李昊
摘要:豬赤霉烯酮中毒是由于食入過多霉變玉米而引起,是一種對(duì)動(dòng)物和人具有較大危害的霉菌毒素中毒,主要是引起繁殖障礙、免疫抑制,誘發(fā)腫瘤,影響生長發(fā)育等,盡管具有較低的死亡率,但依舊會(huì)損害養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益?,F(xiàn)介紹玉米赤霉烯酮的理化性質(zhì),以及豬中毒后的臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查、防治措施。
關(guān)鍵詞:豬;赤霉烯酮中毒;理化性質(zhì);臨床癥狀;剖檢變化;實(shí)驗(yàn)室檢測(cè);藥物治療;飼料管理
中圖分類號(hào):S858. 28
文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B
文章編號(hào):2095-9737(2018)05-0096-01
1 赤霉烯酮的理化性質(zhì)
赤霉烯酮也叫做F- 2毒素,共有12個(gè)化學(xué)衍生物。赤霉烯酮是由鐮孢菌屬真菌生成的一種非類固醇類真菌毒素,具有雌激素作用,同體內(nèi)雌二醇受體之間存在特殊的親和力。赤霉烯酮無法在水、四氧化碳和二硫化碳中溶解,可在堿性溶液、甲醇、乙醇、乙醚、氯仿以及苯等中溶解。赤霉烯酮溶解在甲醇溶液后,照射254 nm短紫外光會(huì)發(fā)出明亮的綠藍(lán)色熒光。赤霉烯酮具有內(nèi)酯結(jié)構(gòu),因此在堿性條件下能夠打開酯鍵,而在堿性濃度降低時(shí)酯鍵就會(huì)恢復(fù)。
2 臨床癥狀及剖檢變化
臨床上豬發(fā)生赤霉烯酮中毒可呈現(xiàn)兩種類型,即急性中毒和慢性中毒。豬發(fā)生急性中毒時(shí),主要表現(xiàn)出興奮不安,全身肌肉振顫,步態(tài)蹣跚,往往會(huì)突然倒地死亡。另外,伴有黏膜發(fā)紺,體溫基本沒有明顯改變,神情呆立,排出水樣稀糞,呈灰褐色,其中混雜腸黏液,并散發(fā)惡臭味,經(jīng)常排尿,尿液呈淡黃色。此外,病豬外生殖器發(fā)生腫脹,精神沉郁,食欲不振,發(fā)生腹瀉,并伴有腹痛。慢性中毒時(shí),主要會(huì)給母豬造成較大危害,造成其外生殖器充血、腫大,容易發(fā)生延期流產(chǎn)和產(chǎn)出死胎,有時(shí)還會(huì)產(chǎn)木乃伊胎。另外,患病母豬中大約有50%會(huì)發(fā)生卵巢囊腫,容易出現(xiàn)經(jīng)常發(fā)情和假發(fā)情的現(xiàn)象;育成母豬的乳房明顯腫大,自行泌乳,且會(huì)引發(fā)乳房炎,導(dǎo)致受胎率降低。此外,公豬發(fā)生中毒后會(huì)導(dǎo)致包皮積液,食欲減退,生長發(fā)育不良,且嚴(yán)重掉膘。
剖檢急性死亡的病豬,發(fā)現(xiàn)胸、腹腔大量出血,漿膜表面存在淤血斑,肩胛下區(qū)和大腿前的皮下肌肉發(fā)生出血,腸道也發(fā)生出血,肝臟出現(xiàn)針尖狀或者瘀斑狀的出血,心內(nèi)外膜也都存在明顯出血。剖檢慢性死亡的病豬,主要是胸腹腔積液,肝臟發(fā)生硬變,肝脂肪發(fā)生變性,肝細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)顆粒狀的透明樣變性,腎臟變得蒼白,發(fā)生腫大,腸道出血,有時(shí)結(jié)腸漿膜發(fā)生膠樣浸潤,淋巴結(jié)發(fā)生水腫、充血。
3 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
