藿香正氣水的微乳薄層色譜法鑒別

楊瀅 李婷 許雪峰 緱慧君 任杰 李帆

（漢中市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 陜西 漢中 723000）

藿香正氣水為《中國(guó)藥典》收錄品種，由蒼術(shù)、陳皮、厚樸（姜制）、白芷、茯苓、大腹皮、生半夏、甘草、廣藿香油及紫蘇葉油組成，具有解表化濕，理氣和中的功效。主要用于外感風(fēng)寒、內(nèi)傷濕滯或夏傷暑濕所致的感冒，療效確切，是一種常用藥。其中主以藿香芳香化濕、力氣和中兼能解表；輔以紫蘇葉、白芷解表散寒而兼化濕滯，三藥合用，其解表化濕之功，相得益彰；佐以厚樸、大腹皮去濕消滯，半夏、陳皮理氣和胃、降逆止嘔；又佐以茯苓、白術(shù)、甘草益氣健脾，以助運(yùn)化。

微乳液是在1958年由Schuiman等人提出的，上世紀(jì)90年代以來，微乳液得到了廣泛的應(yīng)用，尤其是在工業(yè)和技術(shù)領(lǐng)域[1]。微乳薄層色譜是利用微乳液作為展開劑，聚酰胺薄膜為固定相，對(duì)有效成分進(jìn)行分離和鑒定。康純等[2]在2000年，首次利用微乳薄層色譜法對(duì)13種黃連中的生物堿進(jìn)行了分離和鑒定，并得到了滿意的結(jié)果。近十幾年，利用微乳薄層色譜法對(duì)中藥材及中成藥的有效成分進(jìn)行分離和鑒定運(yùn)用的較為廣泛[3-7]，但對(duì)藿香正氣水利用微乳薄層色譜法分析其有效成分尚未見報(bào)道。

本研究則采用微乳薄層色譜法，同時(shí)對(duì)中陳皮、白芷、厚樸酚、和厚樸酚4種成分進(jìn)行分離和鑒定，為藿香正氣水的有效成分分離鑒定提供準(zhǔn)確快速的方法。

1.儀器與試藥

1.1 儀器

電子天平：JY10002，上海舜寧恒平；恒溫水浴鍋：國(guó)華電器有限公司；超聲清洗儀：昆山市超聲儀器有限公司；聚酰胺薄膜：浙江臺(tái)州路橋生化材料廠點(diǎn)樣針：上海安亭微量進(jìn)樣器廠；薄層層析展開缸：上海信誼儀器廠有限公司；暗箱式紫外分析儀：WFH-203B，杭州齊威儀器有限公司。

1.2 試藥

對(duì)照藥材：陳皮對(duì)照藥材（批號(hào)：120969-201510，中國(guó)藥品生物制品鑒定所）、白芷對(duì)照藥材（批號(hào)：120945-201510，中國(guó)藥品生物制品鑒定所）；對(duì)照品：厚樸酚（批號(hào)：110729-201714，中國(guó)藥品生物制品鑒定所）、和厚樸酚（批號(hào)：110730-201614，中國(guó)藥品生物制品鑒定所）。藿香正氣水（四川彩虹制藥有限公司）購(gòu)于四川。十二烷基硫酸鈉（分析純，成都市科龍化工試劑廠）、正丁醇、無水乙醇、甲醇、正庚烷、正己烷、丙酮及甲酸均為分析純。

2.方法

2.1 溶液制備

2.1.1 展開劑配制 分別取適量的十二烷基硫酸鈉、助表面活性劑（正丁醇、乙醇、甲醇）、油相（正己烷、正庚烷）、水，混勻，放置24小時(shí)備用。臨用加適量改良劑（丙酮、甲酸）制成展開劑。

2.1.2 對(duì)照藥材溶液 取陳皮對(duì)照藥材1g，置具塞錐形瓶中，加甲醇10ml，超聲40min，濾過，濾液蒸干，加甲醇1ml，使溶解，即得陳皮對(duì)照藥材溶液。另取白芷對(duì)照藥材2g，同法制成白芷對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 對(duì)照品溶液 分別取厚樸酚、和厚樸酚適量，加甲醇分別制成1mg/ml、2mg/ml、的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.1.4 供試品溶液 取藿香正氣水5ml，蒸干，加甲醇2ml溶解，作為供試品溶液。

