飼糧維生素D和鈣水平對冬毛期短毛雄性黑水貂生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)和臟器指數(shù)的影響

王 靜，張海華，徐逸男，李仁德，張雪蕾，蔡熙姮，李光玉

(中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，經(jīng)濟(jì)動物研究室，長春 130112)

鈣磷均為維持水貂健康生長的常量元素，也是維持水貂生長代謝、骨骼發(fā)育的必要元素。適宜的鈣磷含量對水貂的健康生長十分關(guān)鍵，過多或缺乏都會對水貂造成不利的影響，李光玉等[1]指出，鈣磷缺乏會導(dǎo)致水貂出現(xiàn)牙齦腫大、牙齒松動、嘴鼻變大等癥狀。維生素D可促進(jìn)機(jī)體對鈣磷的吸收，調(diào)節(jié)骨骼中鈣磷的沉積和溶解，對機(jī)體具有十分重要的調(diào)節(jié)作用。鈣磷比也是影響機(jī)體對鈣磷吸收十分重要的因素。中華人民共和國行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《水貂配合飼糧》推薦鈣磷比為1～2[2]。劉帥等[3]對冬毛期水貂的研究建議冬毛期水貂飼糧磷水平為1.4%，鈣磷比為1.5～2.0。目前國內(nèi)外對水貂適宜維生素D含量的研究結(jié)果比較寬泛，程世鵬等[4]給出每日每只水貂冬毛生長期維生素D的需要量為30～40 IU；也有研究[5]指出，水貂飼糧每千克干物質(zhì)中維生素D含量應(yīng)不少于400 IU；更有研究[6]表明，飼糧干物質(zhì)中維生素D含量在5 000 IU·kg-1時對水貂沒有毒性作用；當(dāng)維生素D劑量超過100 000 IU·kg-1時，在短時間內(nèi)即出現(xiàn)毒性作用[7]。G.Hilleman[8]研究表明，從7月到打皮時期，水貂飼糧干物質(zhì)中維生素D含量為10 000、25 000和40 000 IU·kg-1時毛皮品質(zhì)沒有顯著差異。因此，探究水貂飼糧精準(zhǔn)的維生素D和鈣水平顯得尤為重要。

本試驗通過固定飼糧鈣磷比，配制不同維生素D和鈣水平的飼糧，研究飼糧不同維生素D和鈣水平對冬毛期水貂生產(chǎn)性能、血清生化指標(biāo)及臟器指數(shù)的影響，以篩選出適宜冬毛期水貂的飼糧維生素D和鈣水平，為精準(zhǔn)確定水貂飼糧中維生素D及鈣的水平奠定基礎(chǔ)，為水貂生產(chǎn)實踐提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗動物

飼養(yǎng)試驗地點為農(nóng)業(yè)部長白山野生生物資源重點野外科學(xué)觀測試驗站。選取(135±5)日齡健康短毛黑水貂公貂117只，隨機(jī)分成9組(Ⅰ～Ⅸ組)，且同窩水貂不在同一組內(nèi)以消除遺傳因素帶來的影響，每組13個重復(fù)，每個重復(fù)1只，各重復(fù)之間水貂初始體重差異不顯著(P>0.05)。

1.2 試驗設(shè)計與飼糧

試驗采用3×3雙因素隨機(jī)試驗設(shè)計，飼糧鈣磷比固定為1.7，基礎(chǔ)飼糧中維生素D水平為2 300 IU·kg-1，鈣水平為2.0%，設(shè)3個維生素D(維生素D3形式)水平(2 300、4 300和6 300 IU·kg-1)和3個鈣水平(2.00%、2.40%和2.80%)。參考NRC(1982)[9]以及相關(guān)文獻(xiàn)[10]中關(guān)于水貂冬毛期各營養(yǎng)物質(zhì)需要量，以海雜魚、雞骨架、雞頭、雞腺胃、雞肝、豆油膨化玉米粉為原料，共配制9種冬毛期水貂試驗飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表l。9組水貂飼喂的飼糧分別為Ⅰ組2.00%鈣與2 300 IU·kg-1維生素D，Ⅱ組2.00%鈣與4 300 IU·kg-1維生素D，Ⅲ組2.00%鈣與6 300 IU·kg-1維生素D，Ⅳ組2.40%鈣與2 300 IU·kg-1維生素D，Ⅴ組2.40%鈣與4 300 IU·kg-1維生素D，Ⅵ組2.40%鈣與6 300 IU·kg-1維生素D，Ⅶ組2.80%鈣與2 300 IU·kg-1維生素D，Ⅷ組2.80%鈣與4 300 IU·kg-1維生素D，Ⅸ組2.80%鈣與6 300 IU·kg-1維生素D。預(yù)飼期13 d，正試期60 d。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets (air-dry basis) %

