魔芋低聚糖對高脂血癥大鼠降血脂作用研究

張 婭，項朋志，何鵬飛，齊 杰

（1.云南省中醫(yī)中藥研究院，昆明 650223；2.云南開放大學化學工程學院，昆明 650222）

流行病學調(diào)查顯示，高脂血癥是脂肪肝主要致病因素之一。另外，脂肪肝患者中約25%可發(fā)展為肝纖維化，且有5%～8%進展為肝硬化[1]。一旦形成脂肪肝，又可使血脂代謝、脂蛋白合成障礙（尤其是HDL合成減少[2]），可以形成或加重高血脂癥。

難消化的低聚糖是雙歧桿菌的增殖因子，具有改善腸內(nèi)菌群和脂質(zhì)代謝等保健功能，正日益受到重視[3]。研究證實[4]：低聚糖具有低熱、穩(wěn)定、安全無毒等理化特性，可使腸道有益菌增加，促進雙歧桿菌生長，并有降低血脂及膽固醇等生理功能。許多發(fā)達國家已將多種低聚糖類產(chǎn)品定為特定保健食品，用來預(yù)防便秘、肥胖、高血脂、動脈硬化及冠心病的發(fā)生。國內(nèi)近來亦有文獻報道關(guān)于大豆低聚糖抗高血脂和抗氧化功能的研究[5]。

魔芋低聚糖主要是以甘露糖和葡萄糖的二糖、三糖的異構(gòu)體形式存在[6]。我們用魔芋低聚糖給高脂血癥模型大鼠灌胃給藥，觀察其對高脂血癥大鼠血脂各項指標、肝功能、肝臟組織的影響，旨在探討魔芋低聚糖降低血脂及保肝的保健功能。

1 實驗環(huán)境與試驗材料

1.1 實驗環(huán)境 云南省中醫(yī)中藥研究院IVC獨立送風系統(tǒng)，實驗動物使用許可證號：SYXK（滇）2013-0006，溫度20～26 ℃，濕度40%～60%。

1.2 實驗材料 SD雄性大鼠50只，SPF級。魔芋低聚糖（云南師范大學生命科學學院提供）；阿托伐他汀鈣片（批號：M60798，輝瑞制藥有限公司生產(chǎn)）。 輻照鼠用滅菌飼料、輻照鼠用滅菌高脂飼料均由蘇州雙獅實驗動物飼料科技有限公司提供，蘇飼審(2009)05032。珍茗山泉水符合GB2762-2012、GB19298-2003的要求，昆明珍茗食品有限責任公司。Olympus Au5400型全自動生化分析儀（日本Olympus公司）；Olympus CX21研究型系統(tǒng)生物顯微鏡（日本Nikon公司）；BP310S 電子天平（北京賽多利斯天平有限公司）；ASP300脫水機（德國萊卡）；RM2235切片機（德國萊卡）；CSVI攤片烤片機（湖北宏業(yè)）；YB6LF包埋機（湖北宏業(yè)）。

2 實驗方法

2.1 實驗動物分組 SD雄性大鼠50只，隨機分為4組，其中正常對照組10只，采用基礎(chǔ)飼料喂養(yǎng)；其余40只大鼠采用高脂飼料（2%膽固醇、10%豬油、0.2%甲基硫氧嘧啶、0.2%豬膽鹽、87.6%基礎(chǔ)飼料）喂養(yǎng)4周進行造模后，眼眶取血檢測TG、TC、HDL-C、LDL-C含量，與空白組比較，選取膽固醇顯著升高的動物繼續(xù)進行實驗，根據(jù)膽固醇水平將造模動物隨機分為高脂模型組（14只）、陽性對照組（13只）、魔芋低聚糖組（13只）。

2.2 劑量設(shè)置及給藥方案 正常對照組、高脂模型組：灌胃給予飲用水，給藥體積為20 mL/kg；陽性藥對照組：灌胃給予阿托伐他汀鈣片，給藥劑量為4 mg/kg（20 mg配成100 mL溶液），給藥體積為20 mL/kg，約為成人臨床用量（80 mg/d，按60 kg/人計）的3倍；魔芋低聚糖組：給藥劑量為4.8 g/kg（濃度0.24 g/mL，給藥體積為20 mL/kg）。

