阿奇霉素聯(lián)合左氧氟沙星對(duì)非哺乳期乳腺炎患者外周血淋巴細(xì)胞水平的影響

楊興平

非哺乳期乳腺炎（non-puerperal mastitis,NPM）是一種發(fā)生于成年婦女非哺乳期的非特異性炎癥，常見(jiàn)類(lèi)型包括漿細(xì)胞性乳腺炎（plasmacell mastitis,PCM）和肉芽腫性乳腺炎（granulomatous mastitis,GM）[1]。NPM 的發(fā)病機(jī)制臨床尚未明確，乳腺組織產(chǎn)生的變化在一定程度上與甲狀腺炎等病癥相似，可能與本身存在的免疫紊亂相關(guān)[2]。相關(guān)研究表明，NPM也可能是因?yàn)槿橄傩∪~分泌的分泌物外滲所致[3]。NPM盡管為乳腺良性疾病，但尚無(wú)系統(tǒng)、規(guī)范的藥物治療方法，外科手術(shù)切除后復(fù)發(fā)率較高，可嚴(yán)重影響患者的生活及工作。廣譜抗生素是治療NPM 的有效方式，文獻(xiàn)報(bào)道治療有效率為 50%～70%[4]。本研究就阿奇霉素聯(lián)合左氧氟沙星對(duì)NPM患者外周血淋巴細(xì)胞水平的影響進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料將深圳市福田區(qū)婦幼保健院乳腺外科2015年1月至2017年4月收治的50例NPM患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合NPM相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；②治療前1個(gè)月未服用激素類(lèi)或免疫抑制劑藥物；③無(wú)免疫性疾病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、硬皮病、甲狀腺功能亢進(jìn)、糖尿病、原發(fā)性血小板減少性紫癜、自身免疫性溶血性貧血、潰瘍性結(jié)腸炎以及皮膚病、慢性肝病等。排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)阿奇霉素/左氧氟沙星過(guò)敏；②其他嚴(yán)重疾病，如臟器病變、惡性血液病、腫瘤等；③拒絕參與本研究者。50例患者年齡24～48歲，平均（35.2±7.6）歲，病程14 d至40個(gè)月，平均（4.7±5.2）個(gè)月；其中單純腫塊型31例，膿腫型9例，混合型7，竇道型3例。選取同期于深圳市福田區(qū)婦幼保健院健康體檢的成人婦女 50例作為對(duì)照組，年齡21～46歲，平均（34.7±7.4）歲。兩組研究對(duì)象一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 NPM診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]①非哺乳期婦女，乳房局部出現(xiàn)腫脹、疼痛、發(fā)紅、溫度升高等癥狀；②血常規(guī)提示白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）及中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著升高，核象左移，C反應(yīng)蛋白（CRP）亦有不同程度升高；③局部乳房腫塊逐漸增大，存在熱、紅、腫、疼痛等病癥；④乳腺超聲檢查可見(jiàn)小液平面，腫塊穿刺有膿液。

1.3 治療方法常規(guī)治療：入院后即安排常規(guī)乳腺彩色多普勒超聲、肝功能、腎功能、乳腺鉬靶X線攝影等常規(guī)檢查，指導(dǎo)患者注意飲食，伴膿腫患者予以膿腫引流。藥物治療：患者口服阿奇霉素片（輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào) H10960168，規(guī)格：0.5 g/片），0.5 g/次，3次/d；左氧氟沙星片（第一三共制藥有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字號(hào)H20000655，規(guī)格：0.1 g/片），0.1 g/次，3 次/d。療程14 d。

