• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    鹽度脅迫對(duì)泥蚶存活率及3種酶活力的影響

    2018-04-19 02:30:52鄭伊諾許凱倫曾國(guó)權(quán)陸榮茂
    浙江農(nóng)業(yè)科學(xué) 2018年4期
    關(guān)鍵詞:滲透壓貝類(lèi)鹽度

    李 敏,鄭伊諾,許凱倫,曾國(guó)權(quán),陸榮茂,胡 園*

    (1.浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所,浙江 溫州 325005; 2.浙江省近岸水域生物資源開(kāi)發(fā)與保護(hù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 溫州 325005)

    近年來(lái),干旱、暴雨頻發(fā)等自然因素以及人為因素的影響給灘涂貝類(lèi)的生存環(huán)境帶來(lái)巨大改變,其中鹽度受環(huán)境的變化更顯著。鹽度是影響貝類(lèi)分布和生理代謝最重要的生態(tài)因子之一,在不同地理環(huán)境中分布的貝類(lèi),其可耐受的鹽度范圍不同,因而鹽度的變化對(duì)貝類(lèi)的生理活動(dòng)會(huì)造成一定影響[1-5]。一般而言,海水的鹽度直接影響貝類(lèi)體內(nèi)的滲透壓,當(dāng)海水鹽度改變時(shí),為適應(yīng)環(huán)境,機(jī)體需重新平衡體內(nèi)外的水鹽系統(tǒng),消耗能量,貝類(lèi)的正常生長(zhǎng)就會(huì)受到影響,只有在一定的鹽度范圍內(nèi),水生動(dòng)物的生長(zhǎng)才能達(dá)到最大速度。

    泥蚶(Tegillarcagranosa)隸屬軟體動(dòng)物門(mén)(Mollusca),雙殼綱(Bivalvia),蚶屬(Tegillarca),是潮間帶中重要的養(yǎng)殖種類(lèi)。目前,在溫度、重金屬等脅迫對(duì)泥蚶影響的研究方面已有報(bào)道[6-8],但是有關(guān)鹽度脅迫對(duì)泥蚶基礎(chǔ)生理代謝的研究資料不多。本試驗(yàn)以泥蚶為研究對(duì)象,研究了鹽度脅迫下泥蚶血漿滲透壓、過(guò)氧化物酶(POD)活力、總超氧化物歧化酶(TSOD)活力及組織Na+/K+-ATP酶活力的變化規(guī)律,旨在為泥蚶的滲透生理調(diào)節(jié)及適應(yīng)機(jī)制的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    供試用泥蚶于2016年6月底購(gòu)自浙江溫嶺。從中選擇活動(dòng)能力正常、健康、個(gè)體大小均勻的泥蚶進(jìn)行試驗(yàn),試驗(yàn)選取的泥蚶平均殼長(zhǎng)(3.43±0.07) cm,平均殼高(2.70±0.06) cm, 平均體重(15.63±0.80) g。

    1.2 方法

    1.2.1處理設(shè)計(jì)

    本次試驗(yàn)采取靜水系統(tǒng),設(shè)定8個(gè)鹽度梯度,鹽度分別為0、0.5%、1.0%、2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%,另設(shè)置與貝類(lèi)取樣區(qū)域海水鹽度相似的鹽度1.5%作為對(duì)照組,其他鹽度組為實(shí)驗(yàn)組,各設(shè)3個(gè)平行組。通過(guò)加人工海水精鹽配制所需鹽度梯度,每隔24 h全量換水1次。2016年7月3—8日,每天取樣檢測(cè)1次。

    1.2.2檢活方法

    每天定時(shí)取出10只大小相近、活力相當(dāng)?shù)哪囹乐糜诔睾Ko置1 h后,采用目測(cè)法檢活,即活泥蚶雙殼緊閉,絞合縫嚴(yán)密,用手掰不開(kāi),自動(dòng)張口的稍一觸動(dòng)即迅速閉合。

    1.2.3樣品的制備

    將泥蚶置于冰盤(pán)上,使用無(wú)菌注射器快速抽取血液,移入樣品管中冰浴,將血液置于低溫離心機(jī),10 000 r·min-1速度下離心8 min,取上層液用以測(cè)定血漿滲透壓、POD活力及TSOD活力,樣品在24 h內(nèi)分析完畢。

    取樣品組織時(shí),每次每組隨機(jī)取6只試驗(yàn)?zāi)囹?,將其置于冰盤(pán)上解剖,用預(yù)冷的0.86%生理鹽水清洗2次,除去血液,用干凈濾紙擦拭干凈后取出組織置于5 mL干凈的預(yù)冷的離心管中,加入預(yù)冷的0.86%生理鹽水制成組織勻漿液,再將勻漿液置于3 000 r·min-1速度下離心10 min,取上清液測(cè)定有關(guān)數(shù)值。

