β-受體激動劑的危害及QuEChERS方法在其檢測中的應(yīng)用

□ 賀志喬 濱州市食品藥品檢驗檢測中心

食品安全問題是最基本的民生問題，日益得到人們關(guān)注和重視。我國作為畜產(chǎn)品的生產(chǎn)和消費大國，更應(yīng)該提高畜產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。而近年來，畜產(chǎn)品的獸藥殘留問題仍然突出，主要表現(xiàn)在抗生素類、β-腎上腺素能受體阻斷劑等方面[1]。其中，β-受體激動劑又稱“瘦肉精”，是一類具有腎上腺受體激動作用的藥物，其在畜肉中的殘留通過食物鏈進入人體，可引起慢性或急性中毒，嚴重影響消費者的身心健康[2]。本文將從β-受體激動劑的危害、檢測方法及QuEChERS方法在前處理中的應(yīng)用等方面作介紹。

1 β-受體激動劑的危害

β-受體激動劑是一類人工合成的藥物，母體結(jié)構(gòu)為苯乙胺醇[3]。農(nóng)業(yè)部及食安辦相關(guān)公告中列出的β-受體激動劑有10余種，常見的種類有克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、西馬特羅、特布他林等。最初，此類藥物在醫(yī)學上被用作治療心律失常、心絞痛、哮喘和支氣管痙攣，其藥理為松弛平滑肌。20世紀80年代，被發(fā)現(xiàn)在動物體內(nèi)有促進脂肪的轉(zhuǎn)化和分解，增加蛋白質(zhì)的合成以提高瘦肉率的功效，進而作為獸藥用于動物飼料中。但達到減少脂肪沉淀提高瘦肉率的效果，使用量需遠遠超過治療劑量方可，因此導致“瘦肉精”的濫用和大劑量殘留[2]。通過食物鏈進入人體的“瘦肉精”，易引起肌肉震顫、酸痛、心動過速、惡心、失眠等癥狀，有致染色體畸變、誘發(fā)腫瘤和致畸的可能性。過量攝入會引起急性中毒，甚至導致心腦血管系統(tǒng)疾病患者死亡[3][4]。

2 β-受體激動劑的檢測方法

我國明令禁止在飼料和畜牧生產(chǎn)中使用β-受體激動劑類藥物，在動物源性食品中，此類藥物的限量為不得檢出[5]。目前，常見的檢測方法主要有色譜法、免疫分析法、生物傳感技術(shù)、快速檢測技術(shù)等[6]。其中，液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法因其檢測靈敏度高、準確度高、無假陽性、檢出限低、無需衍生等特點，為檢驗檢測部門常用的方法。如國家標準GB/T 22286-2008為液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定豬肝和豬肉中11種β-受體激動劑殘留的方法，農(nóng)業(yè)部1025號公告-18-2008為液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定豬肝、豬肉、牛奶和雞蛋中的9種β-受體激動劑殘留的方法；其原理均為樣品經(jīng)酶解，酸調(diào)pH沉降蛋白后，用有機試劑提取，再經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化；定量限均為 0.5 μg/kg[7][8]。

以上檢測方法采用酶解、提取、固相萃取柱凈化等步驟，存在操作過程繁瑣，前處理時間長，使用試劑較多，成本昂貴，回收率不理想，需采用同位素內(nèi)標或基質(zhì)加標做標準校正曲線的方法來確保準確度和回收率等方面的缺點，使得檢測工作耗時長，對操作人員要求較高。首先被應(yīng)用于農(nóng)藥殘留領(lǐng)域的QuEChERS方法，近年來也被改良并應(yīng)用于獸藥殘留檢測方法的前處理中，提高了獸藥殘留檢測的效率。

3 QuEChERS方法在β-受體激動劑殘留檢測中的應(yīng)用

QuEChERS方法以其快速（quick）、簡單（easy）、便宜（cheap）、高效（effective）、耐用（rugged）、安全（safe）的特點，已被廣泛應(yīng)用于農(nóng)藥多殘留檢測的前處理方法中[9]。針對于獸藥殘留檢測中β-受體激動劑復(fù)雜的前處理步驟，QuEChERS方法也日益得到研究和應(yīng)用，見表1。

