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    外源IBA對(duì)薄殼山核桃嫩枝扦插及其生根過程中相關(guān)酶活性的調(diào)控效應(yīng)

    2018-05-10 09:21:46姜宗慶李成忠湯庚國
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年7期
    關(guān)鍵詞:插穗不定根薄殼

    姜宗慶, 李成忠, 余 樂, 湯庚國,2

    (1.江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院,江蘇泰州 225300; 2.南京林業(yè)大學(xué)森林資源與環(huán)境學(xué)院,江蘇南京 210037)

    薄殼山核桃(CaryaillinoensisK. Koch)別稱長山核桃、美國山核桃,為胡桃科山核桃屬落葉喬木,原產(chǎn)美國或墨西哥,我國將其作為一種多用途樹種將其引進(jìn)種植。扦插是較普遍的一種植物無性繁殖方法,廣泛應(yīng)用于各類苗木的繁殖。薄殼山核桃扦插繁殖較為困難[1-2],我國在這方面的研究報(bào)道相對(duì)較少,尚處于試驗(yàn)摸索階段。有研究發(fā)現(xiàn),植物插穗經(jīng)植物生長調(diào)節(jié)劑處理,能促進(jìn)其扦插生根[3-5],而相關(guān)酶在植物扦插生根過程中會(huì)發(fā)揮重要的作用,與不定根關(guān)系密切的酶有超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、吲哚乙酸氧化酶(IAAO),但是研究結(jié)論不完全一致[6-10]。因此,筆者通過研究外源吲哚丁酸(IBA)對(duì)薄殼山核桃嫩枝扦插及其生根過程中相關(guān)酶活性的調(diào)控效應(yīng),以期為薄殼山核桃扦插繁育技術(shù)的推廣及深入了解薄殼山核桃嫩枝扦插生根的有關(guān)生理調(diào)控機(jī)制提供一定的理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料的準(zhǔn)備

    本試驗(yàn)于2015年6月28日在江蘇農(nóng)牧科技職業(yè)學(xué)院園林試驗(yàn)基地進(jìn)行,選取2年生薄殼山核桃實(shí)生苗上長出的生長健壯、無病蟲害、生長基本一致的半木質(zhì)化枝條,剪成長 8~12 cm 的插穗,剪口上平下斜,上切口離頂部芽1~2 cm,下切口離底部芽1 cm以內(nèi),留1~2張葉,保留頂芽,插穗基部保濕,備用。扦插基質(zhì)選用珍珠巖、蛭石體積比為1 ∶1進(jìn)行混合,扦插前用0.3%高錳酸鉀溶液對(duì)基質(zhì)進(jìn)行澆灌消毒。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 低濃度IBA浸泡處理 分別配制濃度為50、100、150、200、250、300 mg/L的IBA溶液,以清水處理為對(duì)照,將插穗基部插入溶液中浸泡1 h;扦插,采用全自動(dòng)噴霧裝置補(bǔ)濕,間隔30 min噴霧1次,持續(xù)20 s,后期減少噴霧次數(shù)。每個(gè)處理60根,重復(fù)3次。

    1.2.2 高濃度IBA速蘸處理 分別配制濃度為1 000、2 000、3 000、4 000、5 000、6 000 mg/L的IBA溶液,以清水處理為對(duì)照,將插穗基部在溶液中速蘸10~15 s;扦插,采用全自動(dòng)噴霧裝置補(bǔ)濕,間隔30 min噴霧1次,持續(xù)20 s,后期減少噴霧次數(shù)。每個(gè)處理60根,重復(fù)3次。

    1.2.3 扦插生根的生理機(jī)制 基于2015年試驗(yàn)結(jié)果,2016年6月25日開始進(jìn)行扦插生根相關(guān)生理機(jī)制的研究。設(shè)IBA 200 mg/L 、清水(對(duì)照)2個(gè)處理,將插穗基部浸泡1 h,每個(gè)處理60根,重復(fù)3次。扦插前采樣1次,扦插后每隔7 d采樣1次,共計(jì)采樣7次,樣品置于-60 ℃冰柜中保存,備用。測(cè)定時(shí),將插穗韌皮部和木質(zhì)部分離,取基部2 cm處的韌皮部組織,剪碎,待測(cè)。

