宋延飛,張 鵬,夏 凡
(1.遼東學(xué)院農(nóng)學(xué)院,遼寧丹東 118003;2.丹東市動物疫病預(yù)防控制中心,遼寧丹東 118017)
現(xiàn)今抗生素逐步被禁用,仔豬由于斷奶應(yīng)激產(chǎn)生的生理機(jī)能紊亂依然沒有得到解決,中草藥是一種新型綠色添加劑,無毒、無耐藥性,是抗生素的良好替代品,因此一直是研究熱點(diǎn),但中草藥添加劑的應(yīng)用效果受不同藥方組成,不同劑型影響較大。郁金散源自《元亨療馬集》,是治療馬腸炎的基本藥方,有清熱解毒,澀腸止瀉的功效,白頭翁湯源自《傷寒論》,具有清熱解毒,涼血止痢的功效?!吨蝎F醫(yī)學(xué)》記載,郁金散與白頭湯配合使用會增強(qiáng)藥用功效(劉忠杰,2002),因此本試驗(yàn)選用郁金散加味白頭翁湯并加以濃縮,通過探討其對斷奶仔豬生長性能及血清免疫指標(biāo)的影響,以期為加味郁金散的使用提供依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 按照“君臣佐使”的原則對加味郁金散進(jìn)行配伍組方,其中郁金50 g、白頭翁30 g、黃芩 20 g、黃芪 20 g、黃柏 20 g,并輔以秦皮、黃連、白芍、梔子、訶子、松針粉等按一定比例組成。采用水提法將藥物浸泡于10倍蒸餾水約半小時,先用急火將藥物加熱至沸騰,然后繼續(xù)用文火加熱1 h;第2次加8倍水,文火加熱半小時;第3次加6倍量水,文火加熱半小時。每次加熱完都要用8層紗布過濾收集藥液,然后將3次藥液混合,蒸發(fā)濃縮至生藥含量約1 g/mL,加入載體白碳黑,白碳黑與藥液比例為1∶2.6,混勻后于4℃冰箱保存。1.2 試驗(yàn)方法 選取體重相近的28日齡斷奶仔豬36頭,試驗(yàn)期為21 d,其中試驗(yàn)期分為前期1~7 d,中期7~14 d,后期15~21 d三個階段,采用單因素試驗(yàn)設(shè)計將其分成4組,每組3個重復(fù),每個重復(fù)3頭豬,其中Ⅰ組為對照組全期飼喂基礎(chǔ)日糧+金霉素160 mg/kg,Ⅱ ~Ⅳ組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.05%、0.1%、0.2%加味郁金散。基礎(chǔ)飼糧配制參照NRC(1998),具體見表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
1.3 測定指標(biāo)與方法
1.3.1 生長性能測定 試驗(yàn)進(jìn)行過程中每日觀察仔豬精神狀況、排糞情況以及持續(xù)時間。試驗(yàn)期的第 7、14、21 天 20∶00 點(diǎn)停止喂料,照常供水,于第二日早稱量每頭空腹仔豬體重。稱量每個重復(fù)的剩余料量并做好記錄,計算試驗(yàn)期的平均日增重(ADG)、平均日采食量(ADFI)、料重比(F/G)及腹瀉率。
平均日增重(ADG)=增重/(試驗(yàn)天數(shù)×試驗(yàn)豬頭數(shù));
平均日采食量 (ADFI)=耗料量/(試驗(yàn)天數(shù)×試驗(yàn)豬頭數(shù));
料重比=飼料消耗量/增重;
腹瀉率/%=試驗(yàn)期腹瀉仔豬總頭數(shù)/(試驗(yàn)仔豬頭數(shù)×試驗(yàn)期天數(shù))×100。
1.3.2 血清免疫指標(biāo)測定 試驗(yàn)期的第7、14、21天20∶00點(diǎn)停止喂料,照常供水,于第二日早每個重復(fù)隨機(jī)抽取1頭仔豬采血5 mL,采血方式為前腔靜脈采血,血液不加抗凝劑裝入離心管中,室溫靜置20 min后,3000 r/min離心20 min,吸出上層血清置于-20℃保存。血清免疫球蛋白A(I-gA)、免疫球蛋白 G(IgG)、免疫球蛋白 M(IgM)采用酶聯(lián)免疫法測定,試劑盒購自南京建成弘大生物科技有限公司。
1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用單因素方差分析進(jìn)行統(tǒng)計,采用SPSS 16.0統(tǒng)計軟件,結(jié)果用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。
