談?wù)剬嶒灲虒W(xué)的成與敗

趙志豐

一、綠葉中色素的提取和分離

這個實驗存在的問題是，把過濾液收集到試管用棉塞塞緊，濾液會分層，上層色較淡，色素較少，做實驗效果差一些，色素層淡，看不清，易消失；畫濾液細(xì)線要用下層濾液。

第一，可以用新儀器研磨過濾器代替試管，粗濾液可以在研磨過濾器中再研磨，繼續(xù)浸泡提取色素，保存濾液，濾液顏色深，色素多，有利于提高實驗效果。研磨過濾器單獨來做實驗，就是研磨作用有限，研磨桿易梗塞，掉落濾網(wǎng)罩，一些學(xué)生容易把材料裝錯了，裝入研磨桿中，使材料研磨不著。研磨過濾器使用方法要詳細(xì)講解和演示，它是反向過濾的；還有一點要注意的：研磨過濾器用水洗后，容易積水在里面，洗后要抖去研磨桿里的水，實驗后要把底座（外套筒）與研磨桿分開晾干；連續(xù)兩節(jié)課間，把研磨過濾器的濾液及葉泥倒掉，刮干凈就可以了再用。避免學(xué)生把過濾液放在燒杯（層析用的）中，層析前，又要把燒杯洗干凈，燒杯壁上有水，會嚴(yán)重影響到層析的效果。

第二，藥品、材料用量，二氧化硅（細(xì)沙）、碳酸鈣粉末用量1/3或1/4藥勺，菠菜、無水乙醇的量減半，即菠菜葉2.5g，無水乙醇5mL，研磨起來不會太費勁，易充分研磨，耗時少一些，濾液足夠用，濾液不致太稀。層析液中的苯不可省略，苯有助于胡蘿卜素的層析，層析后出現(xiàn)四條色素帶。只含有石油醚丙酮的層析液，層析的結(jié)果是：上面是淺色素帶，無法正常分層。最好使用層析液原配方。

第三，注意濾紙條的干燥；印濾液細(xì)線后及時用電吹風(fēng)吹干，第一次畫濾液細(xì)線，細(xì)線可能擴(kuò)散，及時干燥再劃線就不易再擴(kuò)散了。濾紙條放在桌面要防止弄濕，研缽使用后，水洗之后，擦干再倒扣晾干；層析用的燒杯不要裝過濾液，要保持干凈，層析后，把層析液回收，燒杯加蓋不要水洗，避免水分對層析的不良影響；燒杯壁有水珠要及時用紙巾擦干。

第四，層析燒杯上蓋板的使用，有助于濾紙條的安放及防止層析液的揮發(fā)。蓋板可以用鋁塑板制作，切割成小段長方形，兩片鋁塑片蓋在100mL燒杯上，中間的縫就可以插入濾紙條，濾紙條在適當(dāng)高度（7cm左右相當(dāng)于燒杯底到鋁塑片上的距離）折一個直角，放入燒杯里進(jìn)行層析，就不會移動了，比較穩(wěn)定。

