兵團(tuán)第六師豬A型口蹄疫監(jiān)測(cè)調(diào)查分析*

劉向鵬，王忠山，吳 挺，王 琰，王全德，張玉剛，吳建東，冉建文

（1.兵團(tuán)第六師五家渠市畜牧獸醫(yī)工作站，新疆 五家渠 831300；2.兵團(tuán)第六師一〇三團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心；3.兵團(tuán)第六師一〇五團(tuán)農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心；4.兵團(tuán)第六師農(nóng)業(yè)發(fā)展服務(wù)中心）

口蹄疫是由口蹄疫病毒感染引起的豬等偶蹄動(dòng)物的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病，豬感染口蹄疫后以發(fā)熱，口腔黏膜、蹄趾及乳房等處出現(xiàn)水泡和發(fā)生潰爛為特征。發(fā)病率達(dá)100%，仔豬常不見(jiàn)癥狀而猝死，嚴(yán)重時(shí)死亡率可達(dá)100%。世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為A類(lèi)動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類(lèi)動(dòng)物傳染病。從2013年開(kāi)始我國(guó)陸續(xù)發(fā)生豬A型口蹄疫疫情，為了解第六師豬A型口蹄疫感染和免疫狀況，我們開(kāi)展了豬A型口蹄疫抗體和病原監(jiān)測(cè)調(diào)查，現(xiàn)將監(jiān)測(cè)調(diào)查結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 樣品采集

1.1.1 采樣范圍

在兵團(tuán)第六師養(yǎng)豬重點(diǎn)團(tuán)場(chǎng)、生豬調(diào)運(yùn)頻繁團(tuán)場(chǎng)以及屠宰場(chǎng)，隨機(jī)選取生豬年存欄200 頭以上豬群，開(kāi)展豬A型口蹄疫抗體和病原檢測(cè)。

1.1.2 采集樣品

采集仔豬、育肥豬、能繁母豬的血清和活體扁桃體，屠宰場(chǎng)豬頜下淋巴結(jié)。從2017年4月份開(kāi)始，每季度采集1 次，共采集5 次。采集仔豬血清190 份，育肥豬血清1 405 份，能繁母豬血清386 份，活體扁桃體600 份，豬屠宰場(chǎng)采集頜下淋巴結(jié)381 份。

1.2 實(shí)驗(yàn)器材

艾本德單道、多道微量移液器，博騰96 孔洗板機(jī)，熱電酶標(biāo)儀，高速冷凍離心機(jī)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR 儀，恒溫生化培養(yǎng)箱等。

1.3 檢測(cè)試劑

口蹄疫A型液相阻斷ELISA 檢測(cè)試劑盒 （批號(hào)：E170905），購(gòu)自洛陽(yáng)萊普生信息科技有限公司；口蹄疫病毒（通用型）實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：17060503）、口蹄疫病毒（A型）實(shí)時(shí)熒光PCR 檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：17060508），均購(gòu)自武漢科前生物股份有限公司。

1.4 試驗(yàn)方法

采用液相阻斷ELISA 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A型口蹄疫抗體，采用口蹄疫病毒實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)A型口蹄疫病毒核酸，具體步驟按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 檢測(cè)結(jié)果

2.1 育肥豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

育肥豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)于2017年4月份開(kāi)始，每季度進(jìn)行1 次，共5 次：第一批次檢測(cè)320份，個(gè)體陽(yáng)性率15.0%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率15.0%；第二批次檢測(cè)320 份，個(gè)體陽(yáng)性率14.4%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率30.0%；第三批次檢測(cè)311 份，個(gè)體陽(yáng)性率31.2%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率42.1%；第四批次檢測(cè)208 份，個(gè)體陽(yáng)性率61.5%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率56.3%；第五批次檢測(cè)246 份，個(gè)體陽(yáng)性率54.1%，豬場(chǎng)陽(yáng)性率50.0%。見(jiàn)表1。