1). 預(yù)混料為每千克飼糧提供VA 10 000 IU，VE 60 mg，VK31.6 mg，VB120 mg，VB210 mg，VB610 mg，VB120.1 mg，煙酸40 mg，泛酸20 mg，葉酸1 mg，生物素0.5 mg，F(xiàn)e 80 mg，Zn 60 mg，Mn 15 mg，Cu 10 mg，I 0.5 mg，Se 0.2 mg，Co 0.3 mg。2). 代謝能和碳水化合物為計算值，其余為實測值。3). 本試驗原料為鮮料，基礎(chǔ)飼糧中維生素D含量為2 300 IU·kg-1。維生素D以VD3形式添加，購自浙江新維普添加劑有限公司
1). The premix provides the following per kg of diet: VA 10 000 IU，VE 60 mg，VK31.6 mg，VB120 mg，VB210 mg，VB610 mg，VB120.1 mg， nicotinic acid 40 mg， pantothenic acid 20 mg， folic acid 1 mg， biotin 0.5 mg，F(xiàn)e 80 mg，Zn 60 mg，Mn 15 mg，Cu 10 mg，I 0.5 mg，Se 0.2 mg，Co 0.3 mg.2).ME and carbohydrate are calculated values, the others are measured values.3). The raw materials for the test are fresh materials, the VD concentration is 2 300 IU·kg-1in basal diet. The vitamin D is supplemented as VD3

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗開始前，對水貂接種犬瘟熱和細(xì)小病毒疫苗。試驗水貂均單籠飼養(yǎng)，每日07:30與15:30各飼喂1次，自由飲水，每日記錄實際采食量。正式試驗開始后，每日觀察并記錄試驗水貂的健康狀況。

1.4 水貂生長性能的測定

水貂體重為試驗結(jié)束時水貂的空腹活體重，水貂的體長為將水貂放于水平地面上，鼻尖至尾根的距離。皮長為取皮刮油烘干后在楦板上鼻尖至尾根的距離。毛皮品質(zhì)參考《中國毛皮獸飼養(yǎng)技術(shù)大全》中的參數(shù)將水貂毛皮品質(zhì)劃分為1～5分進(jìn)行評價并記錄[11]。

1.5 測定指標(biāo)及方法

飼糧中粗蛋白(CP)、粗脂肪(EE)、粗灰分、Ca、P參照《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》[12]測定。維生素 D 水平參照 GB /T 17818-2010 采用高效液相色譜法檢測。飼養(yǎng)試驗結(jié)束時，每組隨機(jī)選取9只健康水貂，稱重后心采血5 mL，置于促凝采血管中，經(jīng)在4 ℃，4 000 r·min-1離心8 min，將分離出的血清分裝在1.5 mL編好號的Eppendorf管中，置于-80 ℃保存，備用。血清中的總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的測定采用試劑盒，按照試劑盒說明，使用VITALIB-E全自動生化分析儀測定，球蛋白(GLOB)由白蛋白差值計算獲得。

1.6 水貂臟器指數(shù)測定及計算

上述各組中9只水貂經(jīng)心采血后立即處死，取皮后迅速取出心、肝、脾和腎，用濾紙吸干臟器表面的血液后進(jìn)行稱重記錄，然后計算各臟器指數(shù)：臟器指數(shù)=器官重量÷體重×100%。

1.7 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，用Excel 2010進(jìn)行整理并用SAS 9.4軟件中的一般線性模型(GLM)程序進(jìn)行有交互作用的雙因素方差分析(two-way ANOVA)，并采用Duncan氏法進(jìn)行多重比較，P<0.05為差異顯著，P<0.01為差異極顯著。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧維生素D和鈣水平對水貂生產(chǎn)性能的影響

如表2所示，飼糧維生素D和鈣水平對水貂體重、體長和毛皮品質(zhì)均無顯著影響(P>0.05)。鈣水平對皮長有顯著的影響(P<0.05)，0%添加水平顯著高于0.4%和0.8%添加水平(P<0.05)。

表2 飼糧維生素D和鈣水平對水貂生產(chǎn)性能的影響Table 2 Effects of dietary VD and Ca levels on production performance of mink

(續(xù)表2 Continued)

同列同一項目數(shù)據(jù)肩標(biāo)無字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)。下表同
In the same column and the same item，values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05)， with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05)，and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below

(轉(zhuǎn)下頁Carried forward)

2.2 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清生化指標(biāo)的影響

2.2.1 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清中蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響 如表3所示，飼糧鈣水平對水貂血清中TP、ALB和GLOB均無顯著影響(P>0.05)。維生素D水平對TP有顯著的影響(P<0.05)，2 000 IU·kg-1添加水平顯著高于4 000 IU·kg-1添加水平(P<0.05)。

表3 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清中蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響Table 3 Effects of dietary VD and Ca levels on protein metabolic indexes in serum of mink