    1.2.4樣品的測(cè)定

    血漿滲透壓的測(cè)定:利用Model型冰點(diǎn)滲透壓計(jì)測(cè)定血漿滲透壓,血漿滲透壓?jiǎn)挝挥胢Osm·kg-1表示。

    酶活力的測(cè)定:POD活力、TSOD活力及Na+/K+-ATP酶活力的測(cè)定均采用南京建成生物研究所生產(chǎn)的試劑盒,具體操作按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

    血漿POD活力單位:每毫升血漿每分鐘催化1 μg底物的酶量為一個(gè)POD活力單位(U·mL-1)。

    血漿TSOD活力單位:每毫升血漿在1 mL反應(yīng)液中SOD抑制率達(dá)50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的SOD量為一個(gè)SOD活力單位(U·mL-1)。

    組織Na+/K+-ATP酶活力單位:每小時(shí)每毫克組織蛋白的組織中三磷酸腺苷酶分解三磷酸腺苷產(chǎn)生1 μmol無(wú)機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位(U·mg-1)。

    1.3 成活率的計(jì)算

    成活率=(成活數(shù)/總數(shù))×100。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    所有數(shù)據(jù)均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用SPSS 9.0分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析(ANOVA)。P<0.05為差異顯著,P<0.01為差異極顯著。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 鹽度脅迫對(duì)泥蚶成活率的影響

    由表1可以看出,不同鹽度脅迫對(duì)泥蚶的存活率的影響不同。試驗(yàn)過(guò)程中,鹽度為3.5%、4.0%時(shí),1 d內(nèi)泥蚶的死亡率達(dá)到100%,鹽度為3.0%,2 d時(shí)全部死亡,這2組在1 d時(shí)存活率極顯著低于對(duì)照組。而鹽度為2.0%、2.5%時(shí)3 d的存活率與對(duì)照組基本相同,均為60%。試驗(yàn)到4 d時(shí)0、0.5%、1.0% 3組存活率均為100%,到試驗(yàn)結(jié)束時(shí) 3組的存活率為50%。由此可以看出,隨著時(shí)間的進(jìn)行鹽度的變化對(duì)泥蚶存活率影響可表示為低鹽度組(0、0.5%、1.0%)>對(duì)照組(1.5%)和中鹽度組(2.0%、2.5%)>高鹽度組(3.0%、3.5%、4.0%)。

    表1 鹽度脅迫下泥蚶的存活率 %

    2.2 鹽度脅迫對(duì)泥蚶血漿滲透壓的影響

    不同鹽度對(duì)泥蚶血漿滲透壓的影響見(jiàn)圖1,由圖1可以看出不同鹽度對(duì)泥蚶血漿滲透壓的影響不同,鹽度3.5%、4.0%在實(shí)驗(yàn)1 d時(shí)血漿滲透壓達(dá)(1 332±10) mOsm·kg-1、(1 661±18) mOsm·kg-1,較開(kāi)始分別增加了122.4%和177.3%,極顯著高于其他組;鹽度3.0%滲透壓隨著試驗(yàn)的進(jìn)行呈明顯上升趨勢(shì),在2 d時(shí)滲透壓值最大,為(1 082±5) mOsm·kg-1,較開(kāi)始增加了80.6%;鹽度2.0%、2.5%在3 d時(shí)滲透壓值最高,分別為(708±1) mOsm·kg-1、(1 026±44) mOsm·kg-1,較開(kāi)始分別增加了18.2%和71.3%;對(duì)照組滲透壓值由試驗(yàn)開(kāi)始的(599±5) mOsm·kg-1,在1 d時(shí)先降低到最低值[(550±2) mOsm·kg-1]后增加,到試驗(yàn)結(jié)束時(shí)達(dá)到(560±5) mOsm·kg-1;低鹽度的2個(gè)組(0、0.5%),滲透壓值隨時(shí)間的增加而降低,分別較開(kāi)始降低了42.2%、56.4%,均顯著低于對(duì)照組及其他實(shí)驗(yàn)組。

    圖1 不同鹽度對(duì)泥蚶血漿滲透壓的影響

    2.3 鹽度脅迫對(duì)泥蚶血漿POD活力及TSOD活力的影響

    不同鹽度對(duì)泥蚶血漿POD活力及TSOD活力影響見(jiàn)圖2,由圖2可知不同鹽度脅迫下各處理組POD活力不同,隨時(shí)間的增加鹽度3.5%、4.0%組POD活力顯著降低,分別由1 d的(62.63±2.00) U·mg-1、(63.78±0.88) U·mg-1降低至(28.30±4.87) U·mg-1、(24.52±2.09) U·mg-1,分別降低了54.8%、61.6%;低鹽度組均較1 d時(shí)增加且在第5天的值最高,分別為(60.78±9.92) U·mg-1、(74.44±6.41) U·mg-1、(76.37±9.91) U·mg-1,分別增加了4.1%、42.6%、43.5%;對(duì)照組及其他2組均呈先降后增趨勢(shì),在2 d時(shí)降低至最低值。

