累積運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響

范錦勤 張麗美 張亞松 張玉麗 帥祥煜 張龍 王松濤

摘 要：為探討累積運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖機(jī)體內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥的影響及其機(jī)制，將8周齡SD雄性大鼠高脂膳食誘導(dǎo)肥胖，成模大鼠隨機(jī)分為高脂安靜組（B）、普食安靜組（C）、持續(xù)運(yùn)動(dòng)組（D）、中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)組（E）和高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)組（F），每組8只，運(yùn)動(dòng)組大鼠喂以普食，設(shè)正常體質(zhì)量普食安靜組（A，6只）。運(yùn)動(dòng)組進(jìn)行8周跑臺(tái)訓(xùn)練（0?，5 d/周）。D組跑速20 m/min （1～4周）和25 m/min（5～8周），60 min/次，1次/d。E組跑速與D組相同，12 min/次，5次/d，間歇60 min；F組跑速40 m/min（1～4周）和42 m/min（5～8周），6 min/次，5次/d，間歇60 min。各運(yùn)動(dòng)組跑動(dòng)總距離相等。肥胖成模時(shí)和末次訓(xùn)練后48 h，檢測(cè)體脂百分?jǐn)?shù)、血脂、脂肪組織炎癥指標(biāo)和巨噬細(xì)胞M1及M2表型。結(jié)果：（1）肥胖大鼠呈現(xiàn)血脂紊亂，內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞M1表型和M2表型極化失衡并呈慢性炎癥狀態(tài)。（2） 8周運(yùn)動(dòng)干預(yù)，3種方案均可控重減脂，改善血脂紊亂和內(nèi)臟脂肪巨噬細(xì)胞極化失衡，緩解慢性炎癥狀態(tài)。（3）對(duì)肥胖大鼠控重減脂效果由強(qiáng)至弱為：持續(xù)運(yùn)動(dòng)、高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)、中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。（4）對(duì)肥胖大鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的調(diào)節(jié)效應(yīng)由強(qiáng)至弱為：中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)、持續(xù)運(yùn)動(dòng)、高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。結(jié)果說(shuō)明規(guī)律的累積運(yùn)動(dòng)可有效降低肥胖機(jī)體的體脂、改善血脂代謝、降低脂肪組織慢性炎癥水平，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞極化有關(guān)。累積運(yùn)動(dòng)利于打破久坐生活方式，其與持續(xù)運(yùn)動(dòng)結(jié)合可能對(duì)健康干預(yù)的效果更全面。

關(guān) 鍵 詞：運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)；肥胖；累積運(yùn)動(dòng)；巨噬細(xì)胞極化；大鼠

中圖分類(lèi)號(hào)：G804.5 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-7116（2018）02-0135-10

Effects of accumulated exercise on the polarization of macrophages in

visceral adipose tissue of obese rats

FAN Jin-qin1，2，ZHANG Li-mei1，ZHANG Ya-song1，ZHANG Yu-li1，

SHUAI Xiang-yu1，ZHANG Long3，WANG Song-tao1

（1.School of Physical Education，South China Normal University，Guangzhou 510006，China；

2.School of Physical Education，Shaoguan University，Shaoguan 512005，China；

3.School of Physical Education，Liupanshui Normal University，Liupanshui 553004，China）

Abstract： In order to probe into the effects of accumulated exercise on the chronic inflammation of visceral adipose tissue of obese rats and the affecting mechanism， the authors randomly divided 8-week old male SD rats， which were obesity induced with high fat diet and model established， into a high fat diet control group （B）， an ordinary diet control group （C）， a continuous exercise group （D）， a medium intensity accumulated exercise group （E） ， and a high intensity accumulated exercise group （F）， each of which contains 8 rats， fed the rats in the exercise groups with ordinary diet， and set a normal body mass ordinary diet control group （A）， which contains 6 rats. The exercise groups carried out 8-week treadmill training （0°， 5 d/w）. Group Ds running speeds were 20 m/min （week 1-4） and 25 m/min （week 5-8）， 60 min/times， 1 times/d. Group Es running speeds were the same as group Ds， 12 min/times， 5 times/d， interval 60 min； Group Fs running speeds were 40 m/min （week 1-4） and 42 m/min （week 5-8）， 6 min/times， 5 times/d， interval 60 min. All the exercise groups had the same total running distance. The authors measured body fat percentage， blood fat， adipose tissue inflammation index and macrophages M1 and M2 phenotypes at obesity model establishment and 48 h after the last training. Results： 1） the obese rats showed a blood fat disorder， the polarization of macrophages M1 and M2 phenotypes in visceral adipose tissue was unbalanced and showed a chronic inflammation condition； 2） in 8 weeks of exercise intervention， all the 3 plans can control weight， reduce fat， improve blood fat disorder and the unbalance of polarization of macrophages in visceral fat， and relieve the chronic inflammation condition； 3） the effects of weight control and fat reduction on the obese rats from strong to weak were as follows： continuous exercise， high intensity accumulated exercise， medium intensity accumulated exercise； 4） the effects of regulation on the polarization of macrophages in visceral adipose tissue of the obese rats from strong to weak were as follows： medium intensity accumulated exercise， continuous exercise， high intensity accumulated exercise. The results indicate that regular accumulated exercise can effectively reduce an obese bodys fat， improve blood fat metabolism， reduce the level of chronic inflammation of adipose tissue， its mechanism may be related to regulating the polarization of macrophages in visceral adipose tissue. Accumulated exercise is conducive to breaking the sedentary lifestyle， and its combination with continuous exercise may have a more comprehensive effect on health intervention.

