100%二甲基聚硅氧烷固定相檢測(cè)維生素E粉方法的探索

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(新昌和寶生物科技有限公司，浙江 新昌 312500)

維生素E(Vitamin E)是一種脂溶性維生素，其水解產(chǎn)物為生育酚，是最主要的抗氧化劑之一。由于不溶于水，常以油劑狀態(tài)存在。而維生素E粉由于E的含量低，作為畜禽飼料添加劑，常以粉劑狀態(tài)存在。

維生素E含量的測(cè)定[1]與維生素E粉含量的測(cè)定[2]，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)均用氣相法測(cè)定，但檢測(cè)條件與所用的試劑濃度都有差異，前者采用100%二甲基聚硅氧烷作為固定相，后者采用甲基硅橡膠作為固定相，在實(shí)際工作中常導(dǎo)致檢測(cè)中操作的重復(fù)與試劑與儀器的浪費(fèi)。本文嘗試國(guó)標(biāo)檢測(cè)維生素E含量的100%二甲基聚硅氧烷作為固定相方法來(lái)檢測(cè)維生素E粉的含量，以便在實(shí)際工作中兩者方法的統(tǒng)一。

1 材料與方法

1.1儀器與試藥

1.1.1儀器 Agilent 7890氣相色譜儀；METTLER XS-105型分析天平。

1.1.2試藥 維生素E對(duì)照品(含量99.7%，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，批號(hào)為H170302)；維生素E粉(新昌和寶生物科技有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為20171203-1)，維生素E(新和成股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為171003)。

1.2方法

1.2.1色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以100%二甲基聚硅氧烷為固定相，柱溫280℃，進(jìn)樣器溫度300℃，檢測(cè)器溫度290℃，理論塔板數(shù)按維生素E計(jì)算不低于5000，維生素E峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的分離度應(yīng)大于2。

1.2.2內(nèi)標(biāo)溶液配制 精密稱(chēng)取正三十二烷2.0 g至1000 mL容量瓶中，加正己烷溶解并稀釋至刻度，濃度為2 mg/mL，搖勻后備用(其中維生素E粉的國(guó)標(biāo)為1 mg/mL，其中維生素E的國(guó)標(biāo)為5 mg/mL)。

1.2.3供試液配制 精密稱(chēng)取維生素E粉約0.08 g(約相當(dāng)于維生素E 40 mg)，置棕色具塞錐形瓶中，加入鹽酸溶液10 mL，在70℃超聲溶解20 min，加入無(wú)水乙醇10 mL，并精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10 mL，密塞，充分混合30 min后，分層，取上清液。

精密稱(chēng)取維生素E約0.04 g，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10 mL，密塞，振搖使溶解。

1.2.4對(duì)照品溶液配制 精密稱(chēng)取維生素E對(duì)照品約0.04 g，置棕色具塞錐形瓶中，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10 mL，密塞，振搖使溶解。

1.2.5樣品分析 精密量取供試液和對(duì)照溶液各1 μL注入氣相色譜儀，分別連續(xù)進(jìn)樣5次，按峰面積計(jì)算校正因子,并用其平均值計(jì)算試樣中維生素E的含量。

維生素E的含量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)表示：

f：維生素E的質(zhì)量校正因子；

A1：標(biāo)準(zhǔn)溶液中內(nèi)標(biāo)物的峰面積；

A2：標(biāo)準(zhǔn)溶液中維生素E對(duì)照品的峰面積；

A3：樣品溶液中維生素E的峰面積；

A4：樣品溶液中內(nèi)標(biāo)物的峰面積；

M1：標(biāo)準(zhǔn)溶液中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量，g；

M2：標(biāo)準(zhǔn)溶液中維生素E對(duì)照品的質(zhì)量,g;

M3：樣品溶液中維生素E的質(zhì)量,g;

M4：樣品溶液中內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量,g。

兩種方法的檢測(cè)條件見(jiàn)表1。

表1 兩種方法檢測(cè)條件比較

1.2.6回收率試驗(yàn) 取171003批維生素E樣品約40 mg，置50 mL的量瓶中，加白炭黑40 mg,加入鹽酸溶液10 mL，在70℃超聲溶解20 min，加入無(wú)水乙醇10 mL，并精密加入內(nèi)標(biāo)溶液10 mL，密塞，充分混合30 min后，分層，取上清液，根據(jù)本法計(jì)算測(cè)定含量，并折算成重量。

2 結(jié)果

2.1100%二甲基聚硅氧烷與甲基硅橡膠檢測(cè)法結(jié)果比較 采用100%二甲基聚硅氧烷作為固定相檢測(cè)方法，其結(jié)果與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)比較，見(jiàn)表2。

表2 本法檢測(cè)結(jié)果與國(guó)標(biāo)的比較

由表2可知：檢測(cè)維生素E的含量，三個(gè)批次與樣品標(biāo)定含量基本一致；檢測(cè)維生素E粉，與原甲基硅橡膠作為固定相的方法比較，結(jié)果也完全相同，且可以少用試劑，又能與維生素E檢測(cè)時(shí)共用對(duì)照與內(nèi)標(biāo)溶液，共用色譜柱，不用經(jīng)常更換與購(gòu)買(mǎi)試劑，節(jié)約人工與設(shè)備。

2.2回收率 采用100%二甲基聚硅氧烷作為固定相，回收率試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。平均回收率100.3%，RSD為0.25%。

表3 回收率結(jié)果

由表3可知，采用該方法具有良好的回收率。

3 結(jié)論

用100%二甲基聚硅氧烷作為固定相測(cè)定維生素E粉含量，與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法比較，結(jié)果完全一致。說(shuō)明該方法可行，具有簡(jiǎn)便、快速，結(jié)果更準(zhǔn)確穩(wěn)定，減少儀器損耗、節(jié)省時(shí)間、節(jié)約試劑與標(biāo)準(zhǔn)品等檢測(cè)成本的優(yōu)點(diǎn)。該研究結(jié)果可供生產(chǎn)同類(lèi)產(chǎn)品的企業(yè)與國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的改版作為參考。

[1] 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 9454-2008 飼料添加劑 維生素E[S].

[2] 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 7293-2006 飼料添加劑 維生素E粉[S].