2.2 仔豬和能繁母豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)育肥豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果，分3 批次采集陽(yáng)性豬場(chǎng)仔豬和能繁母豬血清576 份，檢測(cè)母豬A型口蹄疫抗體水平和仔豬母源抗體水平。第一批次能繁母豬抗體陽(yáng)性率平均為78.5%，仔豬母源抗體陽(yáng)性率平均為50.0%； 第二批次能繁母豬抗體陽(yáng)性率平均為86.3%，仔豬母源抗體陽(yáng)性率為87.5%； 第三批次能繁母豬抗體陽(yáng)性率為89.1%，仔豬母源抗體陽(yáng)性率為40.0%。見(jiàn)表2。

表1 育肥豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)結(jié)果

表2 能繁母豬和仔豬口蹄疫A型抗體檢測(cè)結(jié)果

2.3 豬A型口蹄疫病原檢測(cè)結(jié)果

采集病原樣品981 份，其中豬場(chǎng)采集活體扁桃體600 份，豬屠宰場(chǎng)采集頜下淋巴結(jié)381 份，養(yǎng)殖場(chǎng)和屠宰場(chǎng)采集的樣品檢測(cè)結(jié)果全部陰性。見(jiàn)表3。

表3 養(yǎng)殖場(chǎng)和屠宰場(chǎng)A型口蹄疫病原檢測(cè)結(jié)果

3 現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查

在發(fā)生豬A型口蹄疫后，據(jù)說(shuō)有豬場(chǎng)為預(yù)防豬A型口蹄疫疫情的發(fā)生，用牛羊口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價(jià)苗對(duì)豬實(shí)施了免疫。在隨后的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查也發(fā)現(xiàn)，部分豬A型口蹄疫抗體檢測(cè)陽(yáng)性的豬場(chǎng)，迫于豬A型口蹄疫疫情壓力，確實(shí)使用了牛羊用口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價(jià)滅活苗，但由于政策限制，并未對(duì)外公開(kāi)。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果仔豬和能繁母豬A型口蹄疫抗體偏高，也印證了這一情況。另外，調(diào)查發(fā)現(xiàn)，小規(guī)模豬場(chǎng)有外購(gòu)仔豬育肥的習(xí)慣，但購(gòu)進(jìn)仔豬是否免疫A型口蹄疫疫苗，或者豬場(chǎng)是否存在隱性感染都很難確定。

4 結(jié)果與分析

（1）豬A型口蹄疫病毒核酸檢測(cè)陰性，說(shuō)明豬場(chǎng)口蹄疫防控情況較好。但是，一些未免豬場(chǎng)A型口蹄疫抗體檢測(cè)陽(yáng)性，分析認(rèn)為有可能是購(gòu)進(jìn)的仔豬來(lái)自免疫豬場(chǎng)，另一種可能是豬場(chǎng)存在隱性感染。（2） 抗體檢測(cè)結(jié)果和現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查證實(shí)了部分豬場(chǎng)使用了牛羊口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價(jià)滅活疫苗，而據(jù)相關(guān)報(bào)道，使用牛羊口蹄疫O型、亞洲1型、A型三價(jià)滅活疫苗免疫豬可以預(yù)防豬A型口蹄疫，但是這種行為不合法，也因此干擾了本區(qū)域豬A型口蹄疫感染監(jiān)測(cè)結(jié)果。（3）農(nóng)業(yè)農(nóng)村部印發(fā)的《2018年國(guó)家動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫計(jì)劃》通知表示，各省根據(jù)評(píng)估結(jié)果自行確定是否對(duì)豬A型口蹄疫實(shí)施免疫，說(shuō)明我國(guó)豬A型口蹄疫疫情形勢(shì)不容樂(lè)觀，師市養(yǎng)豬場(chǎng)存在A型口蹄疫風(fēng)險(xiǎn)。（4）豬口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗已上市，該疫苗可同時(shí)預(yù)防豬O型、A型口蹄疫[1]。面對(duì)當(dāng)前豬場(chǎng)生物安全水平參差不齊，飼養(yǎng)管理水平不高，生豬調(diào)運(yùn)頻繁，檢疫監(jiān)管力量薄弱等情況和現(xiàn)狀，建議使用豬口蹄疫O型、A型二價(jià)滅活疫苗預(yù)防豬A型口蹄疫疫情。