洋金花葉小極性成分GC-MS分析

郭瑞，劉艷，楊炳友，匡海學*

(1.山西中醫(yī)藥大學，基于炎性反應的重大疾病創(chuàng)新藥物山西省重點實驗室, 山西 晉中 030619；2.黑龍江中醫(yī)藥大學，北藥基礎與應用研究省部共建教育部重點實驗室，黑龍江中藥及天然藥物藥效物質基礎研究重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150040)

洋金花為茄科植物白花曼陀羅(DaturametelL.)的干燥花，又名白花曼陀羅、曼陀羅花、山茄子、風茄花和大顛茄等。洋金花有較強的生理活性，藥用歷史悠久，應用也十分廣泛。2015版《中國藥典》記載其性溫味辛、有小毒；具平喘止咳、鎮(zhèn)痛解痙、麻醉之功[1]。迄今為止，從洋金花的不同部位分離到的小分子化學成分超過100個[2-7]，主要包括：黃酮類、萜類、木脂素類、醉茄內(nèi)酯類、生物堿類等成分。最新研究發(fā)現(xiàn)，洋金花中醉茄內(nèi)酯類成分具有較強的生理活性，為治療銀屑病的主要藥效物質基礎[8-9]。近年來臨床應用洋金花制劑治療銀屑病取得了顯著的治療效果[10]。醉茄內(nèi)酯是洋金花治療銀屑病的主要有效物質之一，具有抗炎、抗皮膚瘙癢、促進皮膚鱗片角化、抗過敏、對抗有絲分裂等藥理作用，對體液免疫有一定的抑制作用。醉茄內(nèi)酯類組分、baimantuoluoside B和baimantuoluoside C對表皮生長因子(EGF)誘導HaCaT細胞增殖顯現(xiàn)出很好的抑制作用[11-12]。

目前，關于洋金花的研究主要集中在干燥花上，但是洋金花存在采收率低、花期長等問題，而作為其非藥用部位的洋金花葉卻具有產(chǎn)量高且獲取便捷的優(yōu)勢。但是，洋金花葉卻未加以利用，在采摘花的同時，都會有大量的葉被丟棄，造成了極大的資源浪費。為了充分地利用資源，發(fā)現(xiàn)新藥，以期找到與花活性相似或更高的藥效物質基礎，為洋金花葉藥用價值的深入研究和洋金花資源的綜合利用提供科學依據(jù)，越來越多的研究者開始關注洋金花葉的生物活性，對洋金花葉化學成分的研究也正逐步加深。

洋金花葉為茄科曼陀羅屬植物白曼陀羅(DaturametelL.)的干燥葉。洋金花干燥葉味苦、辛，性溫，有毒，具有鎮(zhèn)咳平喘、止痛拔膿、癰疽瘡癤之功效。民間多用于治療喘息、頑固性潰瘍、外治皮膚瘙癢起水泡等疾病[13-14]?！吨腥A本草》中記載其具有鎮(zhèn)咳平喘、止痛拔膿等功效,主治喘咳、痹痛、脫肛、腳氣、癰疽瘡癤。前人對洋金花葉的利用多停留在民間驗方和粗提物的水平上，例如《現(xiàn)代實用中藥》中記載到：“治喘息：曼陀羅葉少許，和煙單中，吸其煙”，《現(xiàn)代實用中藥》中記載到：“葉之浸劑，對痙攣性咳嗽，喘息，慢性支氣管炎咳嗽有效”。洋金花葉在民間的用途廣泛，甚至在其他國家和地區(qū)普遍使用。例如在印度，洋金花葉可用于有鎮(zhèn)靜和解痙，將葉煎煮外用可驅趕蠕蟲。鮮嫩葉可以用于治療女子閉經(jīng)。將鮮葉榨汁或者是把洋金花葉加工成膏狀涂抹到患者腫痛的部位，可以達到緩解腫痛的效果。在巴基斯坦，混有洋金花葉和石灰的膏狀物外用可以治療疥癬。將混有黑胡椒的洋金花葉做成片劑可用于退燒[15]。

本文對洋金花葉極性較小的化學成分展開了研究，對其95%乙醇提取物的石油醚萃取部位中小極性成分進行了GC-MS分析，以期為全面認識洋金花葉的化學成分和藥理作用提供更多的理論依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Agilent 7890A-5975C型氣相色譜-質譜聯(lián)用儀 (美國安捷倫公司)；色譜柱為DB-17msi; 毛細管柱(60 m×0.25 mm，0.25 μm)；薄層色譜硅膠GF254和柱色譜硅膠(200～300目，青島海洋化工廠)；分析用乙醇、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇(天津市化學試劑一廠)。

1.2 材料

洋金花葉于2014年9月采于海南省臨高縣，經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學藥學院中藥資源教研室樊銳鋒副教授鑒定為白曼陀羅(DaturametelL.)的葉子。原植物標本(2014092)存放于黑龍江中醫(yī)藥大學藥學院。

2 方法

2.1 樣品處理

提取和萃取方法:取洋金花的干燥葉10 kg，用3倍量的95%乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并3次提取液經(jīng)減壓濃縮后得到浸膏，將浸膏用水分散，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取后經(jīng)減壓濃縮分別得到石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水萃取部位共4個組分。

小極性成分的制備:將石油醚萃取部位(300 g) 進行正相硅膠柱層析，用二氯甲烷等度洗脫，收集洗脫液即得到小極性組分。

2.2 GC-MS分析條件

2.2.1 氣相色譜條件

進樣口溫度：280℃;程序升溫條件：初溫60℃，保持1 min，程序升溫5℃/min，終溫260℃，保持5 min；載氣：氦氣；流速 1.0 mL/min；進樣量1 μL；分流比：10∶1。

2.2.2 質譜條件

EI離子源，離子源溫度250℃，電離能70 eV，接口溫度280℃；掃描范圍 m/z：50～600。

3 結果與分析

對從洋金花石油醚萃取部位中分離得到的小極性成分進行GC-MS分析，其總離子流圖見圖1。通過NIST08. L圖譜庫自動檢索了上述樣品的質譜數(shù)據(jù)，將含量低、置信度低的組分舍去不用，得到洋金花葉石油醚小極性部位的組成。從洋金花葉石油醚小極性部位中共鑒定出23個化合物，其中植物甾醇類的含量達34.15%，另外，倍半萜類成分(3S,5R,8R)-3,5-二羥基-megastigman-6,7-二烯-9-酮和木脂素類成分異落葉松脂素類成分含量分別達到10.16%和8.37%。各成分的相對含量是根據(jù)總離子流圖由計算機采用面積百分比法計算而得，具體結果見表1。

表1 洋金花葉中小極性成分分析結果

續(xù)表1

圖1 洋金花葉小極性成分總離子流圖

4 討論

實驗結果表明，洋金花葉石油醚提取部位小極性成分主要由脂肪酸、芳香酯、長鏈烷烴、木脂素、酰胺、倍半萜和植物甾醇等化學成分組成，部分長鏈烷烴的引入推測是在進行樣品提取和純化過程中接觸到了塑料器皿，故在分析中將上述引入的雜質舍去不用分析。本實驗利用氣相色譜-質譜聯(lián)用儀對洋金花葉小極性成分進行了初步的分析，為進一步全面認識洋金花葉化學成分和合理開發(fā)利用其資源提供了科學依據(jù)，進而避免資源的浪費，實現(xiàn)資源的最大化利用及可持續(xù)發(fā)展。

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