芪白平肺膠囊聯(lián)合孟魯司特對慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4+、CD25+調節(jié)性T細胞表達的影響

孟 靜 曹志尉 李 娟

（南京醫(yī)科大學附屬淮安市第一人民醫(yī)院，江蘇 淮安 223300）

慢性阻塞性肺疾?。–OPD）是以持續(xù)氣流受限為特征的疾病，氣流受限不完全可逆并呈進行性發(fā)展，主要癥狀為慢性咳嗽、氣短或呼吸困難，急性加重和合并癥影響患者的整體疾病嚴重程度[1]。COPD急性加重期（AECOPD）指患者呼吸系統(tǒng)癥狀出現(xiàn)急性加重，超出日常變異需要改變藥物治療的急性起病過程，感染、炎癥細胞因子分泌失衡、免疫功能紊亂等多種因素相互作用是導致AECOPD的主要因素[2]。孟魯司特鈉為白三烯受體拮抗劑，可抑制炎性介質——白三烯達到抗炎效果，具有一定免疫調節(jié)作用，可抑制氣道炎癥及重塑，改善肺功能，為治療COPD的常用藥物[3]。芪白平肺膠囊為安徽中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院的院內制劑，功效益氣溫陽、化痰散瘀，基礎研究顯示可抑制COPD模型大鼠慢性炎癥，延緩不可逆氣流受限進程，改善肺功能[4]。筆者采用芪白平肺膠囊聯(lián)合孟魯司特鈉治療AECOPD，觀察對患者肺功能及Th17、CD4+CD25+調節(jié)性T細胞表達的影響，探討芪白平肺膠囊治療AECOPD的療效和作用機制。

1 資料與方法

1.1 病例選擇 納入標準：符合《慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）診治中國專家共識（2014年修訂版）》AECOPD 的診斷標準[5]；符合《中醫(yī)病證診斷療效標準》內喘病痰瘀阻肺的辨證分型標準[6]；年齡50～85歲，性別不限；入組前4周內未用過影響免疫功能的藥物；依從性良好，對研究知情并簽署知情同意書。排除標準：合并支氣管哮喘、肺大皰、氣胸、結核、矽肺、惡性腫瘤、自身免疫性疾病者；合并冠心病、腦卒中、嚴重腎功能障礙、凝血機制障礙者；意識不清、癡呆、精神疾病者；擬納入其他臨床研究者。

1.2 臨床資料 選取2016年1月至2017年6月在本院呼吸內科住院治療的AECOPD患者94例，采用隨機數(shù)字表法將患者隨機分為兩組各47例。兩組患者臨床資料差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組基線資料相比較

1.3 治療方法 兩組患者均按照《慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）診治中國專家共識（2014年修訂版）》[5]給予控制性氧療、解痙、平喘、、支氣管擴張、抗感染等治療，同時霧化吸入布地奈德混懸液（澳大利亞Aatrazeneca Pty Ltd），每次2 mg，每日2次。對照組給予孟魯司特鈉片（杭州默沙東制藥有限公司，國藥準字J20120072，規(guī)格：10 mg）10 mg 口服，每日 1 次，2 周為1個療程。觀察組在對照組的基礎上給予芪白平肺膠囊（安徽中醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院制劑中心，批號：20130907，藥物組成：黃芪、生曬參、川芎、薤白、葶藶子、五味子、地龍）3?？诜?，每日3次，2周為1個療程。

1.4 觀察指標 治療前后采用肺功能檢測儀檢測患者第1秒用力呼氣量 （FEV1）、用力肺活量（FVC）、FEV1占FVC的百分比（FEV1/FVC%）等肺功能指標。治療前后采用呼吸困難評分（MMRC）評定患者的呼吸困難程度，MMRC評分分0分、1分、2分、3分、4分代表無、輕度、中度、重度、極重度，得分越高呼吸困難程度越重。觀察治療前后患者的動脈血氧分壓（PaO2）和動脈血二氧化碳分壓（PaCO2）水平。治療前后抽取患者空腹靜脈血，采用流式細胞儀檢測外周血Th17、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平。

1.5 統(tǒng)計學處理 應用SPSS23.0統(tǒng)計軟件。計量資料以（±s）表示，數(shù)據(jù)呈正態(tài)分布，方差齊時采用t檢驗，方差不齊時采用校正t檢驗，計數(shù)資料采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組治療前后肺功能指標比較 見表2。兩組治療前FEV1、FVC、FEV1/FVC水平差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；兩組治療后 FEV1、FEV1/FVC 水平與治療前相比較均顯著升高（P＜0.05），且觀察組與同期對照組相比較均顯著升高 （P＜0.05）；兩組治療前后組內、組間FVC水平相比較均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

表2 兩組治療前后肺功能比較（±s）

表2 兩組治療前后肺功能比較（±s）

與本組治療前比較，*P＜0.05；與對照組治療后比較，△P＜0.05。下同

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2.2 兩組治療前后MMRC評分、PaO2和PaCO2水平比較 見表3。兩組治療前MMRC評分、PaO2和PaCO2水平相比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；兩組治療后MMRC評分和PaCO2水平均較治療前顯著降低（P＜0.05），且觀察組降低更顯著 （P＜0.05）；兩組治療后PaO2水平與治療前相比較均顯著升高（P＜0.05），且觀察組升高更顯著（P＜0.05）。