毒素提取。取20 g豬場(chǎng)玉米粉料,添加適量清水制成30%的混懸液,放入120 mL二氯甲烷于索氏提取器中處理16 h,在達(dá)到高濃度色素時(shí)將二氯甲烷轉(zhuǎn)移到蒸發(fā)器中不斷進(jìn)行濃縮,直到變成糖漿狀黏稠,但注意不可徹底蒸干。接著將其轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,然后使用石油醚進(jìn)行沖洗,再添加50 mL乙腈充分振蕩,使其完全混合,靜置待其分層,在底部的乙腈層中就含有赤霉烯酮,而上部石油醚層中含有大多數(shù)色素。如果發(fā)生乳化或者轉(zhuǎn)化現(xiàn)象,可加入少量的石油醚進(jìn)行矯正。分取乙腈層后,再在上部的石油醚層中加入25 mL乙腈繼續(xù)提取赤霉烯酮,混合乙腈提取物,之后轉(zhuǎn)移到小錐形管(注意帶有刻度)中,接著添加二氯甲烷或者氯仿,直至達(dá)到4 mL,用于進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。
薄層層析。取厚度為0. 25 mm的硅膠G薄層板,放在100℃條件下進(jìn)行1h活化,接著在薄層板上滴加50 μL之前制備的提取物,再使用95:5氯仿 乙醇作為展開劑,待展開后放在紫外燈下進(jìn)行檢查,詳細(xì)記錄Rf值,之后同標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行對(duì)照,再詳細(xì)記錄結(jié)果。
檢測(cè)結(jié)果。通過紫外線燈檢查能夠看到藍(lán)綠色的熒光點(diǎn),其相應(yīng)Rf值為0.5,放在長波(450 nm)紫外線燈下照射會(huì)促使熒光強(qiáng)度增大;在薄層板上分離后的純化物,噴灑50%硫酸鉀醇溶液進(jìn)行處理,可使樣點(diǎn)馬上變成淡綠色,接著又快速變成黃色。這些情況都是赤霉烯酮的特有現(xiàn)象,由此可說明玉米樣品中存在赤霉烯酮。另外,通過與標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較,即可進(jìn)一步計(jì)算玉米樣品中所含的赤霉烯酮量。
4 防治措施
藥物治療。病豬要先立即停止飼喂霉變玉米,改成飼喂品質(zhì)優(yōu)良的玉米,并供給充足的糖鹽水,同時(shí)增加飼喂一些青綠多汁飼料。如果病豬癥狀嚴(yán)重,可靜脈注射由200~500 mL 10%葡萄糖注射液、5~10 mL維生素B1、10~20 mL維生素C組成的混合溶液,每天1次,連用5天。通過以上措施,經(jīng)過10天就能夠減輕病情,經(jīng)過2周即可痊愈。
嚴(yán)格檢查飼料原料。污染的谷實(shí)類作物中通常都含有赤霉烯酮,如玉米、小麥、大麥等,因此要求嚴(yán)控飼料原料關(guān)。例如,要仔細(xì)檢查玉米是否發(fā)生霉變,通過感官檢查可見新鮮玉米有整齊籽粒,沒有發(fā)酵、結(jié)塊,不存在蟲體,沒有殘留農(nóng)藥,散發(fā)新鮮玉米氣味,沒有霉味、酸敗味、異味。我國規(guī)定玉米等谷物及其制品,如玉米面(渣、片)、小麥粉等,每千克所含的赤霉烯酮在60 mg以下。
加強(qiáng)飼料管理。任何喂豬的飼料或者所用的原材料,必須儲(chǔ)存在陰涼、通風(fēng)的地方,防止溫度過高和受潮。如果玉米發(fā)生嚴(yán)重霉變,明顯變綠,建議進(jìn)行報(bào)廢處理。也可添加其他有機(jī)酸類及其鹽類,如苯甲酸、山梨酸、乙酸以及其鹽類,現(xiàn)在通常使用復(fù)合酸用于抑制霉菌。