1.4 外周血淋巴細(xì)胞水平測(cè)定抽取所有入組人群清晨空腹肘靜脈血3 ml，采用FACSCalibur流式細(xì)胞儀檢測(cè) T淋巴細(xì)胞水平（CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+），采用美國(guó) Beckman Coulter生產(chǎn)的IMMAGE 800免疫化學(xué)系統(tǒng)測(cè)定儀測(cè)定IgA、IgG、IgM及C3、C4補(bǔ)體水平。研究組患者于治療14 d后重復(fù)測(cè)定1次。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 治療前后NPM患者外周血T淋巴細(xì)胞水平比較研究組患者治療前的CD3+、CD8+水平顯著低于對(duì)照組，CD4+、CD4+/CD8+水平顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）；研究組患者治療后的CD4+、CD4+/CD8+水平顯著低于治療前，CD3+、CD8+水平顯著高于治療前，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 治療前后NPM患者外周血B細(xì)胞及補(bǔ)體水平比較研究組患者治療前的IgA、IgM及C4水平均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。研究組患者治療前后的 IgA、IgG、IgM 及 C3、C4水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

相關(guān)研究表明，NPM的致病因素主要包括多次生育、超重/吸煙、炎癥、乳頭畸形、細(xì)菌感染及自身免疫內(nèi)分泌紊亂[6]。近年來(lái)，越來(lái)越多的學(xué)者認(rèn)為NPM為自身免疫性疾病，NPM患者普遍存在著免疫功能紊亂現(xiàn)象。Javadzadeh等[7]通過(guò)對(duì)NPM穿刺標(biāo)本的外周T淋巴細(xì)胞水平研究發(fā)現(xiàn)，標(biāo)本內(nèi)存在CD68陽(yáng)性巨噬細(xì)胞。Lacambra等[8]對(duì)NPM腫塊標(biāo)本染色電子光鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，局部存在大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)、吞噬脂肪的泡沫細(xì)胞、漿細(xì)胞，表明自身免疫應(yīng)答發(fā)揮著重要作用。NPM的常見(jiàn)治療手段為使用抗生素治療，有學(xué)者[9]對(duì)NPM患者的膿液進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)，表皮葡萄球菌、鏈球菌、金黃色葡萄球菌是主要致病菌，并對(duì)提取的三種細(xì)菌的抗生素耐藥情況進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，金黃色葡萄球菌存在多重耐藥趨勢(shì)，鏈球菌對(duì)青霉素類(lèi)廣譜 β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素較為敏感，表皮葡萄球菌對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)抗生素較為敏感。還有學(xué)者[10]建議對(duì)NPM治療時(shí)，不應(yīng)首選克林霉素、紅霉素、青霉素，建議選擇相對(duì)安全敏感的抗菌藥物，如氨芐西林、阿莫西林等藥物。T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫的指標(biāo)主要由 T細(xì)胞亞群產(chǎn)生，其中T細(xì)胞由CD3+細(xì)胞代表，同時(shí)，外周血T細(xì)胞可分為CD4輔助性T細(xì)胞和CD8抑制性T細(xì)胞，而CD4+細(xì)胞與CD8+細(xì)胞相互協(xié)調(diào)，維持機(jī)體的細(xì)胞免疫應(yīng)答及免疫平衡，正常人群的CD4+/CD8+比值始終維持在正常范圍內(nèi)，使之既不能損傷正常組織，又可清除異體抗原。本研究結(jié)果顯示，研究組患者治療前CD3+、CD8+水平顯著低于對(duì)照組，CD4+、CD4+/CD8+水平顯著高于對(duì)照組，符合炎癥狀態(tài)的判斷，說(shuō)明NPM患者存在外周血T細(xì)胞紊亂，細(xì)胞免疫功能整體下降。本研究中，研究組患者治療后的 CD4+、CD4+/CD8+水平顯著低于治療前，CD3+、CD8+水平顯著高于治療前。提示阿奇霉素聯(lián)合左氧氟沙星可一定程度提升NPM患者的細(xì)胞免疫功能，糾正免疫失衡狀態(tài)。

表1 治療前后NPM患者與健康體檢者的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較(±s)

表1 治療前后NPM患者與健康體檢者的外周血T淋巴細(xì)胞水平比較(±s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與治療前比較，bP＜0.05

