SNCA基因多態(tài)性與PD患者發(fā)病和臨床特征的相關(guān)性分析

田小軍，郝潔，邢紅霞，趙建華，郭雙喜，蘇洲，杜佳，王玉梅

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 衛(wèi)輝 453100)

帕金森?。≒D）是臨床上常見的中老年人中樞性神經(jīng)系統(tǒng)病變[1，2]，臨床表現(xiàn)為“四主征”癥狀，其病理基礎(chǔ)是黑質(zhì)多巴胺（DA）能神經(jīng)元變性缺失和形成路易小體，在我國(guó)該病具有較高的發(fā)病率，成為臨床關(guān)注的焦點(diǎn)問題之一[3-5]。目前對(duì)于PD的發(fā)病機(jī)制主流的看法認(rèn)為，其是在年齡老化的情況下遺傳因素和環(huán)境因素共同作用引起的[6，7]，據(jù)相關(guān)研究報(bào)道α-突觸核蛋白（SNCA）基因是PD的致病基因之一，無論家族性和散發(fā)型的PD都與SNCA基因關(guān)系密切[8-10]。SNCA基因具有多態(tài)性，因此其多態(tài)性對(duì)PD病發(fā)的影響成為學(xué)界研究的熱點(diǎn)。因此研究ɑ-突觸核蛋白（SNCA）基因多態(tài)性與帕金森?。≒D）發(fā)病和臨床特征的相關(guān)性，為PD的治療提供理論根據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院確診的80例PD患者（PD組），同時(shí)選取80例年齡、性別與之匹配的健康對(duì)象作為對(duì)照組，收治時(shí)間2014年1月至2017年1月。

PD組，男 48例、女 32例，年齡 58～86歲，平均69.8±8.2歲，受教育年限9.0±3.7年，合并疾?。焊哐獕?7例、糖尿病9例、高血脂6例。對(duì)照組，男 45 例、女 35 例，年齡 55～85 歲，平均 69.4±9.0歲，受教育年限9.5±3.5年，合并疾?。焊哐獕?1例、糖尿病12例、高血脂4例。2組患者的年齡、性別、受教育年限、合并疾病比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 納入排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn) ⑴PD患者的診斷參考人民衛(wèi)生出版社《神經(jīng)病學(xué)》（第七版）制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑵健康對(duì)照組來源于本院體檢中心體檢結(jié)果健康的自愿者，無PD癥狀、家族史；⑶均為漢族；⑷本研究獲得研究對(duì)象、醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)的知情同意。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ⑴伴有嚴(yán)重的肝腎功能疾?。虎瓢橛袊?yán)重的營(yíng)養(yǎng)不良、貧血；⑶免疫缺陷、免疫功能障礙；⑷各種原因所致的帕金森綜合征及帕金森疊加綜合征；⑸腦血管病史、顱腦外傷史；⑹合并精神性疾病。

1.3 檢測(cè)方法 采集受試者外周血，采用氯仿法提取患者外周血基因組DNA，根據(jù)SNCA基因的rs356200位點(diǎn)兩側(cè)序列，用Primer5.0軟件設(shè)計(jì)引物，采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）進(jìn)行擴(kuò)增，總反應(yīng)體系為20uL，PCR反應(yīng)為95℃，預(yù)變性2min，95℃、60℃和72℃各30s，72℃延伸5min， 共40個(gè)循環(huán)。將PCR酶切產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分離確定rs356200基因型。

1.4 研究方法 收集兩組的年齡、性別、民族、H-Y分級(jí)、帕金森病聯(lián)合評(píng)分量表（UPDRS）評(píng)分、帕金森病人生活質(zhì)量量表（PDQ39）評(píng)分、簡(jiǎn)明精神狀態(tài)檢查量表（MMSE）評(píng)分、首發(fā)癥狀類型，并按照SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因性別進(jìn)行分析。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)軟件采用SPSS 16.0，采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）進(jìn)行統(tǒng)計(jì)描述，三組間比較采用單因素方差分析法；計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)；P值＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因多態(tài)性比較 PD組的SNCA基因rs356200位點(diǎn)等位基因A所占比例67.50%顯著的高于對(duì)照組的 56.25%（P＜0.05）；PD 組的 SNCA 基因 rs356200位點(diǎn)A/A基因型所占比例36.25%顯著的高于對(duì)照組的 18.75%（P＜0.05）；（表 1）。

表1 兩組研究對(duì)象SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因多態(tài)性比較（x±s）