2.2.2 飼糧維生素D和鈣水平對水貂脂肪代謝指標(biāo)的影響 由表4可以看出，維生素D和鈣添加水平對水貂血清TG、HDL水平存在顯著的交互作用(P<0.05)，對水貂血清LDL水平存在極顯著的交互作用(P<0.01)。維生素D添加水平顯著影響水貂血清TG濃度(P<0.05)，2 000 IU·kg-1添加水平顯著低于0 IU·kg-1添加水平(P<0.05)。鈣添加水平顯著影響水貂血清HDL濃度(P<0.05)，0%添加水平顯著低于0.4%和0.8%添加水平(P<0.05)。鈣添加水平極顯著影響水貂血清LDL濃度(P<0.01)，0.8%鈣添加水平極顯著低于另兩個添加水平(P<0.01)。維生素D和鈣添加水平對水貂血清CHO濃度均無顯著影響(P>0.05)。

表4 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清中脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)的影響Table 4 Effects of dietary VD and Ca levels on fat metabolic indexes in serum of mink

2.3 飼糧維生素D和鈣水平對水貂臟器指數(shù)的影響

如表5所示，飼糧維生素D水平對水貂腎臟指數(shù)有極顯著的影響(P<0.01)，以4 000 IU·kg-1維生素D添加水平最低。飼糧鈣水平對水貂心臟指數(shù)、肝臟指數(shù)、脾臟指數(shù)均有顯著的影響(P<0.05)，均以0.8%鈣添加水平最高。飼糧維生素D和鈣水平對水貂臟器指數(shù)無顯著的交互作用(P>0.05)。

3 討 論

3.1 飼糧維生素D和鈣水平對水貂生產(chǎn)性能的影響

水貂體重、體長和皮長等生產(chǎn)性能指標(biāo)受多種因素影響，如水貂品種、飼養(yǎng)環(huán)境和營養(yǎng)水平等[13],其毛皮品質(zhì)亦是如此[13]。尺碼和品質(zhì)是衡量水貂皮張價值的兩個主要因素，而打皮時水貂的體重和皮長與皮張的尺碼顯著相關(guān)[14]。維生素D是動物生長所必需的營養(yǎng)素，適量添加可促進(jìn)動物生長。大量研究[15-20]表明，適宜維生素D水平可以提高肉雞的生長性能。也有研究[21-23]表明，適宜的鈣水平可以提高雞的生長性能。在本試驗條件下，鈣與維生素D添加水平對水貂的末體重沒有顯著的影響。鈣水平對其皮長有顯著影響，在0%添加水平時有最大值。不同飼糧維生素D和鈣水平對水貂毛皮品質(zhì)影響不顯著，可能維生素D和鈣對水貂的影響主要在代謝等其他方面上。

表5 飼糧維生素D和鈣水平對水貂臟器指數(shù)的影響Table 5 Effects of dietary VD and Ca levels on organ indexes of mink

3.2 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清生化指標(biāo)的影響

3.2.1 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清中蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)的影響 動物對飼糧中蛋白質(zhì)的利用程度可由血清中蛋白質(zhì)的相關(guān)指標(biāo)直接反映。TP具有維持血管內(nèi)正常膠體滲透壓、運(yùn)輸代謝物、維持酸堿平衡、參與免疫等多種功能[24]。TP由ALB和GLOB組成，能夠反映肝的合成功能以及腎病變造成的蛋白質(zhì)丟失等情況。本試驗條件下，鈣水平對水貂血清中蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)無顯著影響。當(dāng)飼糧維生素D添加水平為2 000 IU·kg-1時，水貂血清中TP、ALB和GLOB的水平均最高，在同等飼糧組成的情況下，說明該水平下蛋白質(zhì)的利用率相對較高。王麗等[25]研究表明，在日糧中添加維生素D3能顯著提高籠養(yǎng)育成蛋鴨血清總蛋白及白蛋白的濃度，球蛋白濃度有升高的趨勢。李萬佳[26]對獺兔的研究也得到相似的結(jié)果，這與本試驗結(jié)果一致。但在本試驗中,當(dāng)飼糧維生素D添加量為4 000 IU·kg-1時，蛋白質(zhì)代謝相關(guān)指標(biāo)有所降低，可能是由于飼糧維生素D量過高，引起了動物機(jī)體不適，從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)代謝利用率有所降低。

