母豬分娩前后陰道白細(xì)胞變化情況的研究

黎文娟，冷博瑾，劉森林，袁安文

（湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，湖南 長沙 410128）

母豬子宮內(nèi)膜炎是近年來常發(fā)的母豬頑疾之一，是導(dǎo)致母豬屢配不孕、產(chǎn)仔質(zhì)量下降，甚至淘汰的重要因素[1]。而白細(xì)胞被廣泛認(rèn)為是生產(chǎn)臨床診斷中的一項(xiàng)重要指標(biāo)[2]，尤其白細(xì)胞類別中中性粒細(xì)胞的升高往往提示動(dòng)物處于炎癥[3]，在動(dòng)物血液檢測中，應(yīng)用廣泛。本次試驗(yàn)為了研究母豬子宮內(nèi)膜炎與母豬陰道分泌物白細(xì)胞情況變化的關(guān)系，于2016年11月開始進(jìn)行子宮內(nèi)膜炎的排查采樣，為期6個(gè)月，隨機(jī)選取豬場3個(gè)產(chǎn)房的124頭母豬進(jìn)行產(chǎn)前和產(chǎn)后7 d陰道分泌物的白細(xì)胞涂片檢查，對記錄的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，以探索母豬分娩前后陰道白細(xì)胞與子宮內(nèi)膜炎的相關(guān)性，為獸醫(yī)臨床工作提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 調(diào)查對象 廣東省某規(guī)模化豬場隨機(jī)選取3個(gè)產(chǎn)房的124頭母豬進(jìn)行產(chǎn)前和產(chǎn)后7 d陰道分泌物的涂片檢查，并記錄其分娩狀況、子宮內(nèi)膜炎發(fā)生與藥物預(yù)防情況。

1.1.2 試劑 甲醇溶液，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)；姬姆薩染色液，杭州微生物試劑有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 豬場采樣情況記錄 按產(chǎn)房各母豬的耳號來記錄其具體的分娩情況、藥物預(yù)防和子宮內(nèi)膜炎鑒定結(jié)果等來進(jìn)行分類分析。

子宮內(nèi)膜炎判定：該病是養(yǎng)豬場普遍存在的母豬疾病之一，患病母豬主要表現(xiàn)為食欲下降、體溫升高、陰道內(nèi)常流出腥臭味的白色黏性分泌物[4]，尾根會陰部周圍有大量灰白色、紅褐色、豆腐渣樣或膿性等不同狀況污穢分泌物[5]。臨床上出現(xiàn)以上明顯癥狀，且觸診子宮頸充血松弛，子宮軟硬不一且彈性減弱收縮無力，有波動(dòng)感[6]，則認(rèn)為其發(fā)生子宮內(nèi)膜炎。

異常分娩：臨床上常常將母豬產(chǎn)程分為啟動(dòng)分娩至開始產(chǎn)胎的第一產(chǎn)程、第一胎產(chǎn)出至最后一胎產(chǎn)出的第二產(chǎn)程、產(chǎn)仔完畢到母豬胎衣全部排完的第三產(chǎn)程[7]。整個(gè)分娩過程中由于無法正常生產(chǎn)而發(fā)生的難產(chǎn)及產(chǎn)后胎衣滯留、胎兒滯留、脫宮等都被歸結(jié)于異常分娩，需要及時(shí)采取措施進(jìn)行掏胎、用藥等手段來預(yù)防及緩解癥狀。

碘液預(yù)防：將5%的碘溶液加蒸餾水500 mL配成子宮灌注液，一次性灌入100 mL預(yù)熱至（37.5±1）℃的子宮灌注液，用藥5 h后肌肉注射前列腺烯醇1 mL用于促排，每日1次。

雙抗預(yù)防：青霉素與鏈霉素各100萬單位（IU）溶于90 mL的生理鹽水，再注入10 mL的碳酸氫鈉及40 IU的縮宮素混合液中，進(jìn)行一次性子宮給藥，每日1次。

雙抗-碘液預(yù)防：以上2種預(yù)防方式結(jié)合使用。

1.2.2 采樣 用棉簽蘸取產(chǎn)前母豬陰道分泌物在潔凈的玻片上進(jìn)行薄層抹片，自然干燥后備用，注意不要來回重復(fù)抹片[8]。產(chǎn)后7 d內(nèi)繼續(xù)對母豬陰道分泌物進(jìn)行薄層抹片，并詳細(xì)記錄其是否有進(jìn)行助產(chǎn)手段及其產(chǎn)后狀況與藥物預(yù)防情況等。

1.2.3 染色 將陰道分泌物抹片用甲醇固定后干燥，直立放置于姬姆薩染色缸中，30 min后取出，用流水沖洗，晾干后鏡檢。

1.2.4 白細(xì)胞計(jì)數(shù) 將染好色的玻片置于10倍物鏡下觀察，對10個(gè)視野中的白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。單個(gè)視野中，無白細(xì)胞記作“0”，1～10個(gè)白細(xì)胞記作“+”，多于10個(gè)白細(xì)胞記作“++”，若形成大的白細(xì)胞團(tuán)則記作“+++”[9]。計(jì)數(shù)均須由2人獨(dú)立完成，若結(jié)果不一致且相差較大則須重新計(jì)數(shù)，相差不大則記作平均水平。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

