上海市某規(guī)模牛場(chǎng)Q 熱血清學(xué)監(jiān)測(cè)

朱駿 ，徐衛(wèi)青 ，金一春 ，曹向英 ，孫文梅 ，許柯

（1.上海市松江區(qū)食用農(nóng)產(chǎn)品安全監(jiān)督檢測(cè)中心，上海 201611；2.上海市松江區(qū)泖港鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心，上海 201607）

Q熱是由貝氏柯克斯體（Coxiella burnetti）感染引起的一種世界性分布的人獸共患自然疫源性疾病[1]。該病首發(fā)于澳大利亞，人和動(dòng)物普遍易感，人Q熱的主要傳染源是患病牛、羊。由于該病主要通過(guò)氣溶膠傳播，故它的流行不易控制。

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)有不少對(duì)該病的相關(guān)報(bào)道[2-5]。為掌握和了解上海市松江區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)的Q熱感染情況，我們采用ELISA方法分別于2016、2017年對(duì)松江區(qū)兩個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)的Q熱感染情況開(kāi)展了血清學(xué)抗體監(jiān)測(cè)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 被檢血清 采自上海市松江區(qū)兩個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)，牛血液樣品共720份（2016、2017年各360份），分離血清后于-20℃保存待檢。

1.1.2 檢測(cè)試劑 Q熱抗體ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自美國(guó) IDEXX 公司，批號(hào)分別為：E121（2016）、H651（2017）。

1.2 方法

1.2.1 操作步驟 將被檢血清及診斷試劑置21℃平衡至試驗(yàn)要求；用超純水將濃縮洗液作10倍稀釋?zhuān)孟匆簩⒈粰z血清及陰、陽(yáng)性對(duì)照作400倍稀釋?zhuān)辉谖⒘糠磻?yīng)板各相應(yīng)孔中加入已處理過(guò)的被檢血清及陰、陽(yáng)性對(duì)照各100μL，振蕩混勻，封膜，37℃下孵育60 min；用約300 μL洗液洗滌板孔，重復(fù)3次，最后一次洗滌后將板拍干，每孔加入酶標(biāo)抗體100μL，混勻，封膜，37℃下孵育 60min；用約300 μL洗液洗滌板孔，重復(fù)3次，最后一次洗滌后將板拍干，每孔加入TMB底物溶液100μL，避光21℃孵育15min；每孔加入終止液100μL，混勻，置酶標(biāo)儀上，用單波長(zhǎng)450nm讀取結(jié)果。

1.2.2 結(jié)果判定 在試驗(yàn)成立的（陰性對(duì)照OD平均值≤0.5，陽(yáng)性對(duì)照OD平均值≤2.5，陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照OD平均值差≥0.3）條件下，按以下公式計(jì)算樣品S/P：

S/P＜30%判為陰性；30%≤S/P＜40%判為可疑；S/P≥40%判為陽(yáng)性，對(duì)于可疑樣品需進(jìn)行重新檢測(cè)。

2 檢測(cè)結(jié)果

2.1 血清樣品數(shù)量 共檢測(cè)了720份牛血清，其中成年牛血清520份，育成牛血清200份。

2.2 陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果 用ELISA法共檢出抗體陽(yáng)性血清256份，總抗體陽(yáng)性率為35.6%；其中成年牛陽(yáng)性血清182份，抗體陽(yáng)性率為35.0%；育成牛陽(yáng)性血清74份，抗體陽(yáng)性率為37.0%。詳見(jiàn)表1。

表1 牛血清樣品Q(chēng)熱抗體檢測(cè)結(jié)果 份

3 小結(jié)與討論

3.1 本次試驗(yàn)采用ELISA方法，分別于2016、2017年對(duì)上海市松江區(qū)兩個(gè)規(guī)模牛場(chǎng)的Q熱抗體進(jìn)行了血清學(xué)監(jiān)測(cè)，以了解松江區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)牛群的Q熱感染狀況，結(jié)果表明松江區(qū)牛場(chǎng)存在一定程度的Q熱感染。