    圖2    不同鹽度對(duì)泥蚶血漿POD活力及TSOD活力的影響

    從圖2可以看出,不同鹽度脅迫下各處理組TSOD活力不同,試驗(yàn)各組總體呈現(xiàn)下降趨勢(shì),對(duì)照組TSOD活力由1 d時(shí)的(207.41±2.63) U·mL-1下降至(122.22±28.10) U·mL-1,下降了41.1%;鹽度0、0.5%、1.0%、2.0%泥蚶血漿TSOD活力隨時(shí)間的增加而降低,分別下降了48.4%、80.1%、64.2%、34.6%;鹽度2.5%泥蚶血漿TSOD活力呈先增后降趨勢(shì),在2 d時(shí)增加至最大,后較1 d降低9.8%;鹽度3.0%泥蚶血漿TSOD活力較1 d時(shí)增加22.7%,對(duì)照組TSOD活力顯著高于鹽度0組,極顯著高于鹽度0.5%、1.0%組。

    2.4 鹽度脅迫對(duì)泥蚶Na+/K+-ATP酶活力的影響

    鹽度脅迫對(duì)泥蚶Na+/K+-ATP酶活力的影響如圖3所示,試驗(yàn)過(guò)程中低鹽度各組呈現(xiàn)先降后增趨勢(shì),對(duì)照組及中鹽度組呈降低趨勢(shì)。與試驗(yàn)開(kāi)始相比各組均有所降低,其中對(duì)照組由開(kāi)始的(1.805±0.004) U·mg-1降至(0.465±0.099) U·mg-1,降低了74.2%。低鹽度組在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別為(0.562±0.126) U·mg-1、(0.737±0.059) U·mg-1、(0.659±0.130) U·mg-1,分別降低了68.9%、59.2%、63.5%。中鹽度組較開(kāi)始分別降低了76.2%、81.8%。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)泥蚶組織NA+/K+-ATP酶活力呈現(xiàn)低鹽度組>對(duì)照組>中鹽度組。

    圖3    不同鹽度對(duì)泥蚶Na+/K+-ATP酶活力的影響

    3 討論

    泥蚶是變滲壓生物,沒(méi)有專(zhuān)門(mén)的滲透壓調(diào)解器官,環(huán)境因素尤其是生長(zhǎng)環(huán)境的鹽度變化對(duì)泥蚶生長(zhǎng)和生命活動(dòng)有重要影響,當(dāng)泥蚶生長(zhǎng)環(huán)境的鹽度升高或降低幅度過(guò)大時(shí)會(huì)出現(xiàn)閉殼及進(jìn)出水管收縮關(guān)閉,進(jìn)而導(dǎo)致泥蚶攝食活動(dòng)減少、生長(zhǎng)速度減慢等。本次試驗(yàn)中對(duì)照組及鹽度為2.0%、2.5%、3.0%、3.5%、4.0%的實(shí)驗(yàn)組在試驗(yàn)結(jié)束前全部死亡,可能是由于泥蚶的滲透調(diào)節(jié)能力較弱,在鹽度高于1.5%條件下,滲透調(diào)節(jié)已經(jīng)接近極限,超過(guò)此極限,泥蚶即大量死亡。研究表明,泥蚶在低鹽度的海水中死亡率顯著低于高鹽海水中的死亡率,對(duì)高鹽更敏感,這與尤仲杰等[9]在海水溫度鹽度對(duì)泥蚶稚貝生長(zhǎng)及存活的影響的研究中結(jié)果一致。這可能是由于泥蚶棲息于海水鹽度較低且相對(duì)穩(wěn)定的水域,長(zhǎng)期的適應(yīng)使泥蚶缺乏長(zhǎng)期耐受高鹽的能力。

    試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),低鹽度的2個(gè)試驗(yàn)組(0、0.5%)滲透壓值,隨時(shí)間的增加而降低且均低于對(duì)照組及其他試驗(yàn)組,鹽度2.5%、3.0%、3.5%、4.0%處理在試驗(yàn)1 d時(shí)滲透壓值明顯增加,且均顯著高于其他各組,這與蔡星媛等[4]在鹽度脅迫對(duì)魁蚶稚貝血液滲透壓影響的研究中結(jié)果一致,對(duì)照組較開(kāi)始滲透壓值略有降低??赡芤?yàn)楫?dāng)環(huán)境鹽度發(fā)生改變時(shí),雙殼貝類(lèi)會(huì)緊閉雙殼、關(guān)閉進(jìn)出水管和外套腔來(lái)緩解高鹽或低鹽脅迫的壓力。試驗(yàn)過(guò)程中也發(fā)現(xiàn),泥蚶在鹽度脅迫時(shí)首先會(huì)關(guān)閉貝殼,隨后才逐漸緩慢開(kāi)殼,隨著試驗(yàn)時(shí)間的增加,低鹽脅迫下泥蚶閉殼時(shí)間相對(duì)較短,而鹽度2.5%、3.0%、3.5%、4.0%處理開(kāi)、閉殼次數(shù)減少,頻率也減少,因此若長(zhǎng)期處于高鹽脅迫環(huán)境中泥蚶的生長(zhǎng)和存活均會(huì)受到一定影響。

