⅡ1.64±0.072.02±0.07Aa2.01±0.06AaⅢ1.65±0.062.06±0.06Aa1.95±0.07Aa

    3 討 論

    3.1 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油合成關(guān)鍵限速酶含量的影響

    三酰甘油的存在是細(xì)胞將糖轉(zhuǎn)化為脂肪儲存起來的結(jié)果,其實質(zhì)就是糖脂代謝過程中一系列的酶促反應(yīng),葡萄糖經(jīng)過一系列關(guān)鍵限速酶的催化生成乙酰輔酶A,生成的乙酰輔酶A再經(jīng)過乙酰輔酶A羧化酶、脂肪酸合成酶催化生成脂肪酸,再與糖代謝生成的中間產(chǎn)物α-磷酸甘油經(jīng)過甘油?;D(zhuǎn)移酶系的催化,最終生成三酰甘油,因此任何糖、脂代謝中關(guān)鍵限速酶含量與中間產(chǎn)物含量的變化都能直接影響到三酰甘油的代謝。G6PD是糖脂代謝過程中的關(guān)鍵限速酶,能夠催化葡萄糖生成還原性輔酶A(NADPH)、乙酰輔酶A等用于脂肪酸的合成。本研究中(表1),在36和72 h時,試驗各組的G6PD均極顯著高于對照組(P<0.01),鄭雅楠等[9]研究發(fā)現(xiàn),G6PD表達(dá)增高,能夠促進(jìn)NADPH的含量增加,而Khu等[10]研究發(fā)現(xiàn),糖代謝中G6PD升高,能夠促進(jìn)細(xì)胞對糖的利用,增加脂肪的合成和沉積,這與本研究結(jié)果一致。PDHE1、DLAT、DLD統(tǒng)稱丙酮酸脫氫酶復(fù)合體,由葡萄糖代謝產(chǎn)生的丙酮酸經(jīng)此酶系催化脫羧生成乙酰CoA,DLAT和DLD在該酶系中起到主要調(diào)節(jié)作用。在36和72 h時,試驗各組DLAT和DLD的含量極顯著高于對照組(P<0.01),程鈺蓉等[11]研究發(fā)現(xiàn),丙酮酸脫氫酶系活性增加,脂肪合成增強(qiáng),其活性抑制能夠降低脂肪的合成,與本研究結(jié)果相似,說明添加不同劑量的磷酸二羥基丙酮能夠提高細(xì)胞中丙酮酸脫氫酶系的活性,從而促進(jìn)丙酮酸的代謝。

    以上糖代謝的酶促反應(yīng)中,由G6PD催化反應(yīng)產(chǎn)生的NADPH+H+為脂肪的生物合成提供了所需的大量氫體,丙酮酸脫氫酶復(fù)合體則催化丙酮酸生成脂肪合成的原料乙酰CoA,這些由糖代謝生成的氫體和乙酰CoA存在于胞液中,接下來再經(jīng)過脂代謝關(guān)鍵合成酶ACC與FAS的催化,生成脂肪酸鏈,用于合成三酰甘油。本研究中,試驗各組的G6PD與丙酮酸脫氫酶復(fù)合體的含量極顯著提高,說明試驗各組生成的生脂原料和氫體增多。

    ACC能夠催化乙酰CoA生成丙二酰輔酶A,是催化合成脂肪酸的第一步,也是最重要的一步,生成的丙二酰輔酶A的含量直接決定著脂肪酸的合成量。本研究中(表1),添加磷酸二羥基丙酮的試驗各組能夠提高ACC的含量,在36和72 h時,試驗Ⅰ組ACC的含量就比對照組分別高出了9.62%和9.69%,李亮等[12]研究發(fā)現(xiàn),ACC的含量升高,機(jī)體內(nèi)脂肪的合成沉積增加;Mao等[13]和Barber等[14]研究證實,ACC活性增加能夠促進(jìn)細(xì)胞三酰甘油的合成與沉積,這與本研究結(jié)果一致。FAS是一個多酶復(fù)合體,催化乙酰CoA生成脂肪酸。試驗結(jié)果表明,添加不同劑量磷酸二羥基丙酮能夠極顯著提高FAS的含量(P<0.01),劉作華等[15]研究發(fā)現(xiàn),F(xiàn)AS表達(dá)升高,脂肪的含量增加,而Dentin等[16]研究也證實其活性的高低直接控制脂肪合成的強(qiáng)弱,其表達(dá)水平升高能夠顯著增加三酰甘油的沉積,充分證明了本研究結(jié)果。在ACC和FAS催化的脂代謝反應(yīng)中,本研究中試驗各組的ACC和FAS極顯著高于對照組,說明試驗各組合成的脂肪酸量也顯著高于對照組。DGAT2是催化甘油二酯轉(zhuǎn)變成三酰甘油的限速酶,能夠催化α-磷酸甘油(由磷酸二羥基丙酮還原得到)和脂肪酸生成三酰甘油。由本試驗結(jié)果可知,在36 h時,試驗各組DGAT2含量顯著高于對照組(P<0.05),72 h時,極顯著高于對照組水平(P<0.01);Nestel[17]、張曉圖等[18]研究發(fā)現(xiàn),DGAT2表達(dá)和活性升高,三酰甘油合成加強(qiáng),這與本研究結(jié)果一致。因為試驗各組的三酰甘油合成量強(qiáng)于對照組,所以試驗各組的三酰甘油含量也顯著高于對照組。