2.1 加味郁金散對斷奶仔豬生長性能的影響表 2顯示,1 ~ 7 d,Ⅰ、Ⅲ組 ADG、F/G、腹瀉率顯著優(yōu)于Ⅱ、Ⅳ組(P < 0.05),Ⅰ、Ⅲ組間 ADG、ADFI、F/G、腹瀉率差異不顯著(P > 0.05),Ⅲ組 ADG比Ⅱ、 Ⅳ組提高 10.73%、15.18%(P<0.05),F(xiàn)/G降低 4.61%、3.97%(P < 0.05), 腹瀉率降低63.63%(P < 0.05)、59.99%(P < 0.05),ADFI比Ⅳ組提高10.65%(P<0.05)。8~14 d,Ⅰ、Ⅲ組ADG、ADFI、F/G 顯著優(yōu)于Ⅱ、Ⅳ組(P < 0.05),Ⅰ、Ⅲ組間 ADG、ADFI、F/G、腹瀉率差異不顯著(P >0.05),Ⅲ組 ADG比Ⅱ、Ⅳ組提高 11.64%、13.20%(P < 0.05),ADFI提高 8.02%、9.48%(P < 0.05),F(xiàn)/G降低3.25%、3.25%(P<0.05)。15~21 d,Ⅰ、Ⅲ、組 ADG顯著優(yōu)于Ⅱ組(P<0.05),ADFI各組差異不顯著(P>0.05),Ⅲ組F/G比Ⅱ、Ⅳ組降低5.63%、3.82%(P<0.05),加味郁金散組腹瀉率顯著低于對照組 (P<0.05)。1~21 d,Ⅰ、Ⅲ組ADG、ADFI、F/G 顯著優(yōu)于Ⅱ、Ⅳ組(P < 0.05),Ⅲ組ADG、ADFI、F/G、腹瀉率優(yōu)于Ⅰ組但差異不顯著(P>0.05),Ⅲ組ADG比Ⅱ、Ⅳ組提升11.85%、10.33%(P < 0.05),ADFI提高 69.53%、62.45%(P< 0.05),F(xiàn)/G 降低 4.49%、3.25%(P < 0.05), 腹瀉率降低 73.30%、69.19%(P< 0.05)。
2.2 加味郁金散對斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響 由表3可見,1~7 d,各組間IgA、IgG、IgM均差異不顯著(P>0.05)。8~14 d,加味郁金散Ⅲ組IgA、IgG顯著優(yōu)于對照組 (P<0.05),IgA比Ⅱ、Ⅳ組提升 10.09%、17.65%(P<0.05),IgG 比 IV 組提升7.16%(P<0.05),但與Ⅱ組差異不顯著 (P>0.05),IgM各組間均差異不顯著 (P>0.05)。15~21 d,加味郁金散Ⅲ組IgA、IgG、IgM顯著優(yōu)于對照組(P < 0.05),IgA 比Ⅱ、Ⅳ組提升 13.91%、11.02%(P < 0.05),IgG 提升 8.22%、8.85%(P < 0.05),IgM比Ⅱ組提升13.15%(P<0.05)但與Ⅳ組差異不顯著(P > 0.05)。
本試驗(yàn)全期1~21 d加味郁金散組Ⅲ組ADG、ADFI、F/G、腹瀉率要優(yōu)于抗生素組但差異不顯著(P>0.05),說明加味郁金散同抗生素一樣具有提高斷奶仔豬生長性能和降低腹瀉的作用。分析其原因可能在于加味郁金散可從多方面改善斷奶仔豬的腸道內(nèi)環(huán)境或消化吸收機(jī)能。楊淑娟等(2004)研究發(fā)現(xiàn),郁金能夠降低兔平均胃體收縮振幅,并對兔胃底和胃體縱行肌條張力有顯著提升,這說明郁金對胃部消化動力有促進(jìn)作用?!吨腥A本草》中記載,郁金不但可以提升動物血清胰泌素濃度,對大鼠膽汁的分泌也存在調(diào)節(jié)作用,并且郁金還能夠使動物胃酸分泌增加,提升十二指腸液中HCO3-的濃度 (《中華本草》編委會,1999)。左之才等(2012)提出仔豬斷奶應(yīng)激會導(dǎo)致腸道黏膜組織結(jié)構(gòu)的嚴(yán)重破壞,腸道菌群失衡,大腸桿菌數(shù)量增加,這是造成斷奶仔豬腹瀉的重要原因。吳燕(2009)研究顯示,白頭翁湯各味藥均對大腸桿菌有抑制作用,但白頭翁湯合提效果要優(yōu)于單味藥分提。李云海(2012)發(fā)現(xiàn)白頭翁湯可以使結(jié)腸黏膜TFF3基因表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.05),從而修復(fù)損傷結(jié)腸黏膜。郁金不但具有抑菌和保護(hù)腸黏膜作用,還具有緩解寒性腹瀉的作用(楊之冷等,2017),與白頭翁配伍可以減少藥物寒性對仔豬胃腸產(chǎn)生的不良刺激。仔豬味覺較為敏感,松針粉的甜味可減少中草藥對仔豬采食量的影響,并且松針粉蛋白質(zhì)含量高,富含氨基酸、維生素和微量元素,對仔豬的生長也有促進(jìn)作用 (王京仁等,2015)。本試驗(yàn)后期IV組ADG、ADFI提升明顯,原因可能是前、中期仔豬采食量受中草藥添加劑影響較大影響了生長性能,但隨著飼喂時間增加,仔豬耐受能力增強(qiáng),ADG、ADFI恢復(fù)正常。
表2 加味郁金散對斷奶仔豬生長性能的影響
表3 加味郁金散對斷奶仔豬血清免疫指標(biāo)的影響mg/mL