Key words： sports medicine；obesity；accumulated exercise；polarization of macrophage；rat

心血管疾?。ㄈ鐒?dòng)脈粥樣硬化和高血壓）、腫瘤（如結(jié)腸癌和乳腺癌）、慢性呼吸系統(tǒng)疾病和2型糖尿病等許多慢性非傳染性疾病都被認(rèn)為是慢性炎癥性疾病，而肥胖是慢性炎癥的誘發(fā)因素。內(nèi)臟脂肪組織的長(zhǎng)期慢性炎癥狀態(tài)是肥胖影響機(jī)體健康以及誘發(fā)多種慢性病的關(guān)鍵環(huán)節(jié)[1-2]。而巨噬細(xì)胞的經(jīng)典型激活（M1）和替代型激活（M2）失衡，則是肥胖機(jī)體內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥的始發(fā)因素[3]。正常飲食下脂肪組織中的巨噬細(xì)胞呈M2表型，分泌抗炎性因子和胰島素敏感因子，減輕組織炎癥反應(yīng)。當(dāng)肥胖引起脂肪組織微環(huán)境改變時(shí)，巨噬細(xì)胞多呈M1表型，產(chǎn)生促炎性因子并誘導(dǎo)胰島素抵抗[4-5]。因此，巨噬細(xì)胞M1和M2表型間的平衡（巨噬細(xì)胞極化）是探討慢性炎癥相關(guān)疾病發(fā)生機(jī)制和愈后效果的重要靶標(biāo)。研究表明，持續(xù)性運(yùn)動(dòng)（1 h/d，5 d/周，4周）可降低db/db小鼠附睪脂肪巨噬細(xì)胞M1表型并提高M(jìn)2表型[6]。但其他運(yùn)動(dòng)方式（如一天多次的短時(shí)運(yùn)動(dòng)、大強(qiáng)度間歇運(yùn)動(dòng)等）對(duì)內(nèi)臟脂肪組織炎癥及巨噬細(xì)胞表型的影響尚缺乏充足的研究證據(jù)。

久坐是當(dāng)前影響健康的主要不良生活方式，久坐時(shí)間與腰圍、脂肪含量、體重均呈獨(dú)立正相關(guān)[7]。研究證實(shí)規(guī)律的久坐間斷相比于一段集中時(shí)間的體力活動(dòng)，能更有效地降低餐后血糖和胰島素的升高幅度[8]。且將一天中的鍛煉分成多次短時(shí)間的運(yùn)動(dòng)，可能更適合長(zhǎng)期靜坐和肥胖等體能較差者[9]。這種針對(duì)久坐行為打斷而提出的一天多次短時(shí)間身體活動(dòng)，被稱為累積運(yùn)動(dòng)（accumulated exercise）[10-11]。目前累積運(yùn)動(dòng)的研究多為流行病學(xué)調(diào)查，基于內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞M1和M2表型的極化，對(duì)比分析累積運(yùn)動(dòng)和持續(xù)運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖機(jī)體慢性炎癥狀態(tài)影響的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。

本研究采用高脂膳食建立肥胖大鼠模型，隨后施加8周等機(jī)械功（跑動(dòng)總距離相同）而強(qiáng)度不同的2種累積運(yùn)動(dòng)和中強(qiáng)度持續(xù)運(yùn)動(dòng)，對(duì)比分析不同運(yùn)動(dòng)方案對(duì)肥胖機(jī)體內(nèi)臟脂肪慢性炎癥及巨噬細(xì)胞極化的影響，為確證累積運(yùn)動(dòng)的健康效應(yīng)，探索和推廣有助于打破久坐、更易實(shí)施的運(yùn)動(dòng)干預(yù)方式提供實(shí)驗(yàn)證據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

8周齡SPF級(jí)SD雄性大鼠85只[SCXK（粵）2011-0015；南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心]，體質(zhì)量240～270 g，分籠飼養(yǎng)，自然光照節(jié)律，溫度22～25 ℃，濕度40%～55%。

1.2 肥胖大鼠造模

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后分為普通膳食對(duì)照組（12只）和高脂膳食造模組（73只）。造模組喂以高脂飼料（蔗糖20%、豬油15%、膽固醇1.2%、膽酸鈉0.2%、酪蛋白10%、碳酸氫鈣0.6%、石粉0.4%、維生素0.4%、基礎(chǔ)飼料52.2%（均為質(zhì)量比）；SCXK（粵）2013-0002；廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心），自由攝食飲水；對(duì)照組給予維持飼料，自由飲水，攝食量以造模組日均攝食量提供。8周后按照造模組大鼠體質(zhì)量≥對(duì)照組大鼠體質(zhì)量均值的1.96個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差判斷為營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠[12]。從對(duì)照組和肥胖大鼠中隨機(jī)各選6只，雙能X線檢測(cè)體脂成分（ASY 00409，Hologic公司），結(jié)合大鼠體質(zhì)量、Lees指數(shù)和血脂等綜合評(píng)價(jià)造模效果。

1.3 分組及運(yùn)動(dòng)干預(yù)

原對(duì)照組大鼠作為正常體質(zhì)量普食安靜組（A，6只）。肥胖大鼠隨機(jī)分為5組：高脂安靜組（B，8只）、普食安靜組（C，8只）、持續(xù)運(yùn)動(dòng)組（D，8只）、中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)組（E，8只）、高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)組（F，8只）。B組給予高脂飼料，其他各組給予維持飼料。

