半胱胺對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊部分生殖激素和精子活力的影響

鮑宇紅 ，馮 柯 ，劉孟君 ，馬金英，參木友 ，宋天增

（1.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院草業(yè)科學(xué)研究所，拉薩 850000；2.西藏自治區(qū)拉薩市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，拉薩 850000；3.西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，拉薩 850009）

半胱胺（Cysteamine，CS）又名 β-巰基乙胺，分子式為NH2-CH2-CH2-SH，是CoA分子的組成部分。關(guān)于CS消耗體內(nèi)生長抑素（SS），促進(jìn)動(dòng)物生長，提高飼料轉(zhuǎn)化率方面的研究已經(jīng)比較深入［1-2］。在動(dòng)物繁殖生產(chǎn)方面的研究表明，CS可促進(jìn)妊娠大鼠乳腺發(fā)育［3］，提高雞的產(chǎn)蛋性能［4-5］及奶牛哺乳期的產(chǎn)奶量［6-7］。盡管 CS 對(duì)動(dòng)物部分繁殖生產(chǎn)性能方面的研究取得了良好的進(jìn)展，但對(duì)高海拔地區(qū)藏綿羊配種季節(jié)雄性藏綿羊繁殖性能的影響尚未見報(bào)道。本研究旨在探討藏綿羊飼料中添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性羊部分生殖激素（FSH、LH、E、T）和精子活力的影響，為今后開展半胱胺在高海拔地區(qū)綿羊營養(yǎng)研究應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與材料

1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與試驗(yàn)地點(diǎn) 3～5歲雄性健康藏綿羊25只。時(shí)間2016年9—11月，地點(diǎn)在西藏拉薩市當(dāng)雄縣龍仁鄉(xiāng)郭慶村和西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所。

1.1.2 主要設(shè)備與試劑 紫外可見分光光度計(jì)（752N上海精科），精子質(zhì)量分析儀（JFX-B海力孚-華眾），電熱恒溫水槽（DKB-450A上海森信），變頻冰箱（BCD-649WDVC海爾），包被半胱胺亞酸鹽（濰坊加易加生物科技有限公司），促卵泡素（FSH）ELISA試劑盒、黃體激素（LH）ELISA試劑盒、雌激素（E）ELISA試劑盒及睪酮（T）ELISA試劑盒均購自武漢純度生物科技有限公司。

1.2 試驗(yàn)內(nèi)容

使用相應(yīng)的ELISA試劑盒，檢測試驗(yàn)羊血清FSH、LH、E和T水平；精子質(zhì)量分析儀分析鮮精和用等溫的維生素B12做4倍稀釋并于4℃保存8 h后的精子活力。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

雄性健康藏綿羊25只，隨機(jī)分為5個(gè)處理。在2016年9月1日開始的35 d試驗(yàn)期內(nèi)，均為白天自由放牧，每晚每只羊補(bǔ)飼基礎(chǔ)日糧［8］（基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1）250 g，試驗(yàn)組分別添加CS 0 mg/（kg·BW）、5 mg/（kg·BW）、10 mg/（kg·BW）、15 mg/（kg·BW）和20 mg/（kg·BW），每隔一天添加1次。預(yù)試期7 d。

試驗(yàn)用25只雄性健康藏綿羊隔2 d的上午9：00空腹頸靜脈采血5 mL，同時(shí)采精1次，共采集7次。

采集的5 mL頸靜脈血，10 000 r/min離心5 min，分離血清于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

每次每只雄性健康藏綿羊精液試驗(yàn)分為2組，每組3個(gè)重復(fù)。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平%

1.4 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)采用Excel進(jìn)行前期處理，再用SPSS 11.5軟件進(jìn)行One-WayANOVA方差分析，并進(jìn)行多重比較，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，檢驗(yàn)誤差為5%和1%。

2 結(jié)果與分析

由圖1～4可知，隨著CS添加量的增加，血清中卵泡刺激素（FSH）和促黃體素（LH）分泌水平逐漸降低；雌激素（E）和睪酮（T）隨著CS添加量的增加，分泌水平逐步提高，當(dāng)CS添加量為10 mg/（kg·BW）時(shí)，分泌水平達(dá)到峰值，之后隨著添加量的增加分泌水平下降。

由表2可知，在配種季節(jié)雄性藏綿羊補(bǔ)飼日糧中添加CS，可提高鮮精活力，但未達(dá)到顯著水平（P＞0.05），以CS 10 mg/（kg·BW）添加量為最高；鮮精經(jīng)維生素B12做4倍稀釋并于4℃保存8 h后（如表3），10 mg/（kg·BW）添加組和15mg/（kg·BW）添加組均較對(duì)照組、5mg/（kg·BW）添加組和20 mg/（kg·BW）添加組精子活力顯著提高（P＜0.05），但對(duì)照組與5 mg/（kg·BW）組和20 mg/（kg·BW）組間差異均不顯著（P＞0.05），且10 mg/（kg·BW）添加組與15 mg/（kg·BW）添加組間的精子活力也無差異（P＞0.05），且以CS 10 mg/（kg·BW）添加組為最高。

圖1 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊FSH的影響

圖2 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊LH的影響

圖3 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊E的影響

圖4 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊T的影響

表2 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊鮮精精子活力的影響

表3 添加CS對(duì)配種季節(jié)雄性藏綿羊鮮精經(jīng)維生素B12做4倍稀釋并于4℃保存8 h后的精子活力的影響

3 討論

卵泡刺激素（FSH）與LH協(xié)同間接通過刺激睪酮分泌促精子形成。雌激素（E）可通過與下丘腦或垂體的受體結(jié)合，對(duì)LH的分泌產(chǎn)生負(fù)反饋調(diào)節(jié)。在雄激素分泌過多時(shí)，通過負(fù)反饋抑制下丘腦分泌、釋放GnRH和垂體分泌、釋放FSH、LH。雄激素對(duì)雌激素有頡頏作用。

隨著CS添加量的增加，血清中卵泡刺激素（FSH）和促黃體素（LH）分泌水平逐漸降低，而雌激素（E）和睪酮（T）隨著CS添加量的增加分泌水平逐步提高，當(dāng)CS添加量為10 mg/（kg·BW）時(shí)，分泌水平達(dá)到峰值，之后隨著添加量的增加分泌水平下降。此結(jié)果與王彥迪等［9］的研究結(jié)果一致，但睪酮（T）分泌水平差異較大，這可能與試驗(yàn)動(dòng)物的高海拔生存環(huán)境有關(guān)。CS具有抗氧化作用［10-11］，鮮精和鮮精經(jīng)維生素B12做4倍稀釋后的精子活力均以CS 10 mg/（kg·BW）添加量為最高。

4 結(jié)論

在配種季節(jié)雄性藏綿羊補(bǔ)飼日糧中添加CS可抑制卵泡刺激素（FSH）和促黃體素（LH）的分泌水平，提高雌激素（E）和睪酮（T）的分泌水平，以及精子活力。且以CS 10 mg/（kg·BW）添加量為最佳。