組別 例數(shù) CD3+(%) CD4+(%) CD8+(%) CD4+/CD8+對(duì)照組 50 82.59±5.21 40.73±9.89 33.27±5.22 1.26±0.28研究組 50治療前 75.41±10.22a 45.71±8.19a 29.67±6.21a 1.47±0.37a治療后 79.80±8.68ab 43.98±7.24ab 31.90±5.73ab 1.31±0.34ab

表2 治療前后NPM患者與健康體檢者的外周血B細(xì)胞及補(bǔ)體水平比較(g/L,±s)

表2 治療前后NPM患者與健康體檢者的外周血B細(xì)胞及補(bǔ)體水平比較(g/L,±s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05

組別 例數(shù) IgA IgG IgM C3 C4對(duì)照組 50 2.07±0.75 12.48±2.19 1.25±0.41 1.26±0.08 0.23±0.09研究組 50治療前 2.78±1.08a 12.46±2.15a 1.83±0.76a 1.22±0.11 0.29±0.08a治療后 2.70±0.92a 12.37±2.14a 1.77±0.63a 1.24±0.09 0.28±0.08a

Ozel等[11]研究發(fā)現(xiàn)，NPM患者普遍存在著免疫球蛋白及補(bǔ)體等免疫指標(biāo)失衡狀況。免疫球蛋白具有抗體活性，IgA可在乳腺合成及分泌，為參與局部免疫的重要抗體，可使病原體粘附于細(xì)胞表面，清除局部抗原。IgM 廣泛存在于血液中，其含量水平增高可激活補(bǔ)體水平，引發(fā)補(bǔ)體水平增高，當(dāng)抗原入侵后，IgM 首先應(yīng)答，補(bǔ)體水平升高，而后大量合成 IgA清除抗原，完成免疫防御機(jī)制。本研究結(jié)果顯示，研究組患者治療前的IgA、IgM、C4水平均顯著高于對(duì)照組，與 Ogura等[12]及許銳等[13]的研究結(jié)果相似，進(jìn)一步證實(shí)NPM患者存在明顯的體液免疫紊亂現(xiàn)象。NPM患者引發(fā)的局部炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致IgA、IgM水平升高，在局部抗感染的同時(shí)，IgM激活補(bǔ)體系統(tǒng)，C4水平上升，介導(dǎo)免疫損傷。炎癥狀態(tài)下，補(bǔ)體C2、C3及C4水平均上升，總體補(bǔ)體活性升高。本研究中NPM患者治療前，C4明顯上升，而C3卻略有下降，考慮可能與C4補(bǔ)體促進(jìn)吞噬細(xì)胞吞噬抗原、防止免疫復(fù)合物沉著作用有關(guān)，C3補(bǔ)體主要由巨噬細(xì)胞和肝臟合成，吞噬細(xì)胞消滅抗原后，其水平明顯下降，可導(dǎo)致C3合成不足。本研究發(fā)現(xiàn)，研究組治療前后的IgA、IgG、IgM及C3、C4水平比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明阿奇霉素聯(lián)合左氧氟沙星治療NPM患者對(duì)其體液免疫應(yīng)答無(wú)明顯影響，阿莫西林口服后可與菌體內(nèi)轉(zhuǎn)肽酶結(jié)合使之失活，抑制菌體細(xì)胞壁合成，使細(xì)菌迅速死亡，其抑菌機(jī)制不依賴(lài)體液免疫功能。

綜上所述，NPM患者的外周血T淋巴細(xì)胞、免疫球蛋白及補(bǔ)體水平與正常人均有顯著差異，該差異可用于NPM的早期輔助診斷。阿奇霉素聯(lián)合左氧氟沙星可一定程度糾正NPM患者的細(xì)胞免疫功能紊亂，但對(duì)體液免疫無(wú)影響。由于本研究樣本數(shù)量相對(duì)較小，可能對(duì)研究結(jié)果產(chǎn)生一定偏倚，NPM的主要特點(diǎn)之一為激素失調(diào)，而激素失調(diào)是否對(duì)NPM患者的體液免疫功能產(chǎn)生影響仍值得深入研究。