運(yùn)動(dòng)組大鼠跑臺(tái)適應(yīng)2周后，進(jìn)行8周運(yùn)動(dòng)干預(yù)。坡度0?，周一至周五18：00-23：30，暗環(huán)境下訓(xùn)練。依據(jù)文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)設(shè)定運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度[13-14]，跑速分別采用10 m/min（45%～50% VO2max）、20和25 m/min（60%～65% VO2max）、40和42 m/min（85%～90% VO2max）。為保證大鼠除運(yùn)動(dòng)干預(yù)之外其它影響因素的一致性，在累積運(yùn)動(dòng)組訓(xùn)練期間，安靜各組和持續(xù)運(yùn)動(dòng)組大鼠置于相同場(chǎng)所，每隔60 min換籠1次，縮小籠具容積來(lái)限制大鼠非訓(xùn)練時(shí)間段的身體活動(dòng)。定期對(duì)各組大鼠的全日身體活動(dòng)進(jìn)行觀察記錄。每次訓(xùn)練包括準(zhǔn)備、主體和整理3個(gè)部分，3個(gè)部分的總跑動(dòng)距離在運(yùn)動(dòng)各組保持一致。具體運(yùn)動(dòng)方案見(jiàn)表1。

1.4 取材和檢測(cè)

每周日測(cè)大鼠空腹體質(zhì)量和麻醉狀態(tài)下體長(zhǎng)，計(jì)算Lees指數(shù)。Lees指數(shù)=（體質(zhì)量（g）×1 000）1/3/體長(zhǎng)（cm）][15]。運(yùn)動(dòng)干預(yù)最后1周，雙能X線檢測(cè)體成分。末次訓(xùn)練后48 h，處死大鼠，腹主動(dòng)脈取血，分離血清；剝?nèi)‰p側(cè)附睪脂肪，OCT包埋。-80 ℃冰箱保存待用。

1）血脂。

檢測(cè)血清甘油三酯（TG，GPO-PAP酶法）、總膽固醇（T-CHO，COD-PAP法）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C，直接法）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C，直接法）。儀器為酶標(biāo)儀（TECAN infinite P200 PRO），試劑購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

2）脂肪組織炎性因子。

稱取50 mg附睪脂肪組織，按1∶9（質(zhì)量比）加入PBS液制成組織勻漿，取上清液用ELISA法檢測(cè)腫瘤壞死因子α（TNF-α）和白細(xì)胞介素10（IL-10）。試劑購(gòu)自上海哈靈生物技術(shù)有限公司。

3）脂肪組織HE染色及巨噬細(xì)胞M1、M2表型標(biāo)記。

大鼠附睪脂肪組織連續(xù)冰凍切片（厚度20 um），每隔5張取1張，每只大鼠連取3張，進(jìn)行HE染色和免疫組織化學(xué)檢測(cè)。巨噬細(xì)胞M1、M2表型標(biāo)記因子CD32、CD206購(gòu)自美國(guó)Abcam公司。SP Rabbit HRP Kit（DAB）試劑盒購(gòu)自康為世紀(jì)生物科技有限公司。

免疫組織化學(xué)染色步驟：4%多聚甲醛（質(zhì)量比）

30 min，PBS漂洗5 min×3次，0.1%Triton-100（體積比）室溫覆蓋20 min，PBS漂洗5 min×3次，3%H2O2（質(zhì)量比）室溫覆蓋10 min，PBS漂洗5 min×3次，山羊血清室溫覆蓋15 min，滴加一抗（CD32 1∶250；CD206 1∶3000），濕盒中4 ℃冰箱過(guò)夜，室溫復(fù)溫30 min，

30 ℃孵育30 min，PBS漂洗3 min×3次，滴加二抗，30 ℃孵育20 min，PBS漂洗4 min×3次，滴加Streptavidin-HRP，30 ℃孵育20 min，PBS漂洗5 min×3次，DAB顯色（CD32：50～90 s；CD206：30～50 s），清水終止顯色，蘇木精2 min，水洗30 s，1%鹽酸酒精（體積比）3～5 s，水洗10 s，溫水返藍(lán)10 min，70%乙醇（體積比）30 s，90%乙醇（體積比）30 s，無(wú)水乙醇（Ⅰ） 1 min，無(wú)水乙醇（Ⅱ） 1 min，環(huán)保型透明液（Ⅰ） 2 min，環(huán)保型透明液（Ⅱ） 2 min，環(huán)保型透明液（Ⅲ） 2 min，晾干，封片。

采用OLYMPUS BX51顯微鏡和Motic Images Plus 2.0軟件攝片和分析，每張切片選5個(gè)視野（200×）。通過(guò)HE染色觀察脂肪細(xì)胞形態(tài)及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)情況，進(jìn)行脂肪細(xì)胞計(jì)數(shù)、脂肪細(xì)胞直徑測(cè)量以及炎性評(píng)分。炎性評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：0分，無(wú)炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；1分，散在炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；2分，密集炎性細(xì)胞浸潤(rùn)；3分，炎性細(xì)胞圍繞在壞死脂肪細(xì)胞周?chē)驶ü跔罱Y(jié)構(gòu)。定量分析陽(yáng)性表達(dá)面積，得出積分光密度（IOD）和陽(yáng)性表達(dá)面積（Area），通過(guò)Density=IOD/Area計(jì)算平均光密度（OD·um-2）。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

用PASW Statistics 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，所有結(jié)果用 ±s表示。用獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)判定造模效果；運(yùn)動(dòng)干預(yù)后各組的均數(shù)比較采用單因素方差分析，當(dāng)方差齊時(shí)用LSD復(fù)選項(xiàng)進(jìn)行多重比較；當(dāng)方差不齊時(shí)采用Tamhanes T2復(fù)選項(xiàng)。差異顯著性水平為P<0.05。計(jì)算各指標(biāo)的Effect Size（ES）判斷影響的大小，以ES≥0.80為高效應(yīng)，0.80>ES≥0.50為中等效應(yīng)，0.50>ES≥0.20為小效應(yīng)。