    鹽度脅迫下貝類(lèi)滲透壓變化,隨之其生理活動(dòng)發(fā)生變化,在這個(gè)過(guò)程中貝類(lèi)體內(nèi)酶的活力也發(fā)生變化[10-12]。POD是一種生物氧化中的末端氧化酶[13],它廣泛存在于生物各個(gè)組織中,能催化分解過(guò)氧化氫從而起到保護(hù)生物體的作用。本次試驗(yàn)表明,高鹽度組POD活力較開(kāi)始顯著降低,低鹽度組較開(kāi)始顯著增加。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)POD活力依次為低鹽度組>對(duì)照組> 高鹽度組,即POD活力與鹽度高低呈負(fù)相關(guān)。這與呂昊澤等[10]以及李子牛等[11]的研究結(jié)果相類(lèi)似。表明鹽度脅迫時(shí),泥蚶為適應(yīng)環(huán)境通過(guò)增大POD活力來(lái)增強(qiáng)滲透壓適應(yīng)能力,從而減少環(huán)境對(duì)機(jī)體造成的傷害。而當(dāng)鹽度較大時(shí),POD活力下降,可能是鹽度影響超過(guò)了泥蚶自身調(diào)節(jié)能力,因而在試驗(yàn)過(guò)程中出現(xiàn)部分死亡現(xiàn)象。與POD活力相比TSOD活力開(kāi)始時(shí)增加后降低趨勢(shì)更明顯,這與呂昊澤等[10]的研究結(jié)果相似,說(shuō)明TSOD對(duì)鹽度脅迫更為敏感。

    海洋無(wú)脊椎動(dòng)物組織中Na+/K+-ATP酶在其應(yīng)對(duì)環(huán)境中鹽度變化過(guò)程中發(fā)揮作用,Na+/K+-ATP酶活力與部分魚(yú)類(lèi)、雙殼貝類(lèi)等滲透壓的調(diào)節(jié)能力顯著相關(guān)。試驗(yàn)結(jié)果表明,低鹽度各組呈現(xiàn)先降后增趨勢(shì),對(duì)照組及高鹽度組呈現(xiàn)降低趨勢(shì)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)泥蚶組織Na+/K+-ATP酶活力呈現(xiàn)低鹽度組>對(duì)照組>中鹽度組。這與林聽(tīng)聽(tīng)等[14]的研究結(jié)果不同,林聽(tīng)聽(tīng)等[14]的研究發(fā)現(xiàn):在不同鹽度脅迫下青蛤鰓組織中Na+/K+-ATP酶活性在低鹽時(shí)增加,高鹽時(shí)下降。可能由于試驗(yàn)對(duì)象及試驗(yàn)鹽度脅迫方式不同,泥蚶較青蛤而言在鹽度脅迫下自身滲透壓的調(diào)節(jié)時(shí)間不同,并且本次試驗(yàn)不是采取鹽度驟升或驟降的方式進(jìn)行脅迫,使得結(jié)果略有差異。

    4 小結(jié)

    環(huán)境鹽度對(duì)離水貝類(lèi)的存活影響較大,因而不同鹽度脅迫對(duì)泥蚶存活率的影響不同,在一定溫度的條件下合理降低貯藏鹽度能夠延長(zhǎng)泥蚶的存活率。

    通過(guò)不同鹽度對(duì)泥蚶3種酶活力高低比較,在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)泥蚶血漿中POD活力呈低鹽度組>對(duì)照組>中高鹽度組,血漿中TSOD活力和組織中Na+/K+-ATP酶活性均較開(kāi)始有所下降。

    參考文獻(xiàn):

    [1]焦海峰, 嚴(yán)巧娜, 鄭丹, 等. 溫度和鹽度對(duì)埋棲性雙殼類(lèi)泥蚶(Tegillarcagranosa)呼吸、排泄的影響[J]. 海洋與湖沼, 2015, 46(6):1333-1338.

    [2]王剛, 張其中, 喻子牛, 等. 鹽度對(duì)近江牡蠣耗氧率、排氨率、O:N和吸收率的影響[J]. 海洋科學(xué), 2013, 37(2):101-106.

    [3]孫雪梅, 陳碧娟, 高萍, 等. 高鹽脅迫對(duì)黃河口四角蛤蜊攝食與生長(zhǎng)的影響[J]. 漁業(yè)科學(xué)發(fā)展, 2012, 33(5):85-90.

    [4]蔡星媛, 張秀梅, 田璐, 等. 鹽度脅迫對(duì)魁蚶稚貝血淋巴滲透壓及鰓Na+/K+-ATP酶活力的影響[J]. 南方水產(chǎn)科學(xué), 2015, 11(2):12-19.