前處理方法中，肌肉或內(nèi)臟組織中的β-受體激動劑需用β-葡萄糖醛苷酶/芳基硫酸酯酶進行酶解，實驗者多采用乙酸銨緩沖溶液作為酶解的溶液環(huán)境。基于樣品基質(zhì)不同，李婧妍等[10]采用0.1 mol/L的EDTA-Mcllvaine緩沖溶液對液態(tài)乳中的β-受體激動劑進行提??；對于蝦肉中的萊克多巴胺和沙丁胺醇，卜明楠等[11]采用均質(zhì)提取的辦法使之成為游離態(tài)。提取試劑多使用乙腈或添加一定量的有機酸，因相較而言，乙腈可以更好地沉淀蛋白，且不易引入極性基質(zhì)干擾物；加入一定的有機酸可優(yōu)化目標物的分離度。

表1 QuEChERS方法在動物源性樣品中β-受體激動劑殘留檢測的應(yīng)用

常見的QuEChERS凈化劑PSA、C18和NH2可以吸附基質(zhì)中的脂肪酸、色素和糖類等，得到澄清干凈的提取液。無水硫酸鈉或硫酸鎂起到吸水的作用，氯化鈉起到鹽析的作用，使水相和有機相分層，便于濃縮。曲斌等、李磊等[12]則采用新型QuEChERS凈化劑，即EMR-Lipid對于動物組織樣品進行凈化。EMR-Lipid是一種除脂產(chǎn)品，能夠選擇性地去除樣品萃取物中的主要脂類而不會造成目標物的損失。曲斌等對比了使用EMR-Lipid凈化劑與MCX固相萃取柱兩種方法的回收率，前者的加標回收率得到了提高。

4 結(jié)語

β-受體激動劑及其他獸藥的使用，給消費者身心健康帶來嚴重影響，獸藥殘留問題不容忽視。傳統(tǒng)的檢驗檢測方法步驟繁瑣、成本高、耗時長，不能快速有效地得到可靠的結(jié)果。QuEChERS方法的快速、簡便、高效等優(yōu)點，使得檢測過程中的前處理步驟得到簡化，時間成本和人力成本得到降低。對于面臨大量檢測任務(wù)的食品檢驗機構(gòu)來說，不失為好的選擇。

[1]陳一資,胡濱.動物性食品中獸藥殘留的危害及其原因分析[J].食品與生物技術(shù)學報,2009(2):162-166.

[2]田曉靜,陸會寧,劉麗霞.“瘦肉精”殘留的危害與檢測方法分析[J].Meat Industry,2011(6):34-36.

[3]曲斌,耿士偉,陸桂萍,等.新型QuEChERS方法結(jié)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定豬肝中β-受體激動劑殘留[J].食品安全質(zhì)量檢測學報,2015(12):4747-4754.

[4]姜光麗,何小琴,郗存顯,等.QuEChERS/超高液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時測定飼料中6種β-阻斷劑類藥物[J].中國飼料,2015(12):33-36.

[5]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)局.中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第235號[Z].2008.

[6]劉超，郭又春.瘦肉精的檢測方法及其監(jiān)管措施[J].質(zhì)量安全,2013,3:67-68.

[7] 中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局,中國國家標準化管理委員會.動物源性食品中多種β-受體激動劑殘留量的測定 液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法:GB/T 22286-2008[S].北京:中國標準出版社,2008.

[8]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.動物源性食品中β-受體激動劑殘留檢測 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法:農(nóng)業(yè)部1025號公告-18-2008[S].北京:中國標準出版社,2008.

[9]曲斌.QuEChERS在動物源性食品獸藥殘留檢測中的研究進展[J].食品科學,2013(5):327-331.

[10]李婧妍,郭春峰,崔立輝,等.QuEChERS-HPLC-MS/MS法檢測液態(tài)乳中9種β2-受體激動劑殘留量[J].中國乳品工業(yè),2016(11):49-52.

[11]卜明楠,石志紅,康健,等.QuEChERS結(jié)合LC-MS/MS同時測定蝦肉中72種獸藥殘留[J].分析測試學報,2012(5):552-558

[12]李磊,李海暢,高婧,等.QuEChERS EMR-Lipid-LC/MS/MS測 定8種β-受體激動劑[J].食品研究與開發(fā),2016(9):178-182.