MCV和MCH對紅細(xì)胞儲存期溶血率的影響*

朱仕清 危燕芬

(廣州血液中心花都區(qū)血站，廣東 廣州 510800)

地中海貧血(以下簡稱為地貧)是我國南方最常見、危害最為嚴(yán)重的遺傳病之一。其中，廣西、廣東和海南地區(qū)為地中海貧血高發(fā)區(qū)[1]。而地貧基因攜帶者一般無任何不適，僅在血液檢測時(shí)發(fā)現(xiàn)平均紅細(xì)胞體積(MCV)和平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCH)出現(xiàn)不同程度的下降。在當(dāng)前，地貧主要是以MCV、MCH、紅細(xì)胞脆性試驗(yàn)以及HBA2電泳作為主要的篩查手段[2]。針對地貧高發(fā)區(qū)的本地區(qū)，選取2016年1—6月符合獻(xiàn)血條件的無償獻(xiàn)血者進(jìn)行MCV和MCH的篩查，對篩查結(jié)果異常的獻(xiàn)血者血液進(jìn)行質(zhì)量對比分析，現(xiàn)將研究情況報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對象

隨機(jī)選取符合獻(xiàn)血條件的2246名無償獻(xiàn)血者，其中男997人，占44.4%；女1249人，占55.6%；廣東戶籍1460人，占65%；廣西247人，占11%；湖南282人，占13%，海南167人，占7%；其他90人，占4%。

1.2 設(shè)備及材料

日本東亞公司的KX-21血細(xì)胞自動計(jì)數(shù)儀、血細(xì)胞分析儀、722S分光光度計(jì)、EDTA-K2抗凝試管。

1.3 方法

1.3.1MCV和MCH的篩查 (1)標(biāo)本的留取：獻(xiàn)血者進(jìn)針后，首先松開血袋留樣袋的夾子，讓血液流入留樣袋，留取約15 ml的標(biāo)本。再松開主袋的夾子，血液流入采血袋。在采血中，自留樣袋中分別留取常規(guī)檢測的核酸標(biāo)本和血常規(guī)標(biāo)本，血常規(guī)標(biāo)本使用EDTA-K2抗凝試管留取3～5 ml血液，貼上與血袋一致的流水號。而常規(guī)檢測的酶免標(biāo)本則在采血完畢后自采血管中留取。(2)MCV和MCH的篩查：將血常規(guī)標(biāo)本置于(4±2)℃的冰箱中保存，采血后4 h內(nèi)檢測。使用日本東亞公司的KX-21血細(xì)胞自動計(jì)數(shù)儀檢測MCV和MCH，統(tǒng)計(jì)MCV<82 fl和(或)MCH<27 pg獻(xiàn)血人群占總獻(xiàn)血人數(shù)的比例。

1.3.2MCV和MCH對紅細(xì)胞儲存期溶血率的影響分析 采取對照研究的方法，將篩查后MCV和MCH低于正常值的設(shè)為實(shí)驗(yàn)組(A組)，其中，MCV 75～82 fl和(或)MCH 25～27 pg為A1組，MCV <75 fl和(或)MCH<25 pg為A2組；MCV>82 fl和(或)MCH>27 pg為對照組。將實(shí)驗(yàn)組和對照組的血液制備成懸浮紅細(xì)胞后，通過無菌接管機(jī)自血袋中留取紅細(xì)胞約10 ml，采用EDTA-K2抗凝試管分成兩等份，分別于采血后14天和30天檢測紅細(xì)胞游離血紅蛋白濃度，計(jì)算出紅細(xì)胞的溶血率，應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析兩組血液質(zhì)量的差異。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

來自不同省份獻(xiàn)血者M(jìn)CV和MCH低于正常值人群比例采用χ2檢驗(yàn)，兩兩比較采用SNK分析，對不同儲存期以及不同組別進(jìn)行重復(fù)測量的方差分析,使用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié) 果