2 結(jié)果及分析

2.1 肥胖大鼠造模結(jié)果

以造模組體質(zhì)量≥對(duì)照組體質(zhì)量均值的1.96個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差判斷營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠[12]，有47只大鼠達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)，造模成功率為64.4%。隨機(jī)選取對(duì)照組及肥胖大鼠各6只檢測(cè)體成分和血脂。結(jié)果顯示（見(jiàn)表2），肥胖組大鼠的體質(zhì)量（P<0.01，ES=0.86）、Lees指數(shù)（P<0.05，ES=0.64）、體脂百分?jǐn)?shù)（P<0.01，ES=0.83）、TG（P<0.05，ES=0.82）和LDL-C（P<0.01，ES=0.99）均升高，與對(duì)照組比較其差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示肥胖大鼠擁有更高的體質(zhì)量、Lees指數(shù)和體脂百分?jǐn)?shù)，并出現(xiàn)血脂代謝紊亂。

2.2 肥胖大鼠脂肪組織細(xì)胞形態(tài)和炎癥狀況

1）脂肪組織細(xì)胞形態(tài)改變及炎性評(píng)分。

鏡下可見(jiàn)正常大鼠內(nèi)臟脂肪組織由大量的單泡脂肪細(xì)胞聚集而成，脂肪細(xì)胞呈圓形或多邊形，成蜂窩狀排列。胞質(zhì)位于細(xì)胞邊緣成一薄層，被染成粉紅色并多呈新月形。細(xì)胞核藍(lán)染，位于細(xì)胞邊緣，多呈扁圓形。偶見(jiàn)散在分布的炎癥細(xì)胞（主要是中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞），其核質(zhì)比大，細(xì)胞核深染呈藍(lán)色點(diǎn)狀。與對(duì)照組比較，肥胖組的脂肪細(xì)胞體積增大，固定視野面積中的脂肪細(xì)胞數(shù)量減少（P<0.01，ES=0.87），時(shí)見(jiàn)炎癥細(xì)胞圍繞在壞死的脂肪細(xì)胞周?chē)驶ü跔罱Y(jié)構(gòu)，炎性評(píng)分較高（P<0.01，ES=0.71），這些差異均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)明顯。

2）脂肪組織炎性細(xì)胞因子。

如表3所示，與對(duì)照組比較，肥胖大鼠脂肪組織的TNF-α水平（P<0.01，ES=0.99）、IL-10水平（P<0.01，ES=0.99）和TNF-α與IL-10比值（P<0.05，ES=0.52）均升高，其差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)合形態(tài)學(xué)結(jié)果，說(shuō)明肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織出現(xiàn)了一定程度的慢性炎癥反應(yīng)。

3）巨噬細(xì)胞M1和M2表型陽(yáng)性表達(dá)。

鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)CD32和CD206陽(yáng)性表達(dá)主要分布在細(xì)胞膜，呈棕褐色深染，偶見(jiàn)巨噬細(xì)胞環(huán)繞在脂肪細(xì)胞周?chē)驶ü跔罱Y(jié)構(gòu)。定量分析結(jié)果顯示（見(jiàn)表4），與對(duì)照組比較，肥胖大鼠脂肪組織的CD32陽(yáng)性表達(dá)和M1與M2比值升高，而CD206陽(yáng)性表達(dá)降低（均P<0.01，ES>0.80），其差異具有非常顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞M1和M2表型極化失衡。

2.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠體成分和血脂的影響

觀察表5和表6數(shù)據(jù)。運(yùn)動(dòng)各組與C組比較：運(yùn)動(dòng)各組的體質(zhì)量、Lees指數(shù)、體脂百分?jǐn)?shù)、TG、LDL-C、HDL-C均有所改善，T-CHO變化不顯著。其中E組的HDL-C增加不顯著（P≥0.05，ES=0.03），F(xiàn)組的HDL-C升高具有小效應(yīng)（P≥0.05，ES=0.37），提示3種運(yùn)動(dòng)方案均可降低肥胖大鼠的體質(zhì)量和體脂百分?jǐn)?shù)，并改善血脂紊亂狀態(tài)，但中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)對(duì)HDL-C的影響不顯著。E組、F組與D組比較：E組的Lees指數(shù)（P≥0.05，ES=0.45）、體脂百分?jǐn)?shù)（P<0.01，ES>0.80）、TG（P<0.05，ES=0.72）和LDL-C（P≥0.05，ES=0.64）均高于D組，而HDL-C（P<0.01，ES=0.75）低于D組，這些變化具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。F組的Lees指數(shù)（P<0.05，ES=0.54）、體脂百分?jǐn)?shù)（P<0.01，ES=0.82）、TG（P≥0.05，ES=0.52）均高于D組，而HDL-C（P<0.01，ES=0.71）則低于D組，這些變化具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示2種強(qiáng)度的累積運(yùn)動(dòng)對(duì)減少肥胖大鼠體質(zhì)量和體脂、改善血脂紊亂的作用弱于持續(xù)運(yùn)動(dòng)。E組和F組比較：F組體質(zhì)量（P≥0.05，ES=0.21）、體脂百分?jǐn)?shù)

（P≥0.05，ES=0.46）、TG（P≥0.05，ES=0.45）、T-CHO

（P≥0.05，ES=0.27）和LDL-C（P<0.05，ES=0.69）均低于E組，而HDL-C（P≥0.05，ES=0.33）較高，這些變化具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)對(duì)降低肥胖大鼠體質(zhì)量和體脂百分?jǐn)?shù)、改善其血脂紊亂的作用好于中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。