3.2.2 飼糧維生素D和鈣水平對水貂血清中脂肪代謝相關(guān)指標(biāo)的影響 LDL、HDL是運(yùn)載膽固醇的脂蛋白，用以維持血漿脂蛋白濃度的穩(wěn)定，維持細(xì)胞脂類保持適當(dāng)?shù)臐舛取ｉL期不適宜的TG、CHO、LDL、HDL濃度不利于動物體內(nèi)血脂代謝和轉(zhuǎn)運(yùn)，易造成動物高脂血癥、動脈粥樣硬化、肝細(xì)胞性黃疽等病癥。研究[27-28]表明，高鈣水平能夠降低動物體內(nèi)的脂肪含量。徐超等[29]研究發(fā)現(xiàn)，膳食鈣有明顯的降低血漿膽固醇濃度的作用。王海英等[30]研究指出，高鈣膳食降低飲食誘導(dǎo)肥胖大鼠的體脂含量，改善血脂代謝紊亂狀態(tài)和胰島素抵抗，這是高鈣通過促進(jìn)瘦素分泌，降低神經(jīng)肽Y分泌，升高血中游離T3和生長激素水平實現(xiàn)的。維生素D能促進(jìn)機(jī)體對鈣的吸收，陳娟[28]研究指出，添加維生素D顯著降低肉仔雞血清低密度脂蛋白濃度。李萬佳[26]對獺兔的研究并未發(fā)現(xiàn)維生素D添加水平對血清TG、CHO、HDL、LDL有顯著影響。本試驗條件下，鈣添加水平顯著影響水貂血清LDL、HDL濃度，且鈣添加水平為0.8%時，水貂脂肪水平偏低，與上述研究結(jié)果一致。

3.3 飼糧維生素D和鈣水平對水貂臟器指數(shù)的影響

臟器指數(shù)是評價臟器中物質(zhì)毒性的常用指標(biāo)[13]，都能較為方便和敏感的反映出臟器中物質(zhì)的毒性程度。器官的大小在一定程度上能夠反映機(jī)體器官的功能強(qiáng)弱及受損情況[13]，內(nèi)臟器官的充分發(fā)育能使機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)充分的消化吸收。心是循環(huán)系統(tǒng)中的動力，維持血液循環(huán)，推動血液流動，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物，使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。肝是身體內(nèi)以代謝功能為主的器官，具有儲存糖原(肝糖)、分泌蛋白質(zhì)合成、去毒素等功能。若動物肝出現(xiàn)損傷，肝吸收營養(yǎng)、代謝和清除毒素的能力也相應(yīng)減弱。脾是外周免疫器官，可產(chǎn)生大量的淋巴細(xì)胞和豐富的B細(xì)胞，并可分泌特殊的抗體，因此可參與機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫。腎對維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定具有重要的作用。腎是重要的排泄器官，其主要功能是過濾形成尿并排出代謝廢物，調(diào)節(jié)體內(nèi)的電解質(zhì)和酸堿平衡。腎具有內(nèi)分泌功能，通過產(chǎn)生腎素、促紅細(xì)胞生成素、前列腺素、1,25-(OH)2-D3等，參與調(diào)節(jié)血壓、紅細(xì)胞生成和鈣的代謝。所以，腎的結(jié)構(gòu)和功能異常，上述正常功能均可受到影響，出現(xiàn)一系列臨床癥狀。研究表明[31]，飼糧鈣水平對0～7周齡貴妃雞心、肝、脾、腎指數(shù)均無顯著影響，這與本研究結(jié)果一致。張淑云[32]的研究結(jié)果表明，增加維生素D添加量有利于肉雞細(xì)胞和體液免疫功能的增強(qiáng)，而高水平鈣則主要不利于肉雞體液免疫功能。維生素D主要通過1,25-(OH)2-D3來發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，可直接作用于T淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生[33]。有研究表明，1,25-(OH)2-D3增強(qiáng)單核/巨噬細(xì)胞的分化和活化，用1,25-(OH)2-D3治療后，削弱的免疫功能可以得到加強(qiáng)[34]，適宜鈣能調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞分裂，介導(dǎo)巨噬細(xì)胞的吞噬功能[35]。汪德勤等[36]研究發(fā)現(xiàn)，用缺乏維生素D的飼料飼喂小鼠后，其主要臟器指數(shù)顯著變小。解俊美[16]研究結(jié)果表明，飼糧適宜維生素D含量顯著提高蛋雛鴨脾臟指數(shù)。李思明[37]對絲毛雞的研究也得到相似的結(jié)果。在本試驗條件下，高鈣水平顯著提高了冬毛期水貂的心、肝、脾臟指數(shù)，維生素D添加水平為0～2 000 IU·kg-1時，腎臟指數(shù)最高。

4 結(jié) 論

綜合以上指標(biāo)，在本試驗條件下得出，當(dāng)水貂飼糧中添加0～2 000 IU·kg-1維生素D，總維生素D含量為2 300～4 300 IU·kg-1時，能夠促進(jìn)水貂蛋白質(zhì)代謝，提高水貂腎臟指數(shù)；當(dāng)水貂飼糧中添加0.8%鈣、飼糧中總鈣含量為2.8%時，能夠提高水貂心、肝、脾臟指數(shù)。

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