2.1 MCV和MCH檢出情況對比

在2246名獻(xiàn)血者中，檢出MCV和MCH低于正常值共計(jì)108例，占總獻(xiàn)血人數(shù)的4.81%。各地區(qū)比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.783，P<0.001)。具體見表1。

表1 MCV和MCH低于正常值檢出情況(n=2246)

2.2 正常血液質(zhì)量對比

實(shí)驗(yàn)組與對照組儲存期紅細(xì)胞溶血率建立曲線圖，具體見圖1～3；經(jīng)過具體數(shù)據(jù)分析，A1組與A2組溶血率在保存期14天時(shí)接近標(biāo)準(zhǔn)要求的限值(0.8%),在保存期30天時(shí)溶血率已經(jīng)超出標(biāo)準(zhǔn)范圍，而對照組在保存期14天和30天溶血率均在正常范圍內(nèi)。分別對不同儲存期以及不同組別進(jìn)行方差分析，P均<0.01，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。具體見表2。

表2 實(shí)驗(yàn)組與對照組儲存期紅細(xì)胞溶血率比較

注：F組內(nèi)=68.392，P<0.001，F(xiàn)組間=14.325，P<0.001。

圖1 A1組30天儲存期紅細(xì)胞溶血率

圖2 A2組30天儲存期紅細(xì)胞溶血率

圖3 對照組30天儲存期紅細(xì)胞溶血率

3 討 論

因地貧基因攜帶者在日常的工作、生活中無任何不適，不影響入學(xué)、入伍、運(yùn)動和獻(xiàn)血。而目前國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布的GB 18467-2012《獻(xiàn)血者健康檢查要求》[3]，對潛在貧血的獻(xiàn)血者獻(xiàn)血前僅通過硫酸銅比重法或血紅蛋白定量法檢測，對MCV、MCH和MCHC等血常規(guī)項(xiàng)目不要求檢測。故此，獻(xiàn)血者人群中不能通過上述指標(biāo)發(fā)現(xiàn)地貧基因攜帶者。

從表1看，來自廣西、廣東和海南三大地貧高發(fā)區(qū)獻(xiàn)血者占我區(qū)總獻(xiàn)血人數(shù)的88.6%，而MCV和MCH低于正常值依次為9.3%、3.9%和9.0%，其排名與普通人群中地貧篩查的排名一致(廣西基因攜帶率約為24.5%，廣東約為16.8%，海南省約為7%)，由此得知，無償獻(xiàn)血者中MCV和MCH篩查數(shù)值偏低者大部分為地貧基因攜帶者[4]。我區(qū)獻(xiàn)血人群MCV和MCH低于正常值占總獻(xiàn)血人群的3.65%，與陳亦明等[5]2012報(bào)道應(yīng)用紅細(xì)胞平均體積篩查廣東省佛山市獻(xiàn)血人群地貧基因的篩查率，在抽樣的4529人中篩查出MCV<80 fl的有185名獻(xiàn)血者，占總調(diào)查人數(shù)的4.08%相近。在廣東，MCV和MCH低于正常值在獻(xiàn)血人群中的篩查率遠(yuǎn)低于普通人群，主要原因是獻(xiàn)血人群全部來自健康的群體，已知血液指標(biāo)異常者一般不參加獻(xiàn)血；對于未知是地貧基因攜帶者，因其沒有任何自覺不適，除婚檢和產(chǎn)前檢查外，很少到醫(yī)院就醫(yī)。因此，難以發(fā)現(xiàn)。因此，在地貧高發(fā)的本地區(qū)，每年必定有一定比例的地貧基因攜帶者人群參加無償獻(xiàn)血。