    [5]張春丹, 周君, 李曄, 等. 重金屬脅迫對(duì)泥蚶(Tegillarcagranosa)能量代謝酶轉(zhuǎn)錄水平的研究[J]. 海洋與湖沼, 2012, 43(5):919-923.

    [6]劉志剛, 劉建勇, 王輝, 等. 墨西哥灣扇貝稚貝鹽度適應(yīng)性的研究[J]. 湛江海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2006, 26(6):12-16.

    [7]張永普, 孫建禮. 溫度和pH對(duì)廣西泥蚶蛋白酶活性的影響[J]. 東海海洋, 2004, 22(1):64-69.

    [8]呂永林, 張永普, 單賽賽, 等. 不同溫度條件下氨氮對(duì)泥蚶的急性毒性影響[J]. 浙江海洋學(xué)院學(xué)報(bào), 2012, 31(1):54-58.

    [9]尤仲杰, 徐善良, 邊平江, 等. 海水溫度和鹽度對(duì)泥蚶幼蟲(chóng)和稚貝生長(zhǎng)及存活的影響[J]. 海洋學(xué)報(bào), 2001, 23(6):108-113.

    [10]呂昊澤, 劉健, 陳錦輝, 等. 鹽度對(duì)縊蟶超氧化物歧化酶和過(guò)氧化氫酶活性的影響[J]. 海洋漁業(yè), 2013, 35(4):474-478.

    [11]李子牛, 林聽(tīng)聽(tīng), 么宗利, 等. 鹽度對(duì)青蛤抗氧化物酶活性及生長(zhǎng)的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志, 2012, 31(10):2625-2630.

    [12]高杉, 周遵春, 董穎, 等. 鹽度及pH突變對(duì)大竹蟶稚貝抗氧化物酶活力的影響[J]. 大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2017, 32(1):62-67.

    [13]閆華超, 趙超, 馮興水. 黑斑蛙過(guò)氧化物酶活性測(cè)定條件的研究[J]. 四川動(dòng)物, 2006, 25(2):241-243.

    [14]林聽(tīng)聽(tīng), 來(lái)琦芳, 陸建學(xué), 等. 鹽度突變對(duì)青蛤(Cyclinasinensis)鰓的Na+-K+-ATPase活性的影響[J]. 廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào), 2012, 32(1):54-58.

