食品微生物檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定方法的效果分析

王春林

目的：食品微生物檢驗(yàn)菌落總數(shù)測(cè)定方法的效果分析。方法：現(xiàn)選取2016年5月- 2016年6月需要進(jìn)行菌落總數(shù)檢測(cè)食品樣本共60例作為調(diào)查對(duì)象，對(duì)其分別采取瓊脂傾注TTC平板法、計(jì)數(shù)瓊脂平板法、測(cè)試片法進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)比分析這三種方法的檢出率。結(jié)果：進(jìn)行菌落總數(shù)檢的60例樣本中，經(jīng)過檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果為：測(cè)試片法檢出數(shù)為2、檢出率為3.33%；計(jì)數(shù)瓊脂平板法檢出數(shù)為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數(shù)為19、檢出率為31.66%，經(jīng)對(duì)比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數(shù)檢出率高于計(jì)數(shù)瓊脂平板法、測(cè)試片法，組間差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：在食品微生物檢驗(yàn)菌落總數(shù)中可采取瓊脂傾注TTC平板法，檢出率較高，值得推廣和應(yīng)用。

隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展和提高，廣大的人們?nèi)罕娫絹碓街匾暽睿绕涫鞘称沸l(wèi)生這一塊，而且食品是否衛(wèi)生、安全，這也直接的關(guān)乎了人們?nèi)罕姷纳眢w健康，因此國家的有關(guān)部門，對(duì)食品安全生產(chǎn)采取了大力的監(jiān)管，而在辨別食品是否衛(wèi)生中，對(duì)其進(jìn)行微生物菌落總數(shù)檢驗(yàn)中一個(gè)重要的有效途徑，在檢驗(yàn)的過程中應(yīng)采取準(zhǔn)確、有效微生物的檢驗(yàn)辦法，并將可靠、安全食品的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行有效的制定，是在飲食安全的保障中是基本的措施以及重要的方式，其總菌落數(shù)能夠直接反映出食物加工的衛(wèi)生整體的情況，而且具備準(zhǔn)確性高、檢驗(yàn)快速等優(yōu)點(diǎn)，可以直接作為檢驗(yàn)食品衛(wèi)生結(jié)果獨(dú)立性的指標(biāo)，為了探討直接有效的檢測(cè)方法，特此選取瓊脂平板法、計(jì)數(shù)瓊脂平板法、測(cè)試片法進(jìn)行分別的檢測(cè)，詳情如下。

資料和方法

資料?，F(xiàn)選取2016年5月- 2016年6月需要進(jìn)行菌落總數(shù)檢測(cè)食品樣本共60例作為調(diào)查對(duì)象，以上60例樣本由五個(gè)食品加工提供。

方法。

（1）測(cè)試片檢測(cè)法，檢測(cè)方式為：（1）檢測(cè)材料以完全符合美國：AOAC O- MA的標(biāo)準(zhǔn)以及中國 SN/T 1897- 2007的標(biāo)準(zhǔn)，為986.33/989.10/990.12；（2）檢測(cè)方法為：將2個(gè)- 3個(gè)樣本稀釋后，將其滴入在測(cè)試紙片上，位置為中央處，將其靜置5/min，使用顯微鏡進(jìn)行觀察并計(jì)數(shù)，在操作中要對(duì)薄膜的按壓力度進(jìn)行控制、保證操作臺(tái)面水平以及操作全程的無菌性。

（2）計(jì)數(shù)瓊脂平板檢測(cè)法，檢測(cè)方式為：（1）檢測(cè)材料：計(jì)數(shù)用的瓊脂培養(yǎng)基PCA為250g ；（2）檢測(cè)方法為：在對(duì)樣本進(jìn)行測(cè)試之前，將在試驗(yàn)中所使用的耗材、容器、吸管進(jìn)行消毒，能夠確定試驗(yàn)所用的產(chǎn)品等的無菌性，進(jìn)行瓊脂培養(yǎng)基的制作，將待測(cè)試的樣本取出，在樣本中滴入無菌磷酸緩沖液，將其充分的混勻后，按梯度稀釋成十倍、百倍、千倍、萬倍樣本均液，選出2個(gè)- 3個(gè)適用于計(jì)數(shù)的稀釋濃度樣本液選出，將其接種到無菌瓊脂培養(yǎng)皿中進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，取磷酸緩沖液進(jìn)行對(duì)照接種，其培養(yǎng)條件為36度左右，其培養(yǎng)時(shí)間為48±2小時(shí)，在進(jìn)行菌落換算、計(jì)數(shù)中，應(yīng)依據(jù)GB4789.1- 2010的規(guī)定進(jìn)行。