從表2看，我們對實(shí)驗(yàn)組和對照組血液進(jìn)行對比分析，分別檢測紅細(xì)胞在保存期第14天和第30天的溶血率，結(jié)果顯示：總體來看，A1組保存期溶血率高于對照組，A2組保存期溶血率又高于A1組和對照組。紅細(xì)胞在保存期14天時(shí)，A1組接近標(biāo)準(zhǔn)要求的限制，A2組有部分紅細(xì)胞的溶血率超出了標(biāo)準(zhǔn)要求，而對照組則在標(biāo)準(zhǔn)范圍的低值；紅細(xì)胞在保存期30天時(shí)，A1和A2組均超出標(biāo)準(zhǔn)要求，遠(yuǎn)高于對照組，而對照組始終在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)。這說明MCV和MCH低于正常值對血液質(zhì)量有影響，MCV和(或)MCH數(shù)值越低，溶血率就越高。主要原因是其血液存在紅細(xì)胞體積小、脆性低、存活期短等缺點(diǎn)，在儲存期末容易造成溶血。如血站在血液庫存比較充足或臨床用血出現(xiàn)偏型時(shí)，發(fā)出的紅細(xì)胞保存期較長，患者輸注后不僅因紅細(xì)胞攜氧能力不足達(dá)不到治療的效果，甚至發(fā)生溶血反應(yīng)和加重患者的代謝負(fù)擔(dān)；而從獻(xiàn)血者角度分析，獻(xiàn)血后平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均血紅蛋白濃度(MCH)及紅細(xì)胞分布寬度(RDW-CV)等進(jìn)一步誘發(fā)或加重隱匿性貧血的發(fā)生，尤其是多次頻繁獻(xiàn)血者，長期獻(xiàn)血將影響自身組織器官供血，造成機(jī)體生理功能障礙而影響身體健康。如是成分獻(xiàn)血者，MCV和MCH偏低，紅細(xì)胞比重下降，縮小與血小板之間的差距，造成在每次血小板收集的程序紅細(xì)胞混進(jìn)血小板層中導(dǎo)致沖紅的發(fā)生，嚴(yán)重者導(dǎo)致采血失敗。

綜上分析，在地貧高發(fā)地區(qū)，有必要進(jìn)行MCV和MCH篩查，但是選擇一種快捷、簡便、靈敏度高的篩查方法至關(guān)重要。目前，地貧常用的檢測方法有：一是用于篩查的血常規(guī)檢測、血紅蛋白電泳分型；二是用于診斷的基因分析。目前，國內(nèi)外較普遍應(yīng)用MCV或紅細(xì)胞滲透脆性試驗(yàn)篩查地中海貧血基因攜帶者[6-7]。因地貧屬于小細(xì)胞低色素性貧血，其攜帶者的紅細(xì)胞體積較小，血常規(guī)檢測常表現(xiàn)為MCV、MCH等數(shù)值降低。采用血細(xì)胞分析儀檢測血常規(guī)具有快捷、準(zhǔn)確、方便等優(yōu)點(diǎn)，可作為院校等團(tuán)體或街頭采血地貧篩查的首選方法。

參考文獻(xiàn)：

[1] 俞進(jìn),陳雪美.福建地區(qū)α地中海貧血產(chǎn)前基因診斷分析[J].福建醫(yī)藥雜志,2011,33(4):4.

[2] 劉丹,李雪丹. MCV、MCH、RBC計(jì)數(shù)和血紅蛋白電泳在地中海貧血篩查中的診斷價(jià)值[J].中國婦幼保健,2010,25(13):1857-1859.

[3] 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn).GB18467-2011獻(xiàn)血者健康檢查要求[S].北京：中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2011:3-6.

[4] 王向明,王玨,甘佳,等.儲存紅細(xì)胞生化指標(biāo)研究進(jìn)展[J].中國輸血雜志,2016,29(10):1205-1209.

[5] 陳亦明，楊圖深,王長金,等.應(yīng)用紅細(xì)胞平均體積篩查無償獻(xiàn)血者攜帶地貧基因的價(jià)值[J].現(xiàn)代醫(yī)院，2012,12(2):60-61.

[6] 蔡稔,梁昕,潘莉珍,等.血液學(xué)指標(biāo)在育齡人群地貧篩查中的診斷價(jià)值[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志,2003，11(1):129-132.

[7] 鄧捷,等.應(yīng)用平均紅細(xì)胞體積測定法及紅細(xì)胞脆性一管定量法篩查地中海貧血[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2000,35(5):610-612.