表3 兩組治療前后MMRC評分、PaO2和PaCO2水平比較（±s）

表3 兩組治療前后MMRC評分、PaO2和PaCO2水平比較（±s）

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2.3 兩組治療前后外周血 Th17、CD4CD25Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg水平相比較 見表4。兩組治療前 Th17、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg 和Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg水平相比較差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；兩組治療后 CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均較治療前顯著升高（P＜0.05），且觀察組升高更顯著 （P＜0.05）；Th17和Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg水平與治療前相比較均顯著降低 （P＜0.05），且觀察組降低更顯著（P＜0.05）。

表4 兩組治療前后外周血Th17、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg 水平比較（±s）

表4 兩組治療前后外周血Th17、CD4+CD25+Treg和CD4+CD25+Foxp3+Treg 水平比較（±s）

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3 討 論

T淋巴細胞介導的自身免疫應答在COPD的病情進展中發(fā)揮重要作用，CD4+CD25+調節(jié)性T細胞通過分泌抑炎性因子抑制自身免疫應答，Th17細胞分泌炎性因子介導自身免疫應答，Th17和CD4+CD25+調節(jié)性T細胞之間平衡被打破可導致Th1/Th2失衡和Th17過表達，導致COPD發(fā)生和病情進展[7]。活化的CD4+T細胞可分化為 Th1、Th2、Th17、Treg 等細胞，Th17 細胞可分泌IL-17A、IL-22等介導自身免疫應答，而Treg細胞則通過分泌抑制炎性細胞因子IL-10抑制自身免疫應答維持機體的免疫耐受[8]。因缺乏人Treg細胞特異性標志，目前報道中有CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25+Foxp3+等標記，轉錄因子Foxp3+主要表達于Treg細胞，對Treg的發(fā)育和維持功能具有重要意義，因此 CD4+CD25+Foxp3+可更準確反映 Treg 比例[9]。本研究結果顯示，治療前CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg處于較低水平，Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg處于較高水平，結果提示，AECOPD患者存在Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg水平失衡。王成陽等研究顯示，COPD患者外周血存在 CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞數(shù)目降低，且CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg表達功能出現(xiàn)失衡，使得Treg的免疫抑制功能降低，失去對Th17的抑制作用，Th17細胞可通過招募Th1細胞或向Th1細胞轉化，導致Th1/Th2失衡，促進COPD炎癥反應發(fā)生[10]。張?zhí)戾龅日J為AECOPD患者CD4+CD25+Treg細胞表達減少，對炎性反應的抑制作用降低，機體更易于發(fā)生病理性免疫應答，導致炎癥反應加重和CD4+T細胞活化和增殖，產(chǎn)生Th2型細胞因子，增加IL-4和IL-5等分泌，引起IgE增加，嗜酸性粒細胞數(shù)量和活性增加，氣道平滑肌痙攣收縮，COPD發(fā)作程度增加。綜合本研究及相關研究報道，我們認為增加CD4+CD25+Foxp3+Treg表達水平可能成為AECOPD治療的新靶點[11]。

中醫(yī)無AECOPD之病名，多根據(jù)其臨床癥狀將其歸于“咳嗽”“喘病”“肺張”等范疇[12]，認為慢性肺系疾病經(jīng)久不愈，反復發(fā)作，致肺、脾、腎虧虛，津液運化失調，為痰為飲，血行澀滯而瘀，本病總為本虛標實之證，本虛為肺、脾、腎臟之虛，標實為痰濁瘀血停留，痰瘀阻肺致肺氣壅滯、肺失通降，緩解期以虛為主，發(fā)作期以實為主，因此痰瘀阻肺為AECOPD的重要證型[13]。芪白平肺膠囊由黃芪、生曬參、川芎、薤白、葶藶子、五味子、地龍組成，方中黃芪補脾肺之氣，生曬參益脾肺補元氣，川芎活血行氣，瘀去則血行，薤白理氣通陽，葶藶子瀉肺平喘，行水消腫，五味子上斂肺氣、下滋腎陰，地龍清肺定喘、通行經(jīng)絡，諸藥合用共奏益氣溫陽、消痰散瘀、標本兼治之功效[14]。姜輝等研究顯示，COPD大鼠模型CD4+CD25+Foxp3+Treg水平較正常對照組顯著降低，給予芪白平肺膠囊可上調CD4+CD25+Foxp3+Treg 水平，改善 Treg 細胞功能[15]。

本研究結果表明，治療后觀察組FEV1、FEV1/FVC、PaO2、CD4+CD25+Treg、CD4+CD25+Foxp3+Treg 水平均高于對照組，MMRC評分、PaCO2、Th17和 Th17/CD4+CD25+Foxp3+Treg水平均低于對照組。提示芪白平肺膠囊聯(lián)合孟魯司特可改善AECOPD患者肺功能，提高血氧飽和度，下調Th17表達和上調CD4+CD25+Foxp3+Treg表達可能是其重要作用機制，結果與姜輝等[14]基礎研究結論相符。