3.2 Q熱在我國(guó)分布廣泛，經(jīng)血清學(xué)和臨床病例證實(shí)，北京、河北、內(nèi)蒙古、黑龍江、吉林、遼寧、四川、重慶、云南、西藏、甘肅、青海、新疆、廣東、廣西、海南、山東、江蘇、安徽、福建等地區(qū)均有Q熱分布[2]，由于Q熱在公共衛(wèi)生上的重要性，國(guó)內(nèi)一些學(xué)者均對(duì)該病開(kāi)展了相關(guān)的流行病學(xué)調(diào)查[3-6]。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示：松江區(qū)規(guī)模牛場(chǎng)牛群感染Q熱的總抗體陽(yáng)性率為35.6%，其中成年?？贵w陽(yáng)性率為35.0%，育成?？贵w陽(yáng)性率為37.0%。

3.3 從監(jiān)測(cè)結(jié)果可以看出，不同年齡階段的牛均可感染Q熱，成年牛群與育成牛群的Q熱血清抗體陽(yáng)性率無(wú)明顯差異（分別為35.0%、37.0%），牛群總抗體陽(yáng)性率2017年度略高于2016年度（分別為38.6%、32.5%）。該結(jié)果也反映了Q熱在松江區(qū)的存在現(xiàn)狀。由于牛是人Q熱的主要傳染源，應(yīng)引起高度重視，增強(qiáng)預(yù)防意識(shí)，預(yù)防該病在畜群乃至人群中的感染與流行。

3.4 加強(qiáng)對(duì)Q熱流行病學(xué)的學(xué)習(xí)與認(rèn)識(shí)，對(duì)于Q熱的有效預(yù)防十分重要。在日常工作中應(yīng)養(yǎng)成良好的個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣，做好個(gè)人防護(hù)，不接觸可能污染Q熱病原的物品；加強(qiáng)牛場(chǎng)衛(wèi)生管理，完善人員和牛群的保護(hù)措施，做好牛場(chǎng)產(chǎn)犢場(chǎng)地和物品的消毒；對(duì)胎盤(pán)及分泌物等進(jìn)行無(wú)害化處理，防止氣溶膠產(chǎn)生；引進(jìn)牛要先進(jìn)行衛(wèi)生檢疫；采取有效可行的措施殺滅老鼠、蜱、螨等傳播媒介。

3.5 本次針對(duì)牛群的血清學(xué)監(jiān)測(cè)，真實(shí)反映了松江區(qū)牛群Q熱的感染現(xiàn)狀。由于Q熱在流行病學(xué)上的重要性，有必要加強(qiáng)調(diào)查研究，進(jìn)一步開(kāi)展對(duì)羊、豬、禽及寵物等動(dòng)物的Q熱血清學(xué)抗體調(diào)查，全面了解Q熱在松江區(qū)動(dòng)物間的感染現(xiàn)狀，掌握其流行病學(xué)資料，從而控制該病在動(dòng)物間循環(huán)，防止人類(lèi)Q熱的發(fā)生。

[1]俞樹(shù)榮.中國(guó)Q熱研究進(jìn)展[J].中華流行病學(xué)雜志，2000，21（6）：456-459.

[2]張啟恩，魯志新，韓光紅.我國(guó)重要自然疫源地與自然疫源性疾病[M].沈陽(yáng)：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社，2003：241-250.

[3]李忠，陳桐，黃捷通.山東省畜間Q熱血清學(xué)初步調(diào)查[J].中國(guó)人獸共患病雜志，1996（1）：12.

[4]何劍峰，黎薇，董新民，等.廣東省人群Q熱感染現(xiàn)狀[J].中國(guó)人獸共患病雜志，2001，17（3）：97.

[5]張永根，史永林，劉紅，等.安徽省不同地區(qū)人群和家畜Q熱血清流行病學(xué)調(diào)查 [J].安徽預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2010，16（2）：87-88.

[6]范德生，徐琪毅，禹惠蘭，等.新疆伊犁地區(qū)人及家畜貝氏柯克斯體血清學(xué)調(diào)查[J].疾病監(jiān)測(cè)，2011，26（1）15-17.