    1.3 測(cè)定指標(biāo)及方法

    1.3.1 生根性狀指標(biāo)的測(cè)定 扦插42 d后,調(diào)查統(tǒng)計(jì)不同IBA處理的插穗生根率、平均生根數(shù)和平均根長。

    1.3.2 相關(guān)酶活性的測(cè)定 分別采用氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)光化還原法、二氯酚比色法、愈創(chuàng)木酚比色法測(cè)定SOD、IAAO、POD活性[11-12]。

    1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

    采用Excel 2013軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 低濃度IBA浸泡處理對(duì)薄殼山核桃插條扦插生根的影響

    由表1可見,低濃度IBA浸泡處理薄殼山核桃插穗,其生根率、平均生根數(shù)、平均根長高于清水處理(對(duì)照),具體表現(xiàn)為200 mg/L>250 mg/L>150 mg/L>300 mg/L>100 mg/L>50 mg/L>CK;隨IBA浸泡濃度的升高,薄殼山核桃插穗的生根率、平均生根數(shù)、平均根長呈先上升后下降趨勢(shì),IBA濃度過高會(huì)抑制薄殼山核桃插條的生根;200 mg/L IBA浸泡處理的插條生根效果相對(duì)較好,其生根率為63.26%,平均生根數(shù)為5.22條,平均根長13.73 cm。

    表1低濃度IBA浸泡處理對(duì)薄殼山核桃插條扦插生根的影響

    2.2 高濃度IBA速蘸處理對(duì)薄殼山核桃插條扦插生根的影響

    由表2可見,速蘸清水時(shí)薄殼山核桃插條的生根率僅為4.65%,平均生根數(shù)為1.04條,平均根長為1.98 cm,均明顯低于高濃度IBA速蘸處理;IBA速蘸處理時(shí)薄殼山核桃插條的生根率、平均生根數(shù)排序?yàn)? 000 mg/L>4 000 mg/L>5 000 mg/L>6 000 mg/L>2 000 mg/L>1 000 mg/L>CK,其中3 000 mg/L IBA速蘸處理時(shí)插條的生根率、平均生根數(shù)相對(duì)最高,而平均根長大小依次為4 000 mg/L>5 000 mg/L>3 000 mg/L>6 000 mg/L>2 000 mg/L>1 000 mg/L>CK,其中4 000 mg/L IBA速蘸處理的平均根長相對(duì)最長;高濃度IBA速蘸處理對(duì)薄殼山核桃插條扦插生根的調(diào)控效應(yīng)較為明顯,隨IBA處理濃度的升高,其生根率、平均生根數(shù)、平均根長呈先上升后下降趨勢(shì),3 000 mg/L IBA速蘸處理的插條,其生根率可達(dá)58.36%,平均生根數(shù)為4.35條,平均根長為 11.83 cm,生根效果相對(duì)較好。

    表2高濃度IBA速蘸處理對(duì)薄殼山核桃插條扦插生根的影響

    2.3 薄殼山核桃插條扦插生根過程中相關(guān)酶活性的變化

    2.3.1 SOD活性 由圖1可見,清水處理的插穗其SOD活性隨扦插后時(shí)間的推移呈持續(xù)下降趨勢(shì),而200 mg/L IBA浸泡處理的插穗其SOD活性呈先上升后下降趨勢(shì),扦插后21 d達(dá)到峰值,這可能是由于插穗內(nèi)貯藏的營養(yǎng)物質(zhì)逐步消耗,生成的新不定根還不能從扦插基質(zhì)中吸收養(yǎng)分,從而導(dǎo)致清水處理的插穗抗逆性下降;IBA浸泡處理的插穗SOD活性明顯高于清水處理,且扦插21 d后,SOD活性仍處于較高水平,說明IBA處理可促進(jìn)插穗SOD的累積,從而減弱自由基對(duì)植物細(xì)胞的傷害,延緩插穗老化,為其不定根的形成提供保障,在一定程度上促進(jìn)了薄殼山核桃嫩枝扦插苗的生根。