2.3 相關(guān)檢測項目、指標 每組動物均采用灌胃方式給藥，每天上午給藥1次，每周稱量體質(zhì)量1次。各給藥組連續(xù)給藥4周后，禁食不禁水12 h，稱體質(zhì)量，取血處死大鼠，測定總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、載脂蛋白A、載脂蛋白B、脂蛋白a、肝功能、腎功能各項指標；取肝臟稱重，計算臟器系數(shù)；將肝臟放入10%中性甲醛溶液中固定，石蠟包埋、切片，經(jīng)蘇木素、伊紅染色，再經(jīng)脫水、透明、封固后進行病理組織學檢查。統(tǒng)計分析組間差異。

2.4 數(shù)據(jù)處理及分析 數(shù)據(jù)資料用均值±標準差（x± s ）表示，符合正態(tài)分布、方差齊者用t檢驗，方差不齊者用t’檢驗，比較組間差異。

3 實驗結(jié)果

3.1 魔芋低聚糖對高脂血癥大鼠體質(zhì)量的影響 見表1。

表1 魔芋低聚糖對高脂血癥模型大鼠體質(zhì)量的影響（x± s ）

由表1結(jié)果顯示：灌胃開始至第4周，除正常對照組呈正常體質(zhì)量增長外，高脂模型組、陽性組及魔芋低聚糖組大鼠體質(zhì)量與灌胃開始時比較，均呈現(xiàn)不同程度的增長緩慢或下降，可能與高脂飼料攝入后引起大鼠食欲不振等相關(guān)；與高脂模型組比較，給藥后第4周陽性組體質(zhì)量有顯著增長（△△P＜0.01）、魔芋低聚糖組

給藥后第4周體質(zhì)量有顯著下降（△P＜0.05）。

3.2 魔芋低聚糖對高脂血癥大鼠血脂、血清載脂蛋白、肝功、腎功的影響 見表2。

表2 魔芋低聚糖對高脂血癥模型大鼠血脂、血清載脂蛋白、肝功、腎功的影響（x± s ）

表2結(jié)果顯示：各組大鼠給藥4周后，與高脂模型組相比，陽性對照組中TG、CHOL、HDL-C、LDL-C、HDL/CHOL、ALT、AST、UREA、CR、TP、ALB、GLB均有顯著降低（與高脂模型組比較，△P＜0.05或△△P＜0.01）；魔芋低聚糖組中TG、CHOL、HDL-C、LDL-C、HDL/CHOL、APOA、APOB、AST、UREA、CR、TP、GLB有顯著降低（與高脂模型組比較，△P＜0.05或△△P＜0.01）；魔芋低聚糖組LPA有顯著上升（與高脂模型組比較，△△P＜0.01）。

3.3 魔芋低聚糖對高脂血癥大鼠肝臟質(zhì)量與體質(zhì)量比的影響 見表3。

表3 魔芋低聚糖對高脂血癥模型大鼠肝臟臟器系數(shù)的影響（x± s ）

表3結(jié)果顯示：高脂模型組、陽性對照組、魔芋低聚糖組肝臟臟器指數(shù)與空白對照組相比，均有顯著上升（## P＜0.01）；魔芋低聚糖組與高脂模型組相比無顯著性差異（P＞0.05）。這可能與高脂飼料中的脂肪分解后形成三酰甘油，囤積于肝臟，造成了肝臟重量增加有關(guān)。

3.4 肝臟病理組織學檢查 病理組織學結(jié)果顯示：與正常對照組比較，高脂模型組、陽性對照組、魔芋低聚糖組受試大鼠肝臟均有不同程度脂肪樣改變。在給藥4周后，與高脂模型組比較，陽性對照組、魔芋低聚糖組大鼠肝臟均可見原脂肪樣改變一定程度的減輕，或出現(xiàn)再生新肝細胞的現(xiàn)象。

[1]袁愛力,劉思德,張振書,等.非酒精性脂肪肝與代謝綜合征[J].中華消化雜志, 2003, 23(11):682.

[2] 韋湘林.高脂血癥與脂肪肝的相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2000, 9(1):8-9.

[3]張孔海,黃秀敏.新型低聚糖的功能特性及應(yīng)用[J].肉類工業(yè)產(chǎn)品開發(fā)試驗研究, 2001, 236(2):21-24.

[4]李勇.低聚糖生理功效的研究進展[J].中國食物與營養(yǎng),1997(4):23-25.

[5]王素敏,劉福英,徐增年,等.大豆低聚糖對小鼠血脂和抗氧化作用的影響[J].營養(yǎng)學報, 1997, 19(4):468-469.

[6]徐桂蕓,張力文.微量寡糖的甲基化分析——用于魔芋葡甘多糖酶解產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)測定[J].分析化學, 1997, 24(12):1401-1403.