2.4 運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織細(xì)胞形態(tài)及炎性評(píng)分的影響

觀察表7和表8數(shù)據(jù)。B組、C組與A組比較：持續(xù)高脂飲食（B組）可使肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的直徑和炎性評(píng)分進(jìn)一步增高（均P<0.01，ES=0.75）。肥胖大鼠改用正常膳食8周后，其（C組）內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的直徑（P<0.05，ES=0.55）和炎性評(píng)分（P<0.01，ES=0.58）仍高于A組，但低于B組，提示8周的正常膳食難以改善肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)狀況。運(yùn)動(dòng)各組與C組比較：運(yùn)動(dòng)各組固定視野面積中的脂肪細(xì)胞數(shù)量增多（P<0.01，ES>0.80），脂肪細(xì)胞直徑降低（P<0.01，ES>0.50），炎性評(píng)分下降：（D組：P<0.01，ES=0.50；E組：P<0.01，ES=0.40；F組：P≥0.05，ES=0.26）。這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示3種運(yùn)動(dòng)方案均可縮小肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞的體積，改善其炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)狀況。E組、F組與D組比較：E組的脂肪細(xì)胞直徑較?。≒<0.01，ES=0.51）具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；F組固定視野面積中的脂肪細(xì)胞數(shù)量較少（P<0.01，ES=0.39），炎性評(píng)分較高（P<0.05，ES=0.33），這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示改善脂肪細(xì)胞形態(tài)作用最強(qiáng)的是中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)，其次為持續(xù)運(yùn)動(dòng)。E組與F組比較：F組固定視野面積中的脂肪細(xì)胞數(shù)量較少（P<0.01，ES=0.46），脂肪細(xì)胞直徑較大（P<0.01，ES=0.57），炎性評(píng)分較高（P<0.05，ES=0.33），這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)降低肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞體積，改善其炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)的作用強(qiáng)于高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。

2.5 運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織炎性細(xì)胞因子的影響

觀察表9和表10數(shù)據(jù)。B組、C組與A組比較：持續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)（B組）可使內(nèi)臟脂肪組織的TNF-α和IL-10水平以及TNF-α與IL-10比值進(jìn)一步增高（P<0.01，ES>0.80），提示肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥狀態(tài)持續(xù)存在。肥胖大鼠改為正常膳食8周后，C組脂肪組織的上述細(xì)胞因子及其比值仍高于A組（P<0.01，ES>0.50），說(shuō)明8周正常膳食難以逆轉(zhuǎn)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織的慢性炎癥狀態(tài)。運(yùn)動(dòng)各組與C組比較：各組的TNF-α水平和TNF-α與IL-10比值均降低，而IL-10水平則升高（P<0.01，ES>0.80），這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示3種運(yùn)動(dòng)方案均可改善肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織的促炎-抗炎細(xì)胞因子平衡。E組、F組與D組比較：E組和F組的TNF-α水平（均P<0.01，ES>0.80）、TNF-α與IL-10比值（P<0.01，ES>0.80）均高于D組，而E組IL-10水平（P<0.05，ES=0.53）低于D組，F(xiàn)組IL-10水平（P<0.01，ES=0.60）高于D組，這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示持續(xù)運(yùn)動(dòng)改善肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織促炎-抗炎細(xì)胞因子失衡的作用優(yōu)于累積運(yùn)動(dòng)。E組和F組比較：F組的TNF-α水平（P>0.05，ES=0.35）和IL-10水平（P<0.01，ES=0.82）高于E組，而TNF-α與IL-10比值（P<0.05，ES=0.49）較低，這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)主要通過(guò)升高IL-10水平來(lái)改善肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織促炎-抗炎細(xì)胞因子失衡，其效果好于中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。

2.6 運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響

觀察表11和表12數(shù)據(jù)。B組、C組與A組比較：持續(xù)高脂飼料喂養(yǎng)（B組）可使內(nèi)臟脂肪組織CD32陽(yáng)性表達(dá)和M1與M2比值升高（P<0.01，ES>0.80），提示巨噬細(xì)胞極化失衡狀態(tài)持續(xù)存在；肥胖組大鼠改為正常膳食8周（C組）后，其M1與M2比值仍高于A組（P<0.01，ES=0.66），提示8周正常膳食難以糾正內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞的極化失衡。運(yùn)動(dòng)各組與C組比較：各運(yùn)動(dòng)組的CD32陽(yáng)性表達(dá)和M1與M2比值下降，而CD206陽(yáng)性表達(dá)升高（P<0.01，ES>0.80），這些差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示3種運(yùn)動(dòng)方案可減少肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞的M1表型而增多M2表型，糾正其失衡狀態(tài)。E組、F組與D組比較：E組的CD32陽(yáng)性表達(dá)（P<0.01，ES=0.47）和M1與M2比值（P<0.05，ES=0.40）低于D組；F組的CD206陽(yáng)性表達(dá)（P≥0.05，ES=0.37）和M1與M2比值（P≥0.05，ES=0.26）略高于D組；這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示糾正巨噬細(xì)胞極化失衡狀態(tài)的作用，中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)最好，持續(xù)運(yùn)動(dòng)次之。E組和F組比較：F組CD32陽(yáng)性表達(dá)（P<0.01，ES=0.46）和M1與M2比值（P<0.01，ES=0.61）高于E組，而CD206陽(yáng)性表達(dá)（P<0.01，ES=0.87）較低，這些差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)糾正肥胖大鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞極化失衡的作用強(qiáng)于高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。