    2.3.2 POD活性 由圖2可見,清水處理的插穗,其POD活性呈先緩慢下降后逐步上升趨勢(shì),變化幅度相對(duì)較小,扦插后21 d POD活性達(dá)到谷值;200 mg/L IBA浸泡處理的插穗,其POD活性呈先大幅上升后緩慢下降趨勢(shì),扦插后28 d POD活性達(dá)到峰值,POD活性處于較高水平,這表明IBA浸泡處理能夠明顯提高薄殼山核桃插穗的POD活性,插穗基部細(xì)胞活躍,有利于插穗基部愈傷組織的形成,從而促進(jìn)不定根根系的生長。

    2.3.3 IAAO活性 由圖3可見,清水處理的薄殼山核桃插穗,其IAAO活性呈“上升—下降—上升”趨勢(shì);200 mg/mL IBA處理的薄殼山核桃插穗,其IAAO活性在扦插后呈先下降后略有上升趨勢(shì),IAAO活性水平總體相對(duì)較低,這可能是由于IBA經(jīng)切口進(jìn)入插穗組織內(nèi)部快速轉(zhuǎn)化成吲哚乙酸(IAA),從而抑制了IAAO的活性,這對(duì)不定根的生成是有利的,而后期大量不定根形成,IAA合成減弱,致使IAAO活性又略有上升。

    3 結(jié)論與討論

    扦插是生產(chǎn)上普遍采用的苗木繁殖方法之一,操作方便、育苗速度相對(duì)較快、繁殖系數(shù)高[13-15]。本試驗(yàn)研究外源IBA對(duì)薄殼山核桃嫩枝扦插及其生根過程中相關(guān)酶活性的調(diào)控效應(yīng),結(jié)果表明,低濃度IBA浸泡處理的薄殼山核桃插穗,其生根率、平均生根數(shù)、平均根長都高于清水處理(對(duì)照),具體表現(xiàn)為200 mg/L>250 mg/L>150 mg/L>300 mg/L>100 mg/L>50 mg/L>CK,其中200 mg/L IBA浸泡處理的插條生根效果較好,生根率為63.26%,平均生根數(shù)為5.22條,平均根長為13.73 cm;高濃度IBA速蘸處理對(duì)薄殼山核桃扦插生根的調(diào)控效應(yīng)明顯,隨IBA處理濃度的升高,插條的生根率、平均生根數(shù)、平均根長呈先上升后下降趨勢(shì),其中3 000 mg/L IBA速蘸處理的插條生根效果較好,生根率達(dá)58.36%,平均生根數(shù)為4.35條,平均根長達(dá)11.83 cm。

    前人研究表明,植物扦插生根與插穗內(nèi)的相關(guān)酶活性關(guān)系密切[6-10]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,清水處理的插穗,其SOD活性隨扦插后時(shí)間的推移呈持續(xù)下降趨勢(shì);200 mg/L IBA浸泡處理的插穗,其SOD活性呈先上升后逐漸下降趨勢(shì),扦插后21 d達(dá)到峰值;IBA浸泡處理的插穗,其SOD活性明顯高于對(duì)照,且處于較高水平,表明IBA處理可促進(jìn)插穗中SOD的積累,活性升高,從而減弱自由基對(duì)植物細(xì)胞的傷害,延緩插穗老化,可為其不定根的形成提供保障;清水處理的插穗,其POD活性呈先緩慢下降后逐步上升趨勢(shì),而用200 mg/L IBA浸泡處理的插穗其POD活性呈先大幅上升后有所下降趨勢(shì),扦插后28 d達(dá)到峰值,表明IBA浸泡處理能夠明顯提高插穗的POD活性,插穗基部細(xì)胞活躍,有利于插穗基部愈傷組織的形成;清水處理的插穗IAAO活性呈“上升—下降—上升”趨勢(shì),IBA處理的薄殼山核桃插穗,其IAAO活性在扦插后呈先下降后略有回升趨勢(shì),總體活性水平相對(duì)較低,這可能是IBA經(jīng)切口進(jìn)入插穗組織內(nèi)部快速轉(zhuǎn)化成IAA,從而抑制了IAAO活性,這對(duì)不定根的生成是有利的。

    總之,采用濃度200 mg/L IBA浸泡處理薄殼山核桃插條,可以促進(jìn)薄殼山核桃扦插苗的生根,達(dá)到相對(duì)較好的生根效果。

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