二、如何提升《觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂》的實驗效果

這個實驗是高中生物較難做的實驗，因為是顯微裝片的制作，觀察的是分裂期細(xì)胞中的染色體，較細(xì)微，在低倍鏡下，要仔細(xì)觀察，才能找到，分裂期較短，分裂期細(xì)胞所占比例較小，這些增加了實驗難度，還有，統(tǒng)編教材中，實驗材料，實驗設(shè)計也存在一些不足和缺點，第一，通過一些實驗探究，0.01g/mL龍膽紫染色液濃度太高（室溫20度左右），一半（0.005g/mL）也較高，0.002g/mL龍膽紫染色液染2.5～3min，比較合適。第二，還有洋蔥根要長到5cm才剪根尖，時間太長，長1至2cm就可以剪了，這時細(xì)胞的生長分裂也較快，洋蔥的根經(jīng)常不夠用，用大蒜代替；有條件的話，最好把根預(yù)處理一下，如大蒜的根長到1至2cm時，把大蒜和培養(yǎng)皿一起轉(zhuǎn)入冰箱冷藏，幾小時或十幾小時，讓細(xì)胞分裂停頓下來，提高分裂細(xì)胞的比例。第三，根解離后，根尖生長點細(xì)胞容易分散、丟失，染色前，根尖最好要用鑷子或蓋玻片壓兩下，使根尖展開，有利于均勻染色，有利于根尖里面的分裂細(xì)胞的染色體的染色，因此染色最好在載玻片上進(jìn)行；以免染色后的根尖，分不清生長點，還是成熟區(qū)，不慎夾到生長點，把分生組織夾碎，或已經(jīng)壓散的根尖不便于轉(zhuǎn)移，組織碎片容易丟失在培養(yǎng)皿的溶液中或被吸水紙吸走；減少分生組織、分裂細(xì)胞，容易導(dǎo)致實驗失??；第四，用手指按壓分散細(xì)胞，多數(shù)情況下，分散不開，對染色體的觀察不利，還需要用震動來分散。在臨時裝片的蓋玻片一側(cè)加1、2滴水，過一分鐘后，蓋上塑料片，再用手指或鉛筆木頭端輕輕敲擊，要用“輕功”，用輕巧、輕微的力道，有利于細(xì)胞分散，又不易損壞玻片，蓋玻片易碎，多敲擊，要它不碎，確實很難說。但適當(dāng)?shù)那脫粲欣诩?xì)胞的分散展開，有利于染色體的觀察。另外，可以同時用兩條根尖制作一個裝片，不過兩個根尖要分開0.5cm以上，細(xì)胞才不會太密集。

如果用改良苯酚品紅染色，預(yù)先把解離漂洗后的根尖，直接轉(zhuǎn)入品紅染液中染色十幾小時，制作裝片時，用過濾網(wǎng)把根尖濾出，再轉(zhuǎn)入稀醋酸溶液或2%葡萄糖溶液中，防止根尖細(xì)胞吸水膨脹，根尖分叉裂開，引起組織碎片的丟失。用這種染液染色，染色效果好，分裂相較清晰，只要根尖細(xì)胞生長較旺盛，粗壯，有分裂的細(xì)胞，制片技術(shù)過關(guān)，多數(shù)能找到分裂的細(xì)胞。有時候，根尖染色的時間過久，轉(zhuǎn)入清水時間久，不易分散開時，可以再用1/2濃度的鹽酸解離液處理2～3min，漂洗5～8min，再制作裝片，則細(xì)胞易分散開，染色體清晰可見，間期染色深的細(xì)胞核有些脫色，但不會影響分裂細(xì)胞的觀察。制作成功的臨時裝片，需要一些時間，還要耐心找，因此好的裝片要保存起來，可以用甘油來保存，有保水作用。方法是：在裝片的蓋玻片一側(cè)加一小滴甘油，不能加太多，避免吸水多，蓋玻片浮起移位。把裝片放入培養(yǎng)皿中，加少量清水，不漫過載玻片，蓋上培養(yǎng)皿蓋，放入冰箱冷藏室保存，可以使用幾天，進(jìn)行演示教學(xué)。

學(xué)生分組實驗的成功率與多種因素有關(guān)，藥品及儀器設(shè)備、選材，實驗的方法步驟（一些實驗可能一個關(guān)鍵步驟失誤了，滿盤皆輸），師生的素質(zhì)及操作能力等等有關(guān)，教師和實驗員勇于創(chuàng)新，從實際出發(fā)，不唯書，在實驗教學(xué)中，做一個有心人，發(fā)現(xiàn)實驗過程的一些失誤，及時糾正，對于提高實驗的成功率有大的作用，如果漠視這些失誤，則實驗成功率會下降，一些難的實驗會難上加難。總之，對實驗教學(xué)要引起足夠重視，它能提高學(xué)生的動手實踐能力，有利于學(xué)生的素質(zhì)教育；要投入，要用心去做，不要輕言放棄，難做的實驗也會做好。