3 討論

ES是一種由美國(guó)心理學(xué)協(xié)會(huì)自1994年開(kāi)始推行使用的統(tǒng)計(jì)方法，至今已有近2 000多篇文獻(xiàn)使用ES值進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，包括心理學(xué)、遺傳學(xué)、生物學(xué)等學(xué)科，主要用于區(qū)別兩組數(shù)據(jù)之間的差異有效程度。在論文中同時(shí)使用P值和ES值，主要是考慮目前P值的科學(xué)性和準(zhǔn)確性受到學(xué)界質(zhì)疑，提出單一依賴P值可能會(huì)丟失或掩蓋部分?jǐn)?shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，故在使用P值的基礎(chǔ)上，同時(shí)使用ES值，以減少有意義數(shù)據(jù)的丟失。

3.1 肥胖大鼠模型效果評(píng)價(jià)

與對(duì)照組比較，肥胖大鼠體脂含量增多，血脂代謝紊亂，內(nèi)臟脂肪組織細(xì)胞肥大，炎性細(xì)胞聚集，促炎性的M1表型巨噬細(xì)胞表達(dá)增多而抗炎性的M2表型減少，巨噬細(xì)胞極化失衡。這與之前的研究相一致[5-6，16]，證實(shí)肥胖機(jī)體存在內(nèi)臟脂肪組織的慢性炎癥狀態(tài)。

3.2 運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠體成分和血脂的影響

先前研究指出，持續(xù)運(yùn)動(dòng)可有效控制大鼠的體質(zhì)量增長(zhǎng)，改善體脂和血脂紊亂狀態(tài)。本研究結(jié)果證實(shí)累積運(yùn)動(dòng)也具有相似的健康效應(yīng)[6，16]。運(yùn)動(dòng)各組間比較的結(jié)果顯示，持續(xù)運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠體成分和血脂的影響效果最佳，其后依次為高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)和中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。有研究指出，進(jìn)行大強(qiáng)度短時(shí)間訓(xùn)練，其運(yùn)動(dòng)后過(guò)量氧耗較中低強(qiáng)度有氧運(yùn)動(dòng)更高，在這期間機(jī)體的代謝以脂質(zhì)氧化為主，利于身體脂肪尤其是腹部脂肪的減少[17]。本研究結(jié)果呈現(xiàn)的高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)對(duì)體質(zhì)量、體脂百分?jǐn)?shù)和Lees指數(shù)的影響優(yōu)于中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)，也為以上觀點(diǎn)提供了實(shí)驗(yàn)佐證。但累積運(yùn)動(dòng)對(duì)體脂含量的影響整體弱于持續(xù)運(yùn)動(dòng)，與既往研究存在一定差異。如Ando等[8]研究發(fā)現(xiàn)，斷續(xù)性體力活動(dòng)較連續(xù)性體力活動(dòng)具有更高的脂肪氧化，多個(gè)只有5 min的運(yùn)動(dòng)（間隔30 min）比長(zhǎng)時(shí)間的運(yùn)動(dòng)更能提高脂肪的利用率。楊敏麗等[18]的研究也發(fā)現(xiàn)，間斷運(yùn)動(dòng)（游泳，30 min/次、間隔4 h、3次/d、5 d/周、持續(xù)8周）在減少高脂飲食和久坐狀態(tài)引起的肥胖和脂肪肝等不良反應(yīng)方面較連續(xù)運(yùn)動(dòng)更有效。這些研究結(jié)果的差異可能與干預(yù)期間的飲食、運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度、運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間、間隔時(shí)間等的不同有關(guān)，這些因素對(duì)運(yùn)動(dòng)中與運(yùn)動(dòng)后能量消耗總量及其底物利用的影響尚需進(jìn)一步的探究。如本研究中能對(duì)大鼠進(jìn)行24 h的能量代謝動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，尤其是運(yùn)動(dòng)間歇期的能量代謝水平測(cè)量，可能有助于闡明上述差異存在的原因。

3.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥反應(yīng)的影響

TNF-α是炎癥反應(yīng)的原始遞質(zhì)[19]，IL-10可抑制TNF-α介導(dǎo)的胰島素抵抗[5]，TNF-α與IL-10比值可作為衡量炎癥反應(yīng)強(qiáng)弱的重要指標(biāo)[20]。本研究發(fā)現(xiàn)，8周不同方案的運(yùn)動(dòng)均可降低肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織的TNF-α水平，升高IL-10水平，使TNF-α與IL-10比值下降，說(shuō)明運(yùn)動(dòng)組大鼠內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥狀態(tài)改善。而持續(xù)運(yùn)動(dòng)組的研究發(fā)現(xiàn)與Kawanishi[21]、Lira[22]的研究結(jié)果一致，可提供相互支持。綜合分析各組大鼠內(nèi)臟脂肪組織的形態(tài)變化和炎性因子的表達(dá)結(jié)果，結(jié)果顯示等運(yùn)動(dòng)量的累積運(yùn)動(dòng)和持續(xù)運(yùn)動(dòng)均可改善肥胖機(jī)體的內(nèi)臟脂肪組織炎癥狀況，影響效果為中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)最強(qiáng)，持續(xù)運(yùn)動(dòng)和高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)次之。

3.4 運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞極化的影響

內(nèi)臟脂肪組織中巨噬細(xì)胞M1表型和M2表型的極化失衡是肥胖性慢性炎癥的始發(fā)因素[3]。本研究選用CD32和CD206作為巨噬細(xì)胞M1表型和M2表型標(biāo)記[23]，結(jié)合附睪脂肪組織TNF-α和IL-10水平、HE染色切片炎性評(píng)分，以巨噬細(xì)胞極化為核心，探討3種運(yùn)動(dòng)方案對(duì)肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥的影響及其可能機(jī)制。