    猜你喜歡
    滲透壓貝類(lèi)鹽度
    我國(guó)海水貝類(lèi)養(yǎng)殖低碳效應(yīng)評(píng)價(jià)
    高考生物問(wèn)答復(fù)習(xí)之滲透壓
    QuEChERS-液相色譜-高分辨質(zhì)譜法測(cè)定貝類(lèi)中6種親脂性貝類(lèi)毒素
    鮮美貝類(lèi)可能暗藏毒素
    食品與生活(2019年8期)2019-10-30 12:13:09
    化基本概念為源頭活水
    ——2017年滲透壓相關(guān)高考真題賞析
    鹽度和pH對(duì)細(xì)角螺耗氧率和排氨率的影響
    鹽度脅迫對(duì)入侵生物福壽螺的急性毒性效應(yīng)
    心搏驟停后綜合征患者血漿滲透壓測(cè)定的臨床意義
    適用于高鹽度和致密巖層驅(qū)油的表面活性劑
    蜂蜜中耐高滲透壓酵母菌的分離與鑒定
    亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲午夜理论影院| 精品国产国语对白av| av电影中文网址| 国产熟女xx| 日韩大尺度精品在线看网址 | 亚洲中文av在线| 久久中文字幕人妻熟女| 亚洲国产精品成人综合色| 日本免费a在线| 免费人成视频x8x8入口观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产成人精品无人区| 禁无遮挡网站| 99久久国产精品久久久| 久久草成人影院| 久久午夜综合久久蜜桃| 一本大道久久a久久精品| 亚洲精品在线美女| 国产主播在线观看一区二区| 黄色视频不卡| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲无线在线观看| 国产成人精品无人区| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| www.精华液| 国产成人免费无遮挡视频| 手机成人av网站| 国产亚洲欧美98| 久久精品91蜜桃| 国产午夜福利久久久久久| 久久婷婷成人综合色麻豆| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 超碰成人久久| 日韩欧美国产在线观看| 久久精品成人免费网站| 好男人电影高清在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲国产精品成人综合色| 88av欧美| 免费看美女性在线毛片视频| 18美女黄网站色大片免费观看| aaaaa片日本免费| 国产区一区二久久| 最新美女视频免费是黄的| 国产成人欧美在线观看| 高清在线国产一区| 欧美大码av| 久久热在线av| 亚洲精品av麻豆狂野| 黄色成人免费大全| 国产av在哪里看| 亚洲av美国av| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久这里只有精品19| 亚洲精品国产一区二区精华液| 级片在线观看| 手机成人av网站| 人人妻人人澡欧美一区二区 | 亚洲性夜色夜夜综合| 亚洲第一av免费看| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 精品久久久久久,| 欧美一区二区精品小视频在线| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 日日干狠狠操夜夜爽| 制服丝袜大香蕉在线| 禁无遮挡网站| 国产成人啪精品午夜网站| 欧美国产日韩亚洲一区| 视频在线观看一区二区三区| 免费在线观看亚洲国产| 亚洲人成伊人成综合网2020| 人人澡人人妻人| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品福利观看| 免费在线观看影片大全网站| 精品一品国产午夜福利视频| 99在线人妻在线中文字幕| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲欧美精品综合久久99| 丁香六月欧美| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产高清视频在线播放一区| 亚洲国产精品999在线| 国产精品综合久久久久久久免费 | 一区福利在线观看| 在线天堂中文资源库| a在线观看视频网站| 黄色片一级片一级黄色片| 老司机午夜福利在线观看视频| 日韩欧美国产在线观看| 女性被躁到高潮视频| 黄片大片在线免费观看| 大香蕉久久成人网| 午夜成年电影在线免费观看| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 黄色a级毛片大全视频| 天堂动漫精品| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 日韩有码中文字幕| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产成人免费无遮挡视频| 亚洲精品中文字幕在线视频| 黄片小视频在线播放| 亚洲一码二码三码区别大吗| 国产麻豆成人av免费视频| 最近最新中文字幕大全电影3 | 亚洲五月色婷婷综合| 乱人伦中国视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 国产av一区二区精品久久| 国产精品二区激情视频| 天天添夜夜摸| 嫩草影院精品99| 女警被强在线播放| www国产在线视频色| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲国产高清在线一区二区三 | 好男人电影高清在线观看| or卡值多少钱| 久久这里只有精品19| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 老司机在亚洲福利影院| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 亚洲成人久久性| 又黄又爽又免费观看的视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 色播在线永久视频| 国语自产精品视频在线第100页| 老司机靠b影院| 午夜影院日韩av| 男女做爰动态图高潮gif福利片 | 久久人妻熟女aⅴ| 久久精品成人免费网站| 操出白浆在线播放| 美女扒开内裤让男人捅视频| 欧美另类亚洲清纯唯美| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲国产欧美网| 精品福利观看| 午夜福利高清视频| 涩涩av久久男人的天堂| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 亚洲久久久国产精品| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 亚洲精品中文字幕在线视频| 午夜福利18| av在线播放免费不卡| 亚洲av成人av| 国产精品精品国产色婷婷| 俄罗斯特黄特色一大片| 国产国语露脸激情在线看| 无人区码免费观看不卡| 在线视频色国产色| 欧美性长视频在线观看| 久久中文字幕一级| 男女下面插进去视频免费观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲色图综合在线观看| 波多野结衣高清无吗| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 色婷婷久久久亚洲欧美| 午夜视频精品福利| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 久久九九热精品免费| 国产欧美日韩一区二区精品| 99精品欧美一区二区三区四区| 在线播放国产精品三级| 久久久久久久久免费视频了| 黄色片一级片一级黄色片| 性欧美人与动物交配| 久久久久久久久免费视频了| 精品高清国产在线一区| 757午夜福利合集在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 国产高清视频在线播放一区| 国产又爽黄色视频| 国产精品免费一区二区三区在线| 色综合站精品国产| 国产高清有码在线观看视频 | 国产高清有码在线观看视频 | 国产真人三级小视频在线观看| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲黑人精品在线| 国产激情久久老熟女| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 午夜福利18| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 