2.2 PD患者SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因型與患者臨床特征的關(guān)系 SNCA基因rs356200位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型三組PD患者的患者的年齡、性別、首發(fā)癥狀類型、UPDRS評(píng)分、PDQ39評(píng)分、MMSE評(píng)分比較，差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；（表 2）。

3 討論

帕金森?。≒D）又稱震顫麻痹，是臨床上常見的中老年人中樞性神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，其發(fā)病率僅次于阿爾茨海默病，臨床表現(xiàn)為“四主征”癥狀，包括運(yùn)動(dòng)遲緩、肌肉強(qiáng)直、靜止性震顫和步態(tài)姿勢(shì)異常，以路易(Lewy)小體形成、多巴胺能神經(jīng)元變性和功能缺失為病理基礎(chǔ)，由于發(fā)病機(jī)制尚不清楚，缺乏有效的治療手段，PD在臨床和學(xué)界廣受關(guān)注[11，12]。目前對(duì)于PD的發(fā)病機(jī)制主流的看法認(rèn)為，在年齡老化的情況下遺傳因素和環(huán)境因素共同作用引起的。據(jù)相關(guān)研究報(bào)道，PD的病理改變是由SNCA蛋白聚集小體造成的，因此α-突觸核蛋白（SNCA）基因被認(rèn)為是PD的致病基因之一[13]。SNCA蛋白分子量相對(duì)較小，可調(diào)節(jié)神經(jīng)可塑性、細(xì)胞分化和信號(hào)傳遞，其在體內(nèi)積聚可導(dǎo)致發(fā)生功能性障礙甚至神經(jīng)細(xì)胞死亡，而引起PD發(fā)病的SNCA蛋白聚集則是由基因的重復(fù)突變或者點(diǎn)突變引起。SNCA具有多態(tài)性，如rs356200和rs356165等多種基因位點(diǎn)，增加了SNCA蛋白的表達(dá)，從而增加了PD發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)，據(jù)相關(guān)報(bào)道稱無論家族性和散發(fā)型的PD都與SNCA基因多態(tài)性密切相關(guān)[14，15]。

表2 PD患者SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因型與患者臨床特征比較（x±s）

3.1 兩組研究對(duì)象SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因多態(tài)性比較 據(jù)相關(guān)研究表明，SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因是與PD發(fā)病的相關(guān)基因位點(diǎn)，而該基因位點(diǎn)具有多態(tài)性，因此其突變更有可能導(dǎo)致SNCA蛋白異常高表達(dá)，從而增加了SNCA的體內(nèi)水平，增加了其聚集的風(fēng)險(xiǎn)，從而更容易導(dǎo)致PD的病發(fā)，因此本文首先考察了SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因的多態(tài)性分布，以考察誘發(fā)PD病發(fā)的基因型，現(xiàn)結(jié)果如下：PD組的SNCA基因rs356200位點(diǎn)等位基因A所占比例顯著的高于對(duì)照組；PD組的SNCA基因rs356200位點(diǎn)A/A基因型所占比例顯著的高于對(duì)照組，以上結(jié)果均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這表明SNCA基因rs356200位點(diǎn)等位基因A和A/A基因型是誘發(fā)PD發(fā)病的危險(xiǎn)等位基因和基因型，在臨床上具有一定預(yù)測(cè)PD發(fā)病的作用。

3.2 PD患者SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因型與患者臨床特征的關(guān)系 為更為全面的考察PD病情的發(fā)展與SNCA基因rs356200位點(diǎn)基因多態(tài)性的關(guān)系，本文考察了PD組的SNCA基因rs356200位點(diǎn)A/A、A/G、G/G基因型與患者的年齡、性別、首發(fā)癥狀類型、UPDRS評(píng)分、PDQ39評(píng)分、MMSE評(píng)分組間比較，發(fā)現(xiàn)以上結(jié)果差異均不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，這表明SNCA基因rs356200位點(diǎn)基因的多態(tài)性與PD的臨床特征和病情嚴(yán)重程度不具有相關(guān)性，而可能是與環(huán)境因素關(guān)系更為密切。

綜上所述本文研究了ɑ-突觸核蛋白（SNCA）基因多態(tài)性與帕金森?。≒D）發(fā)病和臨床特征的關(guān)系，證明了SNCA基因rs356200位點(diǎn)等位基因A和A/A基因型是誘發(fā)PD發(fā)病的危險(xiǎn)等位基因和基因型，但其多態(tài)性與PD臨床特征和病情嚴(yán)重程度不具有相關(guān)性，而可能是與環(huán)境因素關(guān)系更為密切，因此SNCA基因rs356200位點(diǎn)的基因的多態(tài)性在臨床上具有一定預(yù)測(cè)PD發(fā)病的作用。

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