Lim等[24]發(fā)現(xiàn)，食源性肥胖時(shí)巨噬細(xì)胞由M2表型向M1表型轉(zhuǎn)化，當(dāng)巨噬細(xì)胞由M1表型向M2表型轉(zhuǎn)化時(shí)，可降低脂肪組織炎癥狀況。賀強(qiáng)等[6]研究證實(shí)，持續(xù)4周的游泳運(yùn)動(dòng)（1h/d、5 d/周）可有效降低 db/db小鼠附睪脂肪巨噬細(xì)胞M1表型而提高M(jìn)2表型，降低脂肪組織炎癥水平。Kawanishi等[21]對(duì)C57BL/6小鼠進(jìn)行高脂喂養(yǎng)和16周跑臺(tái)訓(xùn)練（12-20 m/min，60 min/d）發(fā)現(xiàn)運(yùn)動(dòng)能顯著抑制高脂膳食引起的脂肪組織TNF-α表達(dá)，抑制脂肪組織巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)，誘發(fā)巨噬細(xì)胞M1表型向M2轉(zhuǎn)換。上述研究結(jié)果與本研究中的持續(xù)運(yùn)動(dòng)干預(yù)效果一致，而本研究還證實(shí)2種不同強(qiáng)度的累積運(yùn)動(dòng)也可取得類(lèi)似的效果，但效果大小存在差別，中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)糾正巨噬細(xì)胞極化失衡和改善脂肪組織慢性炎癥的作用優(yōu)于高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)。這可能與中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)縮小內(nèi)臟脂肪細(xì)胞體積的作用最強(qiáng)有關(guān)。此外，脂肪組織中絕大多數(shù)的TNF-α來(lái)自該組織中的巨噬細(xì)胞[20]，而中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)降低TNF-α的作用好于高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)，其M1表型巨噬細(xì)胞的陽(yáng)性表達(dá)同樣更低，這也為上述論點(diǎn)提供了佐證。

但從糾正肥胖機(jī)體整體脂代謝的作用來(lái)看，持續(xù)運(yùn)動(dòng)最強(qiáng)，高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)次之，與中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)呈現(xiàn)的糾正內(nèi)臟脂肪組織慢性炎癥作用最強(qiáng)存在差異。運(yùn)動(dòng)既可通過(guò)增強(qiáng)代謝功能和能量消耗，降低體脂和血脂含量，也可通過(guò)應(yīng)激反應(yīng)影響機(jī)體的免疫機(jī)能，兩者綜合改善內(nèi)臟脂肪組織的慢性炎癥狀態(tài)。在大鼠跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)干預(yù)過(guò)程中，既有運(yùn)動(dòng)本身的生理刺激，也有心理應(yīng)激。相比另外2種運(yùn)動(dòng)方式，中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)度低、持續(xù)時(shí)間短，對(duì)大鼠的應(yīng)激刺激最溫和，可能這是其改善內(nèi)臟脂肪慢性炎癥作用最好的原因。且有研究證實(shí)，運(yùn)動(dòng)的抗炎作用在很大程度上與運(yùn)動(dòng)對(duì)脂肪和體質(zhì)量的改變無(wú)關(guān)[25]。但代謝和炎癥之間應(yīng)是高度相互影響的整體，兩者間的動(dòng)態(tài)平衡需要代謝內(nèi)穩(wěn)態(tài)和免疫之間的最佳生理功能搭配[26]。

4 結(jié)論和建議

規(guī)律性的持續(xù)運(yùn)動(dòng)和累積運(yùn)動(dòng)（一天中的多次短時(shí)運(yùn)動(dòng)）均可減少體脂，改善血脂代謝紊亂，下調(diào)內(nèi)臟脂肪組織促炎因子，降低內(nèi)臟脂肪組織的慢性炎癥，其機(jī)制可能與改善肥胖機(jī)體內(nèi)臟脂肪組織巨噬細(xì)胞M1表型和M2表型的極化失衡有關(guān)。其中，在控重減脂方面，持續(xù)運(yùn)動(dòng)的效果最好，其次為高強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)；在改善內(nèi)臟脂肪巨噬細(xì)胞極化失衡方面，中強(qiáng)度累積運(yùn)動(dòng)的效果最優(yōu)。

累積運(yùn)動(dòng)具有運(yùn)動(dòng)時(shí)間短、易執(zhí)行、不易疲勞等特點(diǎn)，易被健身者接受和堅(jiān)持，通過(guò)增加累積運(yùn)動(dòng)的強(qiáng)度，可達(dá)到與持續(xù)運(yùn)動(dòng)相似的控重減脂效果。對(duì)于工作或休閑時(shí)習(xí)慣久坐的人群，可有意識(shí)地進(jìn)行久坐間斷，堅(jiān)持用累積運(yùn)動(dòng)的方式進(jìn)行鍛煉。而累積運(yùn)動(dòng)和持續(xù)運(yùn)動(dòng)相結(jié)合可能對(duì)健康干預(yù)的效果更全面。

參考文獻(xiàn)：

[1] 章嵐，陳勇. 慢性持續(xù)性低度炎癥與運(yùn)動(dòng)、健康和疾病的研究進(jìn)展[J]. 北京體育大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，37（8）：71-76.

[2] KIM Y，WILKENS L R，PARK S Y，et al. Association between various sedentary behaviours and all-cause，cardiovascular disease and cancer mortality：the Multi-ethnic Cohort Study[J]. Int J Epidemiol，2013，42（4）：1040-1056.