本試驗(yàn)中，白細(xì)胞讀數(shù)被記作“0”和“+”的樣本判為陰性，反之被記作“++”和“+++”的樣本則判為陽性[10]。利用Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分類，并用SPSS進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 采樣基本情況

本次進(jìn)行試驗(yàn)的廣東省某規(guī)?；i場養(yǎng)殖的全為新丹系種豬，公豬存欄13頭，母豬共計(jì)1 250頭，配種均采用人工授精的方式。本次試驗(yàn)隨機(jī)選取了其中3個(gè)產(chǎn)房的124頭妊娠期母豬進(jìn)行產(chǎn)前產(chǎn)后1周跟蹤采樣，有56頭豬在分娩過程中出現(xiàn)異常，采取了助產(chǎn)手段，另外產(chǎn)后有39頭被確診為患有子宮內(nèi)膜炎，采樣的具體情況見表1。

表1 豬場具體的采樣情況 頭

2.2 正常分娩且不進(jìn)行藥物預(yù)防時(shí)陰道白細(xì)胞情況

本次采樣的124頭母豬中，有16頭母豬正常分娩且不進(jìn)行藥物預(yù)防。這些母豬在產(chǎn)后前3 d白細(xì)胞明顯增多，呈陽性，約在產(chǎn)后第4天大部分母豬白細(xì)胞減少，陽性開始變?yōu)殛幮裕贁?shù)會延后1～2 d。產(chǎn)后有4頭母豬被確診為子宮內(nèi)膜炎，發(fā)病率為25%。通過對比，正常分娩時(shí)母豬未用藥預(yù)防，其有無子宮內(nèi)膜炎的白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)差異顯著（P＜0.05），具體情況如表2。

表2 正常分娩且不進(jìn)行藥物預(yù)防情況下白細(xì)胞變化情況

2.3 異常分娩且不進(jìn)行藥物預(yù)防時(shí)白細(xì)胞變化情況

在母豬分娩過程中出現(xiàn)難產(chǎn)，臨床上常用掏胎、藥物促排等人工助產(chǎn)手段來幫助其順利產(chǎn)下仔豬。此次異常分娩中的56頭母豬，有20頭母豬采取過掏胎，且這些母豬在產(chǎn)后出現(xiàn)胎兒滯留的有8頭，出現(xiàn)胎衣滯留的有1頭；同時(shí)，未經(jīng)掏胎卻在產(chǎn)后出現(xiàn)胎兒滯留的有5頭，出現(xiàn)胎衣滯留的有20頭，另外還有11頭出現(xiàn)脫宮癥狀。異常分娩的母豬中有13頭母豬未用藥處理，其中2頭在產(chǎn)后全身檢查后被確診為子宮內(nèi)膜炎，發(fā)病率為15.38%，具體情況見表3。對比表2，正常分娩與異常分娩的母豬陰道白細(xì)胞陽性平均天數(shù)差異不顯著（P＞0.05）。

表3 異常分娩且不進(jìn)行藥物預(yù)防情況下白細(xì)胞變化情況

2.4 藥物預(yù)防對白細(xì)胞狀況的影響

針對此次采樣中47頭正常分娩且未患有子宮內(nèi)膜炎的母豬采取了碘液、雙抗、雙抗-碘液和不用藥4種處理方式來觀察藥物預(yù)防對正常分娩狀況下陰道內(nèi)白細(xì)胞陽性的持續(xù)天數(shù)有無影響。通過對比發(fā)現(xiàn)，用碘液預(yù)防的與不用藥的白細(xì)胞陽性平均天數(shù)相比差異顯著（P＜0.05），用雙抗預(yù)防的與不用藥的相比則差異不顯著（P＞0.05），具體情況見表4。

表4 正常分娩且未患有子宮內(nèi)膜炎時(shí)藥物預(yù)防作用下白細(xì)胞變化情況

正常分娩的母豬有21頭產(chǎn)后被確診為子宮內(nèi)膜炎，對其進(jìn)行了碘液、雙抗、雙抗-碘液和不用藥的4種處理方式。通過對比發(fā)現(xiàn)，用碘液或雙抗預(yù)防的與不用藥的白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)相比差異均顯著（P＜0.05），碘液和雙抗兩種預(yù)防手段的白細(xì)胞陽性平均天數(shù)間差異不顯著（P＞0.05），具體情況見表5。

表5 正常分娩時(shí)藥物預(yù)防子宮內(nèi)膜炎白細(xì)胞變化情況

同時(shí)，針對采樣中38頭出現(xiàn)分娩異常且無子宮內(nèi)膜炎的母豬，豬場通過采取不用藥、碘液、雙抗和碘液-雙抗4種處理方式來觀察白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)。通過兩兩對比發(fā)現(xiàn)，各種預(yù)防手段下的白細(xì)胞陽性平均天數(shù)之間均無顯著差異（P＞0.05），具體情況見表6。