2.1.5 陰性樣品溶液 按照藿香正氣水的處方，分別取除去陳皮、白芷的其余藥材，按照制備工藝制成相應(yīng)的陰性樣，按照2.1.4項(xiàng)下方法制備陰性樣品溶液。

2.2 微乳薄層色譜條件

分別取陳皮、白芷對(duì)照藥材溶液，厚樸酚、和厚樸酚對(duì)照品溶液及供試品溶液各1μL，點(diǎn)于聚酰胺薄膜上。分別以不同微乳液展開劑，飽和30min，按上行法展開，展距15cm，取出晾干，置紫外光下（254nm、365nm）檢視。

表 微乳液的組成及結(jié)構(gòu)

3.結(jié)果與討論

3.1 結(jié)果

3.1.1 微乳液中水的考察 在保證微乳液SDS：正丁醇：油相（27:63:10）保持不變的條件下，按照表1改變含水量，2.2項(xiàng)下方法進(jìn)行展開。可得，隨著水的質(zhì)量比的增加（除水的質(zhì)量比為90%時(shí)，展開劑分層外），展開得到的斑點(diǎn)數(shù)隨之增加，且斑點(diǎn)清晰度也隨之增加，展開所用時(shí)間在不斷縮短。當(dāng)含水量為85%時(shí)，斑點(diǎn)最為清晰，分離效果較好，展開時(shí)間最短。因此最終選擇85%為最佳含水量。

3.1.2 微乳液中油相的考察 分別用正己烷、正庚烷為油相，進(jìn)行微乳液中油相的考察對(duì)象。以含水量85%的微乳液作為展開比例，在對(duì)各個(gè)成分分離的效果顯示，正庚烷的展開效果較正己烷理想，得到的斑點(diǎn)清晰，分離效果較好，展開時(shí)間較短。故選擇正庚烷為微乳液油相。

3.1.3 微乳液中助表面活性劑的考察 選擇甲醇、乙醇、正丁醇作為助表面活性劑，以75%、85%和90%為微乳液含水比例進(jìn)行微乳液配置。最終只有當(dāng)正丁醇作為助表面活性劑時(shí)，所配溶液未出現(xiàn)分層現(xiàn)象。故選擇正丁醇為助表面活性劑。

3.1.4 微乳液展開劑中改良劑的考察 在最終選定的微乳液中分別加入丙酮、甲酸作為改良劑。分別以85%微乳液-改良劑進(jìn)行展開。結(jié)果顯示，加入丙酮容易出現(xiàn)分層現(xiàn)象，且對(duì)拖尾的改善效果不大；而甲酸消除拖尾的效果較好，且展開時(shí)間較短，故選擇甲酸為微乳液展開劑中的改良劑。

3.2 微乳薄層層析結(jié)果

以85%微乳液-甲酸（5:1）為展開系統(tǒng)按照2.2的方法展開，取出晾干后，置紫外燈（365nm）下檢視，在供試品色譜和對(duì)照藥材色譜相應(yīng)位置上，陳皮顯兩個(gè)橙色及一個(gè)黃綠色斑點(diǎn)，白芷顯一個(gè)橙色主斑點(diǎn)。置紫外燈（254nm）下檢視，在供試品色譜和對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，厚樸酚顯紫色斑點(diǎn)，和厚樸酚顯紫色斑點(diǎn)。陰性樣在相應(yīng)位置上均無干擾斑點(diǎn)。

圖1 藿香正氣水主要成分鑒別微乳薄層色譜圖

3.3 討論

在中國(guó)藥典中，采用經(jīng)典薄層色譜法分別以6個(gè)不同的TLC方法鑒定陳皮、厚樸酚、和厚樸酚、白芷等11種對(duì)照藥材及對(duì)照品，需進(jìn)行較為復(fù)雜的前處理，且使用試劑種類較多。

本實(shí)驗(yàn)利用微乳薄層對(duì)藿香正氣水中的有效成分進(jìn)行分離鑒定，本實(shí)驗(yàn)對(duì)展開劑的各個(gè)組成成分進(jìn)行考察，最終確定微乳液（SDS：正丁醇：正庚烷：水=4.05：9.45：1.05：85，g/g）-甲酸（5:1）為展開劑，能夠同時(shí)分離和鑒定陳皮、白芷、厚樸酚及和厚樸酚4種有效成分。用此法可大大簡(jiǎn)化藿香正氣水有效成分分離鑒別的步驟，縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間，同時(shí)減少了試劑使用的種類和用量，減少實(shí)驗(yàn)成本，為中國(guó)藥典完善提供方法的可能。

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