精品久久久久久成人av| 国产精品99久久99久久久不卡| 激情视频va一区二区三区| 超碰成人久久| 动漫黄色视频在线观看| 国产一区在线观看成人免费| 亚洲人成77777在线视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 12—13女人毛片做爰片一| 丁香欧美五月| 国产精品一区二区三区四区久久 | 欧美性长视频在线观看| 999精品在线视频| 搡老岳熟女国产| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 大陆偷拍与自拍| 麻豆国产av国片精品| 国产99久久九九免费精品| 纯流量卡能插随身wifi吗| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| www日本在线高清视频| 国产视频一区二区在线看| 国产xxxxx性猛交| 成人av一区二区三区在线看| 我的亚洲天堂| 久久精品国产综合久久久| 亚洲中文字幕日韩| 国产在线观看jvid| 国产精品二区激情视频| 国产成人精品久久二区二区91| 国产成人欧美在线观看| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲专区中文字幕在线| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 色老头精品视频在线观看| 一本大道久久a久久精品| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 欧美黑人精品巨大| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 69av精品久久久久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久热在线av| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 欧美日本亚洲视频在线播放| 午夜福利,免费看| 夜夜爽天天搞| 中文字幕色久视频| 久久久久久久久中文| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 日本 av在线| 久久亚洲真实| 两人在一起打扑克的视频| 怎么达到女性高潮| 亚洲专区国产一区二区| 一级a爱片免费观看的视频| 国产一区二区激情短视频| 十八禁人妻一区二区| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲专区字幕在线| 国产欧美日韩一区二区三区在线| 欧美黑人欧美精品刺激| 精品国产乱码久久久久久男人| 女人被狂操c到高潮| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 91精品三级在线观看| 中亚洲国语对白在线视频| 99久久综合精品五月天人人| 国产亚洲精品av在线| 午夜福利高清视频| 99在线人妻在线中文字幕| 午夜福利视频1000在线观看 | 色婷婷久久久亚洲欧美| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲av电影不卡..在线观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 美女 人体艺术 gogo| 91大片在线观看| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 国产视频一区二区在线看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 美女午夜性视频免费| 亚洲成av片中文字幕在线观看| www.www免费av| 91麻豆av在线| 亚洲一区中文字幕在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 成人亚洲精品一区在线观看| 国产欧美日韩一区二区精品| 黑人欧美特级aaaaaa片| 在线观看免费视频日本深夜| 国产主播在线观看一区二区| 最近最新免费中文字幕在线| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 亚洲国产欧美网| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 91精品三级在线观看| 日韩大码丰满熟妇| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 一本大道久久a久久精品| 国产三级在线视频| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 亚洲人成伊人成综合网2020| 脱女人内裤的视频| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 大陆偷拍与自拍| 成年人黄色毛片网站| 久久亚洲真实| 啦啦啦韩国在线观看视频| 午夜免费成人在线视频| 亚洲国产精品成人综合色| 午夜免费鲁丝| 无遮挡黄片免费观看| 亚洲精华国产精华精| 变态另类丝袜制服| 嫩草影院精品99| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 麻豆一二三区av精品| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 国产三级黄色录像| 两人在一起打扑克的视频| 亚洲午夜理论影院| 婷婷精品国产亚洲av在线| av在线天堂中文字幕| 夜夜夜夜夜久久久久| 无限看片的www在线观看| 美女大奶头视频| 性色av乱码一区二区三区2| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 亚洲色图综合在线观看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| tocl精华| 精品国产乱子伦一区二区三区| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| or卡值多少钱| 最新在线观看一区二区三区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 美女免费视频网站| 69av精品久久久久久| 日本三级黄在线观看| 12—13女人毛片做爰片一| 成人三级黄色视频| 最近最新中文字幕大全免费视频| 黄色丝袜av网址大全| 免费无遮挡裸体视频| 日韩欧美一区视频在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美亚洲日本最大视频资源| 黄色视频不卡| 国产成人欧美在线观看| 欧美不卡视频在线免费观看 | 成人手机av| 欧美最黄视频在线播放免费| 97碰自拍视频| 国产成人精品无人区| 亚洲第一电影网av| 国语自产精品视频在线第100页| 精品国产美女av久久久久小说| 国产亚洲av嫩草精品影院| 脱女人内裤的视频| 久久欧美精品欧美久久欧美| 俄罗斯特黄特色一大片| 亚洲欧美精品综合久久99| 日韩精品中文字幕看吧| 久热这里只有精品99| 久久久久九九精品影院| 久久国产亚洲av麻豆专区| 丰满的人妻完整版| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲av片天天在线观看| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲av熟女| 天堂影院成人在线观看| 18禁观看日本| 久久中文字幕一级| 国产精品 欧美亚洲| 久久精品91蜜桃| 久久中文字幕人妻熟女| 精品欧美一区二区三区在线| 一级a爱视频在线免费观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲av片天天在线观看| 我的亚洲天堂| 黄色 视频免费看| 欧美在线黄色| 亚洲人成电影免费在线| 一级a爱视频在线免费观看| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲男人的天堂狠狠| 99国产精品一区二区三区| 九色亚洲精品在线播放| 国产一区二区激情短视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 变态另类丝袜制服| 在线av久久热| 麻豆成人av在线观看| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 亚洲欧美激情综合另类| 国语自产精品视频在线第100页| 