免疫球蛋白是動物機(jī)體免疫系統(tǒng)的關(guān)鍵組成部分,IgA是分泌型的免疫球蛋白,具有抗菌、抗病毒和促進(jìn)局部黏膜免疫的作用。IgG是血液中主要的免疫球蛋白,作用時間長,可抵抗外界病毒和病原菌的入侵,中和細(xì)菌毒素的毒性,調(diào)理、凝聚和沉淀抗原。IgM是動物初次免疫應(yīng)答早期階段產(chǎn)生的主要抗體,可在動物受病原感染后激活補(bǔ)體,發(fā)揮溶解病菌中和病毒等作用(張世昌等,2010)。本試驗(yàn)14、21 d加味郁金散組IgA、IgG水平比抗生素組顯著提升(P<0.05),說明加味郁金散可以提高斷奶仔豬自身免疫水平。中草藥中含有的苷類、生物堿、有機(jī)酸、揮發(fā)油等免疫活性物質(zhì),對機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能均具有增強(qiáng)作用(郭愛偉等2008)。黃芪對動物體液免疫及細(xì)胞免疫有調(diào)節(jié)作用,對單核吞噬細(xì)胞吞噬有增強(qiáng)作用,可以激活免疫器官功能,刺激T、B淋巴細(xì)胞功能從而提高機(jī)體免疫(黃一帆等,1996)。黃芩甙能顯著提高小鼠B細(xì)胞分泌IgM的水平,從而提高血清中IgM含量,還可明顯增加血清IgG含量(蔡仙德等,1995)。本試驗(yàn)前期IgA、IgG、IgM各組間差異不顯著,但中后期抗生素組出現(xiàn)下降,可能是由于連續(xù)使用抗生素抑制了正常菌群中的有益微生物,破壞機(jī)體內(nèi)相對穩(wěn)定的生態(tài)屏障,改變腸道菌群的構(gòu)成和功能,從而抑制腸道免疫系統(tǒng)的發(fā)育,影響了機(jī)體免疫力(肖宏德,2014)。本試驗(yàn)后期抗生素組仔豬腹瀉率顯著高于加味郁金散組,可能是由于連續(xù)使用抗生素使斷奶仔豬免疫力下降,對仔豬腸道菌群產(chǎn)生不良影響,進(jìn)而導(dǎo)致胃腸功能紊亂產(chǎn)生腹瀉。
在飼糧中添加加味郁金散可以提高斷奶仔豬生長性能和降低腹瀉率,另外,還能提升斷奶仔豬IgA、IgG、IgM水平從而提高免疫力,綜合應(yīng)用效果優(yōu)于抗生素組,其中添加量為0.1%時效果最好。
參考文獻(xiàn)
[1]蔡仙德,譚劍萍.黃芩甙對小鼠體液免疫的調(diào)節(jié)作用[J].南京鐵道醫(yī)學(xué)院學(xué)報,1995,14(3):151 ~ 153.
[2]郭愛偉,朱靜,陳紛紛,等.中草藥的免疫調(diào)節(jié)作用研究進(jìn)展[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2008,29(11):64 ~ 67.
[3]國家中醫(yī)藥管理局,《中華本草》編委會.中華本草[M].上海:上??茖W(xué)技術(shù)出版社,1999.
[4]黃一帆,姚金水,李沁光.中草藥添加劑對蛋用雛雞免疫功能的影響[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,1996,5(5):10 ~ 12.
[5]李云海.加味白頭翁湯對潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸粘膜損傷修復(fù)作用的機(jī)理研究[D].湖北:湖北中醫(yī)藥大學(xué),2012,51~53.
[6]劉鐘杰,許劍琴.中獸醫(yī)學(xué)[M].第三版.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002.
[7]王京仁,李淑紅,彭敬,等.復(fù)方中草藥飼料添加劑對仔豬生長性能及血清蛋白的影響[J].畜牧科學(xué),2015,6:126~127.
[8]吳燕.“白頭翁湯”、仔豬大腸桿菌性腹瀉與硒相關(guān)性研究[D].四川:四川農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.
[9]肖宏德,肖運(yùn)才,何熙,等.用益生菌制劑代替斷奶仔豬日糧中抗生素的研究[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2014,35(3):53 ~ 58.
[10]楊淑娟,鄭天珍,瞿頌義.郁金對胃平滑機(jī)條運(yùn)動的影響[J].寧波大學(xué)學(xué)報,2004,17(2):228 ~ 229.
[11]楊之冷、沙珊焱、解柯,等.基于實(shí)寒證大鼠模型對郁金寒熱性的探討[J].數(shù)理醫(yī)藥學(xué)雜志,2017,30(2):223 ~ 225.
[12]張世昌,王志祥.復(fù)方中草藥添加劑對斷奶仔豬生長性能和免疫機(jī)能的影響[J].養(yǎng)豬,2010,3:17 ~ 19.
[13]左之才,劉兵,李莉,等.早期斷乳應(yīng)激性腹瀉對仔豬腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)與腸道菌群的影響[J].中國獸醫(yī)科學(xué),2012,42(1):64 ~ 68.