    3.2 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油分解代謝中關(guān)鍵限速酶含量的影響

    三酰甘油的存在是一個合成和分解動態(tài)平衡的結(jié)果,其在合成的同時分解也在進(jìn)行。HSL在脂肪分解中起到?jīng)Q定性作用,是分解脂肪的關(guān)鍵限速酶。本研究中(表2),試驗各組HSL的含量均極顯著低于對照組水平(P<0.01),這與Lorente-Cebrin等[19]與Xu等[20]研究結(jié)果一致,HSL表達(dá)抑制,脂肪分解減少;說明磷酸二羥基丙酮能夠極顯著降低HSL含量和活性,從而抑制三酰甘油的分解。TGH也是催化三酰甘油水解的重要脂肪酶,Cornaciu等[21]、Chakrabarti和Kandror[22]和Serr等[23]研究發(fā)現(xiàn),TGH的表達(dá)抑制能夠促進(jìn)三酰甘油的沉積,何微[24]研究發(fā)現(xiàn),高脂營養(yǎng)水平促進(jìn)脂肪合成和沉積時,TGH表達(dá)顯著被抑制,而袁禹惠[25]研究發(fā)現(xiàn),高脂營養(yǎng)水平能夠抑制脂肪的沉積,但是對TGH酶的表達(dá)和含量影響并不顯著,這與本研究結(jié)果一致,表明添加磷酸二羥基丙酮對TGH整體含量影響不顯著(P>0.05)。

    肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶Ⅰ(CPT1)是轉(zhuǎn)運(yùn)活化的脂肪酸(脂酰CoA)進(jìn)入線粒體進(jìn)行氧化分解的關(guān)鍵限速酶。本研究中(表2),試驗各組CPT1的含量在36和72 h時均極顯著低于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異均不顯著(P>0.05),胡偉[26]、董婧[27]、Abu-Elheiga等[28]研究證實,抑制CPT1的表達(dá)和含量能夠抑制脂肪的氧化,增加脂肪的沉積,與本研究結(jié)果一致,說明磷酸二羥基丙酮能夠降低脂肪細(xì)胞內(nèi)CPT1的含量,抑制脂肪酸的β氧化分解,從而增加三酰甘油在脂肪細(xì)胞內(nèi)的沉積。

    本研究中,試驗各組HSL和CPT1含量均極顯著低于對照組,說明試驗各組生成的三酰甘油分解速率也顯著低于對照組,這也是試驗各組三酰甘油含量顯著高于對照組的原因之一。

    3.3 磷酸二羥基丙酮對小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油代謝關(guān)鍵產(chǎn)物含量的影響

    本研究結(jié)果可知(表3),試驗各組TG的含量在36和72 h時均極顯著高于對照組(P<0.01),試驗各組之間差異不顯著(P>0.05),推測可能是磷酸二羥基丙酮一方面通過提高ACC、FAS酶的活性,促進(jìn)FFA的合成;另一方面磷酸二羥基丙酮經(jīng)過還原作用生成α-磷酸甘油,與之前生成的FFA經(jīng)甘油二酯轉(zhuǎn)移酶系催化生成三酰甘油,而本研究中FFA含量極顯著降低,DGAT2酶含量極顯著升高能夠說明這些。楊少鵬[2]證實,磷酸二羥基丙酮在生物體內(nèi)一是參與糖代謝,二是用于合成三酰甘油[29],也能夠證明本研究結(jié)果,說明磷酸二羥基丙酮能夠促進(jìn)小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油的合成和沉積。

    DG和FFA既是TG的合成前體同時也是其分解產(chǎn)物,在本研究中,試驗各組FFA的含量均極顯著低于對照組(P<0.01),試驗各組DG含量均顯著低于對照組(P<0.05),這與楊竹青等[30]通過煙酸抑制三酰甘油分解從而顯著降低細(xì)胞中FFA含量結(jié)果一致,因為添加磷酸二羥基丙酮能夠顯著降低三酰甘油水解酶HSL的含量,極顯著提高DGAT2和TG含量,更多的FFA和DG用于合成TG,因此試驗各組FFA和DG的含量顯著降低。

    PA、CA作為糖脂代謝的關(guān)鍵中間產(chǎn)物,構(gòu)成檸檬酸-丙酮酸循環(huán),能夠?qū)⒑现弦阴oA從線粒體中轉(zhuǎn)運(yùn)至胞液中,用于合成脂肪。在本研究中,試驗各組PA的含量在72 h均高出對照組水平(P<0.05),試驗各組CA含量在36和72 h均極顯著高出對照組水平(P<0.01),推測,一是添加的磷酸二羥基丙酮本身參與代謝,生成更多PA和CA,二是由于添加了磷酸二羥基丙酮,多余的葡萄糖用于代謝生成PA和CA,因此能夠生成并轉(zhuǎn)運(yùn)更多的生脂原料—乙酰CoA,Wang等[31]研究發(fā)現(xiàn),在脂代謝的調(diào)控過程中,多余的葡萄糖會誘導(dǎo)PA、CA、ACC及FAS等表達(dá),從而促進(jìn)脂肪的合成,這與本研究結(jié)果一致。

    4 結(jié) 論

    外源性添加磷酸二羥基丙酮能夠極顯著提高小鼠脂肪細(xì)胞三酰甘油合成代謝中G6PD、DLAT、DLD、FAS等酶的含量,同時極顯著降低三酰甘油分解代謝中HSL與CPT1酶的含量;從而增強(qiáng)小鼠脂肪細(xì)胞中三酰甘油的含量和沉積。

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