十八禁网站免费在线| 欧美日韩一级在线毛片| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 午夜福利视频1000在线观看 | 国产蜜桃级精品一区二区三区| 一区在线观看完整版| 一级毛片高清免费大全| 动漫黄色视频在线观看| 免费高清视频大片| 国产国语露脸激情在线看| 亚洲一区中文字幕在线| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 精品一区二区三区四区五区乱码| 日韩欧美国产在线观看| 国产一级毛片七仙女欲春2 | 国产一区二区三区综合在线观看| 精品久久久久久成人av| 久久性视频一级片| 成人精品一区二区免费| 亚洲第一青青草原| 亚洲人成电影免费在线| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 久久久精品欧美日韩精品| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日本黄色视频三级网站网址| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 美女扒开内裤让男人捅视频| 麻豆久久精品国产亚洲av| 国产精品av久久久久免费| av天堂久久9| 成人国产一区最新在线观看| 狠狠狠狠99中文字幕| 九色国产91popny在线| 亚洲少妇的诱惑av| 色精品久久人妻99蜜桃| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 美女大奶头视频| 国产欧美日韩一区二区精品| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 精品乱码久久久久久99久播| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 午夜激情av网站| 色综合站精品国产| 国产精品 欧美亚洲| 亚洲全国av大片| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 啦啦啦韩国在线观看视频| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产av又大| 欧美精品啪啪一区二区三区| 黄色女人牲交| 两性夫妻黄色片| 真人一进一出gif抽搐免费| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 1024香蕉在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 国产三级在线视频| 午夜老司机福利片| 久久婷婷成人综合色麻豆| 亚洲五月天丁香| 亚洲av片天天在线观看| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 欧美一级a爱片免费观看看 | 成人免费观看视频高清| 亚洲av电影不卡..在线观看| 中文字幕最新亚洲高清| 中文亚洲av片在线观看爽| 日韩高清综合在线| 一级a爱视频在线免费观看| av视频在线观看入口| 一本大道久久a久久精品| 免费看美女性在线毛片视频| 香蕉久久夜色| 久久久精品欧美日韩精品| 麻豆一二三区av精品| 日韩三级视频一区二区三区| 国产高清videossex| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 久久久久国内视频| 又紧又爽又黄一区二区| 99riav亚洲国产免费| 在线观看www视频免费| 99riav亚洲国产免费| 在线观看66精品国产| 亚洲精品久久国产高清桃花| 精品国产亚洲在线| 禁无遮挡网站| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美日韩黄片免| 午夜精品在线福利| 纯流量卡能插随身wifi吗| 欧美日韩一级在线毛片| 波多野结衣高清无吗| 精品无人区乱码1区二区| 一级a爱视频在线免费观看| av视频在线观看入口| 欧美日韩精品网址| 中亚洲国语对白在线视频| 黄色成人免费大全| 电影成人av| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 一个人观看的视频www高清免费观看 | 电影成人av| 欧美成人午夜精品| 一区二区三区国产精品乱码| 淫妇啪啪啪对白视频| 日韩视频一区二区在线观看| 久久精品国产综合久久久| 国产午夜精品久久久久久| 久久草成人影院| 美女大奶头视频| 欧美成人免费av一区二区三区| 久久狼人影院| 午夜久久久在线观看| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 欧美精品亚洲一区二区| 久久亚洲真实| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲人成电影观看| 激情视频va一区二区三区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 99国产精品一区二区三区| 国产成人精品久久二区二区91| 欧美激情久久久久久爽电影 | 97人妻天天添夜夜摸| 久久亚洲真实| 一边摸一边做爽爽视频免费| 国产精华一区二区三区| 亚洲一区二区三区色噜噜| 一进一出抽搐动态| 最新美女视频免费是黄的| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 亚洲性夜色夜夜综合| 国内精品久久久久精免费| 少妇被粗大的猛进出69影院| 最新在线观看一区二区三区| 国产精品综合久久久久久久免费 | 久久久国产成人免费| 国产视频一区二区在线看| 欧美成人性av电影在线观看| 亚洲色图av天堂| 久久久久九九精品影院| 黄色 视频免费看| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| av天堂在线播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲激情在线av| 中文字幕av电影在线播放| 色综合站精品国产| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 可以在线观看毛片的网站| 欧美激情 高清一区二区三区| 亚洲av电影不卡..在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲人成伊人成综合网2020| 国产高清视频在线播放一区| 禁无遮挡网站| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 夜夜爽天天搞| 美女国产高潮福利片在线看| 男女之事视频高清在线观看| 99国产精品99久久久久| 欧美日本中文国产一区发布| 亚洲在线自拍视频| 18禁国产床啪视频网站| 人妻久久中文字幕网| 97人妻精品一区二区三区麻豆 | 国产精品日韩av在线免费观看 | 在线永久观看黄色视频| √禁漫天堂资源中文www| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 一级黄色大片毛片| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美乱色亚洲激情| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 国产精品自产拍在线观看55亚洲| 91精品国产国语对白视频| 亚洲中文av在线| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 日韩欧美国产在线观看| 在线永久观看黄色视频| 黄色丝袜av网址大全| 黄色女人牲交| www.熟女人妻精品国产| 国产精品久久久人人做人人爽| 亚洲国产精品久久男人天堂| 久久婷婷人人爽人人干人人爱 | 一级a爱片免费观看的视频| 欧美中文日本在线观看视频| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 99久久精品国产亚洲精品| 亚洲少妇的诱惑av| 首页视频小说图片口味搜索| 色在线成人网| 国产区一区二久久| 精品久久久久久,| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 亚洲国产精品sss在线观看| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 美女免费视频网站| 精品欧美一区二区三区在线| 日本欧美视频一区| 人妻久久中文字幕网| 一区二区日韩欧美中文字幕| 久久久久精品国产欧美久久久|