不同藥劑對加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病帶菌種子處理的影響

何 偉，楊 華，許建軍*，孫曉軍，何振杰

（1.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，新疆 烏魯木齊 830091；2.裕民縣農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，新疆 裕民 834800）

新疆是我國最大的加工番茄生產(chǎn)區(qū)，常年種植面積和產(chǎn)量均占國內(nèi)生產(chǎn)的90%以上，2017年加工番茄播種面積達(dá)6.468萬hm2。據(jù)調(diào)查，目前番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病是新疆加工番茄上發(fā)生較嚴(yán)重的病害之一，重病田發(fā)病率達(dá)100%，產(chǎn)量損失達(dá)10%～30%，造成極大的經(jīng)濟(jì)損失。研究者報(bào)道了加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病病原鑒定及防治方法，如王曉輝等[1-2]對新疆加工番茄細(xì)菌斑點(diǎn)病原進(jìn)行了鑒定，并對部分栽培品種進(jìn)行了抗病性鑒定，韓盛等[3-4]分別篩選了防治加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病的藥劑。據(jù)研究報(bào)道，種子帶菌是此病害田間主要初侵染源之一[5]，也是遠(yuǎn)距離傳播的唯一途徑[6]，因而種子處理是防治番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病發(fā)生最直接、有效的方法。因此，于2017年采用不同種子處理方法對加工番茄種子攜帶細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌的消毒效果進(jìn)行了研究，擬篩選出最佳消毒藥劑，從源頭上杜絕番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病的發(fā)生，以期為其防治提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試材料

供試品種：番茄品種為新番9號(hào)（由新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝作物研究所提供），供試培養(yǎng)基為KB（肉汁凍）培養(yǎng)基。

供試菌種：番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)?。≒ST）菌種由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所趙廷昌提供。挑取番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病病菌，并用KB培養(yǎng)基置于23～25 ℃下培養(yǎng)72 h，用玻璃刮鏟刮下并配制成濃度為2×108cfu/mL的菌液，將10 g加工番茄種子在10 mL菌液中浸泡30 min，風(fēng)干后備用。

供試試劑：冰乙酸溶液、次氯酸鈉溶液、醋酸溶液、高錳酸鉀溶液、硫酸銅溶液、40%甲醛溶液[7-8]、72%農(nóng)用鏈霉素可溶性粉劑、0.3%四霉素水劑、30%琥膠肥酸銅可濕性粉劑。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)處理

處理1：2%冰乙酸溶液浸種60 min；處理2：3%冰乙酸溶液浸種60 min；處理3：4%冰乙酸浸種60 min；處理4：1%次氯酸鈉浸種60 min；處理5：3%次氯酸鈉浸種30 min；處理6：5%次氯酸鈉浸種10 min；處理7：0.8%醋酸溶液浸種120 min；處理8：0.6%醋酸溶液浸種120 min；處理9：1%高錳酸鉀溶液浸種20 min；處理10：40%甲醛150倍液浸種30 min；處理11：0.1%硫酸銅溶液浸種15 min；處理12：72%農(nóng)用鏈霉素200倍液浸種60 min；處理13：0.3%四霉素水劑200倍液浸種60 min；處理14：30%琥膠肥酸銅200倍液浸種60 min；對照（CK）：無菌水浸種30 min。經(jīng)以上各處理藥劑浸種后，用無菌水沖洗干凈備用。

1.2.2 消毒種子帶菌檢測

將經(jīng)各處理消毒的種子各取300粒，放入滅菌的100 mL錐形瓶中，加入50 mL無菌水充分振蕩60 min，吸取種子浸提液的懸浮液200 μL，并將其均勻涂抹在直徑為9 cm的KB平板上，重復(fù)3次，相同操作條件下設(shè)無菌水為空白對照，放入23 ℃恒溫箱中黑暗條件下培養(yǎng)3～5 d后觀察，記錄培養(yǎng)皿中菌落出現(xiàn)情況，同時(shí)計(jì)算孢子負(fù)荷量[9]。孢子負(fù)荷量及分離頻率公式為：

1.2.3 不同藥劑處理對番茄種子發(fā)芽的影響

參照方中達(dá)[10]的發(fā)芽試驗(yàn)方法，將加工番茄帶菌種子進(jìn)行浸泡處理，處理完成后，用清水沖洗30 min，處理后的種子分別置于消毒的培養(yǎng)皿內(nèi)，每個(gè)培養(yǎng)皿內(nèi)放吸水紙1張，每個(gè)處理設(shè)3次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)30粒種子。從處理2 d后開始調(diào)查，直至處理后12 d，調(diào)查指標(biāo)包括種子的發(fā)芽數(shù)、芽長、根長及鮮質(zhì)量，計(jì)算發(fā)芽率和發(fā)芽勢。發(fā)芽勢為第6天種子正常發(fā)芽種子數(shù)占供試種子數(shù)的百分率。公式：

2 結(jié)果與分析

2.1 不同藥劑處理消毒效果

由表1可知：14個(gè)藥劑處理對加工番茄種子細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌的消毒效果均優(yōu)于對照，且均達(dá)到極顯著差異水平。其中，處理6與處理14處理效果最好，且兩者之間沒有顯著性差異，帶菌率分別為3.67%、3.33%，而對照帶菌率為99.67%；相對來說，處理14的消毒效果優(yōu)于處理6，且處理6的孢子負(fù)荷量為1.11個(gè)/粒，處理14的孢子負(fù)荷量為2.78個(gè)/粒。其次是處理11、處理2、處理7和處理9，帶菌率分別為4.67%、4.67%、5.11%和5.12%，且處理11與處理2、處理7與處理9之間沒有顯著性差異；其孢子負(fù)荷量分別為3.89、3.89、4.44、4.72個(gè)/粒。

