離子色譜法測定蜂蜜中麥芽糖含量

鄧偉恒 吳國輝 王柳玲 吳俊發(fā)

蜂蜜富含多種營養(yǎng)物質(zhì)，風(fēng)味獨(dú)特，有較高的營養(yǎng)價(jià)值。我國是蜜生產(chǎn)、消費(fèi)和出口大國。蜂蜜種類繁多，成分復(fù)雜，很容易造假摻假。其中一種蜂蜜的摻假方式，就是以麥芽糖為摻假物加入到蜂蜜中。

目前，檢測蜂蜜中糖的含量主要采用國標(biāo)GB 5009.8- 2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定》第一法高效液相色譜法進(jìn)行檢測，采用示差折光檢測器，外標(biāo)法進(jìn)行定量。當(dāng)利用此法對一個(gè)含有多種二糖成分的蜂蜜作麥芽糖檢測時(shí)，其麥芽糖色譜峰會(huì)與其他二糖色譜峰相連或重疊，對實(shí)際麥芽糖含量的檢測準(zhǔn)確度造成了影響。另外，也有文獻(xiàn)提出利用高效液相色譜儀連接熒光檢測器對蜂蜜的還原糖作檢測。通過衍生化使還原糖獲得熒光基團(tuán)從而通過熒光檢測器檢測。該方法的優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高、選擇性高等優(yōu)點(diǎn)。但是同時(shí)也有衍生化等的操作，較為繁瑣，不利于檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)大批量檢測。

近紅外反射光譜是一種快速無損檢測方法，通過儀器對樣品進(jìn)行檢測，獲得光譜數(shù)據(jù)，對數(shù)據(jù)進(jìn)行一系列的處理計(jì)算比對從而判定蜂蜜是否有添加麥芽糖摻假。此方法實(shí)驗(yàn)前需對光譜進(jìn)行處理，建立穩(wěn)定可靠的模型，但同時(shí)也不能準(zhǔn)確定量，不同源的蜂蜜需各自完成定量校正分析。方法并不完善。

此外，蜂蜜的糖類檢測還有氣質(zhì)聯(lián)用法、高效毛細(xì)管電泳法、核磁共振法等。但這些方法都有儀器昂貴，操作復(fù)雜繁瑣的缺點(diǎn)，同樣不適宜實(shí)驗(yàn)室大批量檢測。

采用離子色譜法對蜂蜜中的糖類進(jìn)行檢測。解決部分含多種二糖的蜂蜜樣品在使用國標(biāo)高效液相色譜法檢測麥芽糖時(shí)可能出現(xiàn)的麥芽糖峰與其他非目標(biāo)峰分離度不足的問題，準(zhǔn)確測定麥芽糖的含量。該方法簡單快捷，無需衍生，各種糖目標(biāo)峰分離清晰，靈敏度高，結(jié)果穩(wěn)定。

實(shí)驗(yàn)部分

液相色譜法。

麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)峰出現(xiàn)在9.2分鐘處。在樣品圖中，麥芽糖峰附近，都有非目標(biāo)峰的出現(xiàn)，對麥芽糖的定量造成一定干擾。而示差檢測器基于本身工作原理，無法對目標(biāo)峰進(jìn)行定性，所以會(huì)對測定麥芽糖的結(jié)果帶來一定的影響。

離子色譜法。

（1）儀器與試劑

離子色譜儀（戴安Dionex ICS- 5000）配備脈沖安培檢測器；

Milli- Q去離子水發(fā)生器（美國Millipore公司）

麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)品來（Dr. E hrenstorfer GmbH）

淋洗液乙酸鈉和氫氧化鈉（戴安）

蜂蜜樣品來自于市場購買。

（2）樣品處理

稱取蜂蜜樣品1g于250mL容量瓶中，加入50mL去離子水，溶解均勻，加水定容。過0.22μm水相濾膜后使用離子色譜儀分析。

（3）離子色譜條件

色譜柱：Carbodac PA1柱（4 mm × 250 mm ）；

柱溫：30 ℃；進(jìn)樣體積：10 μL；流速：1.2 mL/min；

參考電極：pH/AgCl（AgCl mode）

淋洗液：A為H2O，B為 氫氧化鈉溶液（150mmol/L），C為乙酸鈉（500mmol/L）氫氧化鈉（150mmol/L）混合溶液；

方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線。用去離子水配制麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。以分析物的峰面積（y）和對應(yīng)的質(zhì)量濃度（x，mg/L）進(jìn)行線性回歸計(jì)算，得到線性方程和相關(guān)系數(shù)（見表2）。線性范圍5.0～ 100 mg/L之間。麥芽糖在線性范圍內(nèi)，有良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù)R大于0.999）。

檢出限與定量限。根據(jù)儀器的檢出限（LOD，S/N= 3）及定量限（LOQ，S/ N=10），結(jié)合樣品的前處理過程，計(jì)算得到麥芽糖的檢出限在 g/100g，定量限為g/100g（見表2），表明方法具有較高的靈敏度。

加標(biāo)回收率和精密度。為驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度，按本實(shí)驗(yàn)方法對樣品進(jìn)行了0.5 g/100g、1.0 g/100g和2.0 g/100g三個(gè)水平的加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)（n=6）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3，麥芽糖的回收率在95.3% ～ 101%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=6）3.6%，方法顯示了良好的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。（表3）

實(shí)際樣品分析。本次選取5個(gè)麥芽糖陽性樣品，通過同時(shí)用離子色譜法和國標(biāo)方法（液相色譜法）完成麥芽糖含量的測定，作出比較。（表4）

離子色譜法提供了一個(gè)方便快捷的檢測蜂蜜中麥芽糖的方法，解決了液相色譜法可能帶來的測定影響，更能準(zhǔn)確測定蜂蜜中麥芽糖的含量，同時(shí)也能對蜂蜜主要成分果糖和葡萄糖進(jìn)行定量檢測，適合商品檢測實(shí)驗(yàn)室用來作為一個(gè)輔助方法對部分使用國標(biāo)檢測方法不能準(zhǔn)確檢測麥芽糖含量蜂蜜樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，得出數(shù)據(jù)作為參考。