（3）瓊脂傾注TTC平板檢測(cè)法：檢測(cè)方式為：（1）檢測(cè)材料：將TTC添加至PCA中，其培養(yǎng)基中的TTC濃度是0.005%；（2）檢測(cè)方法為：在對(duì)樣本進(jìn)行測(cè)試之前，將在試驗(yàn)中所使用的耗材、容器、吸管進(jìn)行消毒，能夠確定試驗(yàn)所用的產(chǎn)品等的無菌性，進(jìn)行瓊脂培養(yǎng)基的制作，將待測(cè)試的樣本取出，在樣本中滴入無菌磷酸緩沖液，將其充分的混勻后，按梯度稀釋成十倍、百倍、千倍、萬倍樣本均液，選出2個(gè)- 3個(gè)適用于計(jì)數(shù)的稀釋濃度樣本液選出，將其接種到無菌瓊脂培養(yǎng)皿中進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，取磷酸緩沖液進(jìn)行對(duì)照接種，其培養(yǎng)條件為36度左右，其培養(yǎng)時(shí)間為48±2小時(shí)，將TTC加入到瓊脂培養(yǎng)中，觀察其顯色反應(yīng)，在進(jìn)行菌落換算、計(jì)數(shù)中，應(yīng)依據(jù)GB4789.1-2010的規(guī)定進(jìn)行。

指標(biāo)觀察。

（1）觀察菌落總檢出數(shù)：嚴(yán)格按照檢測(cè)方式的計(jì)數(shù)方法對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，其計(jì)數(shù)要求為CFU每個(gè)/g，其納入計(jì)數(shù)菌落的種類遵照GB4789.1- 2010的要求進(jìn)行納入，其中包含霉菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、艾希大腸桿菌等等的病原菌。

（2）菌落總數(shù)的超標(biāo)率為：參照國標(biāo)GB4789.1- 2010內(nèi)總菌落數(shù)超標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)與本次檢測(cè)樣本的總菌落數(shù)進(jìn)行對(duì)比，樣本以檢驗(yàn)總菌落數(shù)超過1500個(gè)/g，為超標(biāo)的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。本次調(diào)查中涉及60例樣本的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料應(yīng)用n（%）描述，計(jì)量資料應(yīng)用（ 士s）描述，組間經(jīng)t和x2檢驗(yàn)，差異在P<0.05時(shí)，存在臨床可比意義。

結(jié)果

進(jìn)行菌落總數(shù)檢的60例樣本中，經(jīng)過檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果為：測(cè)試片法檢出數(shù)為2、檢出率為3.33%；計(jì)數(shù)瓊脂平板法檢出數(shù)為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數(shù)為19、檢出率為31.66%，經(jīng)對(duì)比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數(shù)檢出率高于計(jì)數(shù)瓊脂平板法、測(cè)試片法，組間差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表1。

討論

隨著近年來食品安全問題的頻繁發(fā)生，引起了大家的廣泛關(guān)注，在食品加工中，常見的病原菌如沙門氏菌、大腸桿菌將會(huì)引起傳染性的疾病，導(dǎo)致食用者的生體遭到危害，因此對(duì)食品加工進(jìn)行有效、準(zhǔn)確性高的微生物檢測(cè)是至關(guān)重要的，有效的微生物檢測(cè)是保證食物安全的前提，其中總菌落數(shù)在食品質(zhì)量評(píng)價(jià)中必不可少的重要指標(biāo)，在總菌落數(shù)的檢測(cè)中，常見的檢測(cè)方法為CAP、TP，這兩種檢測(cè)方法在樣本因素如固體殘?jiān)㈩w粒物、計(jì)數(shù)精度的影響下，將直接影響到檢測(cè)的靈敏度，因此在本次調(diào)查中采取了TTC檢測(cè)方法，TTC指示劑的靈敏度較高，能夠特異性的染色細(xì)菌，檢測(cè)人員對(duì)染色菌落數(shù)進(jìn)行準(zhǔn)確、直觀的統(tǒng)計(jì)，并且可以將雜質(zhì)干擾進(jìn)行排除，且檢出率較高。在本次調(diào)查中發(fā)現(xiàn)進(jìn)行菌落總數(shù)檢的60例樣本中，經(jīng)過檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果為：測(cè)試片法檢出數(shù)為2、檢出率為3.33%；計(jì)數(shù)瓊脂平板法檢出數(shù)為7、檢出率為11.66%；瓊脂傾注TTC平板法檢出數(shù)為19、檢出率為31.66%，經(jīng)對(duì)比，瓊脂傾注TTC平板法總菌落數(shù)檢出率高于計(jì)數(shù)瓊脂平板法、測(cè)試片法，組間差異明顯，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

綜上所述，在食品微生物檢驗(yàn)菌落總數(shù)中可采取瓊脂傾注TTC平板法，檢出率較高，值得推廣和應(yīng)用。