2.2 不同處理對種子發(fā)芽的影響

由表2可知：在發(fā)芽率方面，14個(gè)處理對加工番茄種子發(fā)芽率均有一定的影響。處理1、處理13發(fā)芽率最高，且均與對照沒有顯著性差異，且兩者之間差異未達(dá)到顯著水平，發(fā)芽率分別為93.33%、94.44%。其次為處理9、處理14和處理10，發(fā)芽率分別為91.56%、91.11%、90.44%，且三者之間沒有顯著性差異，但均與對照有極顯著性差異。其余處理均與對照之間存在極顯著性差異，且處理7的發(fā)芽率最低，為54.44%，說明其對發(fā)芽率影響較大。綜上可知，處理1、處理13對種子發(fā)芽率影響最小；處理9、處理14和處理10次之，其余處理影響較大。

在處理6 d后種子芽長方面，處理4、處理1和處理5的芽較長，分別為3.86、3.85、3.82 cm，極顯著大于對照，且三者之間沒有顯著性差異；其次是處理9、處理2和處理3，均與對照無顯著性差異；其余處理均極顯著低于對照。在處理6 d后種子根長方面，除處理11、處理14、處理12、處理8外，其余處理均顯著高于對照，且處理2、處理3、處理1、處理4和處理9較長，分別為3.37、3.30、3.24、3.24、3.21 cm。在發(fā)芽勢方面，處理9、處理13、處理1的發(fā)芽勢較高，分別為83.33%、82.22%、81.11%，三者間無顯著性差異，且均與對照差異未達(dá)顯著水平；其次是處理14、處理2、處理10，分別為78.89%、76.67%、75.56%，且均顯著低于對照；其余8個(gè)處理均顯著低于對照。在12 d后芽鮮質(zhì)量方面，在14個(gè)處理中，僅處理9、處理14、處理11極顯著高于對照，分別為0.036、0.035、0.034 g/株，且三者間差異未達(dá)顯著性差異水平。

表1 不同處理對加工番茄種子細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌消毒效果

表2 不同消毒處理藥劑和方法對加工番茄種子發(fā)芽的影響

3 結(jié)論與討論

3.1 種子消毒效果

試驗(yàn)結(jié)果以30%琥膠肥酸銅200倍液浸種60 min的處理消毒效果最好，其次是5%次氯酸鈉溶液浸種10 min、3%冰乙酸溶液浸種60 min、0.1%硫酸銅溶液浸種15 min和1%高錳酸鉀溶液浸種20 min的處理，雖然其他9個(gè)處理有一定的消毒效果，但種子帶菌率都在6.67%以上。雖然試驗(yàn)中的消毒方法能大幅度降低種子的帶菌率，但都不能徹底殺滅病菌，還有待進(jìn)一步完善消毒方法，并找到最佳濃度，從而獲得能徹底殺滅種子攜帶細(xì)菌性斑點(diǎn)病菌的方法。

3.2 不同藥劑及處理濃度對番茄種子發(fā)芽及生長的影響

藥劑的處理濃度越大，處理時(shí)間越長，其防效就越好，但處理時(shí)間太長和處理濃度過大，會(huì)影響種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢及芽、根的鮮質(zhì)量，導(dǎo)致加工番茄種子出苗差。

發(fā)芽率較高的處理為0.3%四霉素水劑200倍液浸種60 min、2%冰乙酸溶液浸種60 min、1%高錳酸鉀溶液浸種20 min和30%琥膠肥酸銅200倍液浸種60 min，但前2者處理的消毒效果相對較差。綜上分析可知，30%琥膠肥酸銅溶液200倍液浸種60 min和1%高錳酸鉀溶液浸種20 min處理對種子發(fā)芽影響不大，且可大大降低加工番茄種子的帶菌率及控制加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病的初侵染和傳播蔓延。

[1]王曉輝,李國英,任毓忠,等.新疆加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病病原鑒定[J].西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2006,15(2):72-74.

[2]王曉輝,李國英,任毓忠,等.加工番茄品種對細(xì)菌性斑點(diǎn)病的抗性鑒定[J].北方園藝,2006(3):5-6.

[3]韓盛,楊渡,徐萬里,等.8種生物源和礦物油農(nóng)藥防治加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病試驗(yàn)[J].新疆農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,47(11):2258-2261.

[4]司天桃,薛林,桑艷朋,等.防治加工番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病的藥劑篩選及抗病性鑒定[J].北方園藝,2016(12):127-130.

[5]張卉.INS-PCR檢測番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病種子帶菌研究[D].哈爾濱:東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2003.

[6]李志棟.內(nèi)蒙古加工型番茄細(xì)菌性斑點(diǎn)病病原鑒定及種子帶菌檢測技術(shù)的研究[D].呼和浩特:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué),2010.

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[9]張慶萍,王燕春,周艷芳,等.不同種子處理方法對番茄種子攜帶潰瘍菌的影響[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2013(5):65.

[10]方中達(dá).植病研究方法[M].北京:北京農(nóng)業(yè)出版社,1979.蔬