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    超高效液相色譜快速測(cè)定飲料中的食品添加劑

    2018-07-06 17:37:30房磊
    食品界 2018年6期
    關(guān)鍵詞:苯甲酸色譜法羥基

    房磊

    在飲料中使用食品添加劑,可以改善口感和色澤、延長(zhǎng)保質(zhì)期,但是一些食品添加劑用量過(guò)高時(shí),會(huì)危害人體健康,如苯甲酸、阿斯巴甜、靛藍(lán)等,所以便需要對(duì)其含量進(jìn)行準(zhǔn)確測(cè)量。通常情況下,飲料中的食品添加劑種類(lèi)不止一種,單個(gè)測(cè)定效率較低、成本較高,并且色譜操作條件相同時(shí),容易造成測(cè)定誤差,而使用超高效液相色譜法可有效解決上述問(wèn)題。

    超高效液相色譜法特點(diǎn)

    超高效液相色譜法是在高效液色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展而來(lái)的,兩者原理基本相同,主要具備以下特點(diǎn)。第一,液體形態(tài)的流動(dòng)相,會(huì)受到較大阻力,為使其能夠順利流經(jīng)色譜柱,需施加高壓。第二,在高壓作用下,流動(dòng)相會(huì)以較高速度流動(dòng),可大大縮短分析時(shí)間,大大提高了測(cè)定效率。第三,相較于氣相色譜和工業(yè)精餾塔,該方法具有較高的分離效能,可根據(jù)實(shí)際情況選用固定性或流動(dòng)性。第四,靈敏度較高,紫外檢測(cè)器可達(dá)0.01ng,進(jìn)樣可精確到μL單位。第五,分離分析有機(jī)化合物時(shí),超過(guò)70%的都可采用該方法,適用范圍較廣,在大分子、高沸點(diǎn)、強(qiáng)極性等化合物中應(yīng)用效果良好。

    實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及操作

    選取某超市在售的果汁、碳酸飲料、含乳飲料、茶飲料四種飲料作為實(shí)驗(yàn)樣品,所用試劑包括甲醇、甲酸、乙酸、乙腈,均為色譜純,所用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心提供,質(zhì)量濃度為1mg/mL,實(shí)驗(yàn)用水為超純水。實(shí)驗(yàn)所用到的儀器設(shè)設(shè)備主要包括配有二極管陣列檢測(cè)器和Empower2色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)的超高效液相色譜儀、渦旋混合器、高速離心機(jī),型號(hào)分別為ACQUITY UPLC、XH—C和3—18K。在50mL的燒杯中加入25mg標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),滴加適量甲醇—水配置標(biāo)準(zhǔn)溶液,質(zhì)量濃度為50μg/mL,用容量瓶保存至陰涼處,使用前對(duì)其進(jìn)行稀釋操作,稀釋后標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度分別為50、10.5、1、0.1μg/mL。取四種樣品飲料各5g,在50mL燒杯中與5mL甲醇混合均勻,加入適量水搖勻、渦漩混合2min。取出定溶液進(jìn)行離心操作,離心時(shí)間和轉(zhuǎn)速分別為5min和6000r/min,再用微孔濾膜對(duì)上層清液進(jìn)行過(guò)濾。色譜條件為XBridge Peptide BEH C18色譜柱,溫度為50℃,流動(dòng)相分別為甲醇和乙酸銨溶液,后者質(zhì)量濃度為20mmol/L,速度大小為0.6mL/min,并科學(xué)設(shè)定流動(dòng)性梯度,進(jìn)樣量為5μL。掃描檢測(cè)波長(zhǎng)時(shí),具體范圍為200~500nm。實(shí)際操作時(shí),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度高低,依次完成各種食品添加的測(cè)定,確定其保留時(shí)間長(zhǎng)短和檢測(cè)波長(zhǎng)大小,然后提取對(duì)應(yīng)色譜圖,并根據(jù)不同組分所對(duì)應(yīng)的峰面積,用標(biāo)準(zhǔn)曲線將其質(zhì)量濃度表示出來(lái),完成對(duì)各種食品添加劑的光譜圖定性和峰面積定量操作。所選飲料樣品中,苯甲酸、安賽蜜、檸檬黃、山梨酸、糖精鈉、脫氫乙酸、胭脂紅、莧菜紅、咖啡因、日落黃、誘惑紅、亮藍(lán)、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯的檢測(cè)波長(zhǎng)分別為230、230、410、230、230、230、410、410、230、410、410、410、256、256、256、256。

    實(shí)驗(yàn)結(jié)果討論

    按照所設(shè)定的條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn),可以在5.5min內(nèi)實(shí)現(xiàn)試驗(yàn)樣品中多種食品添加劑的良好分析,每次進(jìn)樣時(shí)間約為8min。每個(gè)組分所對(duì)應(yīng)的紫外光譜圖,需先在色譜柱上分析,然后經(jīng)二極管陣列檢測(cè)器掃描檢測(cè)后獲取,以此作為依據(jù)可知,波長(zhǎng)為230nm、256nm和410nm時(shí),所能檢測(cè)出的食品添加劑分別為苯甲酸、安賽蜜、糖精鈉、山梨酸、脫氫乙酸和咖啡因;對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸乙酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、對(duì)羥基苯甲酸丁酯;誘惑紅、胭脂紅、莧菜紅、檬黃、日落黃、亮藍(lán)。根據(jù)各種食品添加劑的水溶性個(gè)脂溶性特點(diǎn),可利用甲醇進(jìn)行提取,其濃度為10%高速,經(jīng)高速分離后所得上清液較為澄清,經(jīng)過(guò)濾后再對(duì)其測(cè)定不會(huì)堵塞色譜柱。按照標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定方法,進(jìn)行多次回收率實(shí)驗(yàn),食品添加劑加標(biāo)量分別為5、10、20mg/kg,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為91.5%~100.2%,表明該測(cè)定方法加標(biāo)回收率較高。然后再進(jìn)行精密度實(shí)驗(yàn),平行測(cè)定加標(biāo)量為5mg/kg的樣品,實(shí)驗(yàn)次數(shù)為6次,可得最終精密度結(jié)果為0.65%~2.21%,表明該測(cè)定方法有著良好的精密度。最后,根據(jù)所得各種食品添加劑色譜柱峰面積大小,對(duì)其進(jìn)行線性回歸,可以發(fā)現(xiàn)此次實(shí)驗(yàn)所設(shè)定多種質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)液,其相關(guān)系數(shù)均超過(guò)了0.999,證明在此范圍內(nèi)各種食品添加劑具有良好的分線性關(guān)系。

    采用超高效液相色譜法,可同時(shí)測(cè)定飲料中的多種食品添加劑含量,具有測(cè)定精準(zhǔn)度高、測(cè)定效率快、測(cè)定成本低等優(yōu)點(diǎn),改善了原有測(cè)定方法的不足,在飲料食品添加劑測(cè)定方面有著寬闊的應(yīng)用前景,值得推廣。

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