[3] 楊英. 化合物抑制體內(nèi)外巨噬細(xì)胞活化釋放HMGB1及其機(jī)制研究[D]. 杭州：浙江大學(xué)，2015.

[4] GORDON S，PLUDDEMANN A，ESTRADA F M. Macrophage heterogeneity in tissues： phenotypic diver-sity and functions[J]. Immunol Rev，2014，262（1）：36-55.

[5] FUJISAKA S，USUI I，BUKHARI A，et al. Regulatory mechanisms for adipose tissue M1 and M2 ma-crophages in diet-induced obese mice[J]. Diabetes，2009，58（11）：2574-2582.

[6] 賀強(qiáng)，季瀏. 4周游泳訓(xùn)練對(duì)db/db小鼠脂肪組織巨噬細(xì)胞介導(dǎo)炎癥的影響[J]. 體育學(xué)刊，2015，22（5）：133-138.

[7] GOLUBIC R，WIJNDAELE K，SHARP S J，et al. Physical activity，sedentary time and gain in overall and central body fat：7-year follow-up of the Pro-Active trial cohort[J]. Int J Obes （Lond），2015，39（1）：142-148.

[8] PEDDIE M C，BONE J L，REHERE N J，et al. Breaking prolonged sitting reduces postprandial glyce-mia in healthy，normal-weight adults：a randomized crossover trial[J]. Am J Clin Nutr，2013，98（2）：358-366.

[9] ANDO T，USUI C，OHKAWARA K，et al. Effects of intermittent physical activity on fat utilization over a whole day[J]. Med Sci Sports Exerc，2013，45（7）：1410-1418.

[10] BOND B，WILLIAMS C A，JACKMAN S R，et al. Accumulating exercise and postprandial health in ado-lescents[J]. Metabolism，2015，64（9）：1068-1076.

[11] ZHENG L，ZHANG X，ZHU W，et al. Acute effects of moderate-intensity continuous and accumulated exercise on arterial stiffness in healthy young men[J]. Eur J Appl Physiol，2015，115（1）：177-185.

[12] 周巧霞. 大豆提取物PC對(duì)食源性肥胖大鼠的作用及肥胖兒童的血漿蛋白組學(xué)研究[D]. 蘇州：蘇州大學(xué)，2014.

[13] BEDFORD T G，TIPTON C M，WILSON N C，et al. Maximum oxygen consumption of rats and its changes with various experimental procedures[J]. J Appl Physiol，1979，47（6）：1278-1283.

[14] HΦYDAL M A，WISLΦFF U，KEMI O J，et al. Running speed and maximal oxygen uptake in rats and mice：practical implications for exercise training[J]. European Journal of Cardiovascular Prevention and Re-habilitation，2007，14 （6）：753-760.

[15] 何明，涂長(zhǎng)春，黃起壬，等. Lees 指數(shù)用于評(píng)價(jià)成年大鼠肥胖程度的探討[J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué)雜志，1997，2（3）：177-179.

[16] 張靜，沙繼斌，張林，等. 有氧運(yùn)動(dòng)與多糖干預(yù)對(duì)肥胖大鼠的血脂調(diào)節(jié)及抗炎作用[J]. 沈陽(yáng)體育學(xué)院學(xué)報(bào)，2016，35（2）：86-91.

[17] TRAPP E G，CHISHOLM D J，F(xiàn)REUND J，et al. The effects of high-intensity intermittent exercise train-ing on fat loss and fasting insulin levels of young wom-en[J]. Int J Obes（Lond），2008，32（4）：684-691.

[18] 楊敏麗，李云川，張忍發(fā). 連續(xù)和間斷運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂飲食大鼠肥胖和脂肪肝作用效果的比較[J]. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2013，33（1）：61-65.

[19] SENGENE S C，LOLMEDE K，ZAKAOFF-GIRARD A，et al. Preadipocytes in the human subcutaneous adi-pose tissue displaydistinct features from the adult me-senchymal and hematopoietic stem cells[J]. J Cell Phy-siol，2005，205（1）：114-122.

[20] ROSANETO J C，LIRA F S，OYAMA L M，et al. Exhaustive exercise causes an anti-inflammatory effect in skeletal muscle and a pro-inflammatory effect in adi-pose tissue in rats[J]. Eur J Appl Physiol，2009，106（5）：697-704.

[21] KAWANISHI N，YANO H，YOKOGAWA Y，et al. Exercise training inhibits inflammation in adipose tissue via both suppression of macrophage infiltration and ac-celeration of phenotypic switching from M1 to M2 ma-crophages in high-fat-diet-induced obese mice[J]. Exerc Immunol Rev，2010，16：105-118.

[22] LIRA F S，ROSA J C，YAMASHITA A S，et al. Endurance training induces depot-specific changes in IL-10/TNF-alpha ratio in rat adipose tissue[J]. Cytokine，2009，45（2）：80-85.

[23] CASTOLDI A，SOUZA C N，CAMARA N O，et al. The macrophage switch in obesity development[J]. Fron-tiers in Immunology，2016，637（6）：1-11.

[24] LIM J，IYER A，LIU L，et al. Diet-induced obesity，adipose inflammation，and metabolic dysfunction cor-relating with PAR2 expression are attenuated by PAR2 antagonism[J]. The FASEB Journal，2013，27（12）：4757-4767.

[25] THYFAULT J P，WRIGHT D C. “Weighing” the effects of exercise and intrinsic aerobic capacity：are there beneficial effects independent of changes in weight？[J]. Appl Physiol Nutr Metab，2016，41（9）：911-916.

[26] ONEILL L A，HARDIE D G. Metabolism of in-flammation limited by AMPK and pseudo-starvation[J]. Nature，2013，493（7432）：346-355.