表6 異常分娩時(shí)藥物預(yù)防作用下白細(xì)胞變化情況

而異常分娩的母豬也有18頭產(chǎn)后被確診為子宮內(nèi)膜炎，對其進(jìn)行了碘液、雙抗、碘液-雙抗或不用藥的4種處理方式。通過對比發(fā)現(xiàn)，用碘液或雙抗預(yù)防的與不用藥的白細(xì)胞陽性平均天數(shù)相比差異均顯著（P＜0.05），對比碘液和雙抗的用藥效果差異不顯著（P＞0.05），具體情況見表 7。

表7 異常分娩時(shí)藥物預(yù)防子宮內(nèi)膜炎白細(xì)胞變化情況

2.5 子宮內(nèi)膜炎對白細(xì)胞狀況的影響

此次試驗(yàn)采樣的124頭妊娠期母豬中，產(chǎn)前有39例被確診為子宮內(nèi)膜炎。經(jīng)統(tǒng)計(jì)，患有子宮內(nèi)膜炎的母豬產(chǎn)后白細(xì)胞陽性平均持續(xù)天數(shù)為5 d，而未患有子宮內(nèi)膜炎的母豬產(chǎn)后白細(xì)胞陽性平均持續(xù)天數(shù)明顯要少于患病母豬，為3 d。通過SPSS檢驗(yàn)，結(jié)果顯示有無子宮內(nèi)膜炎的母豬白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)差異極顯著（P＜0.01）。

同時(shí)，這124頭妊娠母豬中產(chǎn)前有12頭母豬被發(fā)現(xiàn)有白細(xì)胞明顯增多呈陽性的現(xiàn)象，其中10例被確診為子宮內(nèi)膜炎，發(fā)病率達(dá)83.33%。經(jīng)卡方檢驗(yàn)，產(chǎn)前有無白細(xì)胞陽性與母豬是否發(fā)生子宮內(nèi)膜炎兩者之間存在相關(guān)性，差異極顯著（P＜0.01）。對比有無子宮內(nèi)膜炎的母豬白細(xì)胞情況發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)后第1天和第2天母豬的白細(xì)胞都呈明顯增多的狀況，兩者之間無顯著差異（P＞0.05）；隨后產(chǎn)后第3天兩組母豬的白細(xì)胞陽性情況差異顯著（P＜0.05），產(chǎn)后第4天至產(chǎn)后第7天兩組母豬的白細(xì)胞陽性情況差異極顯著（P＜0.01）。具體有子宮內(nèi)膜炎和無子宮內(nèi)膜炎母豬產(chǎn)前和產(chǎn)后的白細(xì)胞情況見表8。

表8 有無子宮內(nèi)膜炎母豬產(chǎn)前至產(chǎn)后第7天白細(xì)胞變化情況（n=124）

3 討論

目前國內(nèi)規(guī)?；i場平均每年需要淘汰30%～50%母豬，而這其中被淘汰的子宮內(nèi)膜炎母豬更是占到了40%以上[11]，并由此帶來不小的經(jīng)濟(jì)損失。很多生殖疾病的最初癥狀就是炎癥[12]，因此，豬場對于炎癥標(biāo)志物的中性粒細(xì)胞很有必要建立檢測環(huán)節(jié)。從檢測情況來看，母豬在產(chǎn)后的前2 d內(nèi)由于病理或生理原因均會造成母豬陰道分泌物中白細(xì)胞呈陽性，正常且不受其他病理因素影響下母豬會在產(chǎn)后第3天開始趨于穩(wěn)定并逐步轉(zhuǎn)為陰性。

3.1 分娩情況對白細(xì)胞狀況的影響

對比此次采樣中正常分娩和異常分娩的母豬白細(xì)胞持續(xù)天數(shù)，排除子宮內(nèi)膜炎的影響即差異不顯著（P＞0.05）。同時(shí)，本次研究發(fā)現(xiàn)，掏胎、胎兒滯留、胎衣滯留及脫宮發(fā)生時(shí)，碘液與雙抗的消炎效果在這幾個(gè)癥狀中也均不好。對比正常分娩和異常分娩兩種情況下，子宮內(nèi)膜炎的發(fā)病率也顯示差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)證明，在助產(chǎn)手段得當(dāng)時(shí)分娩狀況極有可能不是造成母豬陰道白細(xì)胞持續(xù)陽性的主要原因，但這還需要進(jìn)一步試驗(yàn)來驗(yàn)證。

由于目前豬場人工助產(chǎn)的手段及脫宮的處理方式略有粗暴[13]，對母豬產(chǎn)道常常造成損傷而繼發(fā)的一系列生殖疾病的事例時(shí)有發(fā)生[14]。同時(shí)滯留的胎衣和胎兒造成母豬內(nèi)源性微生物感染[15]，繼而引發(fā)母豬生殖疾病的情況也頻頻出現(xiàn)。因此，針對這些情況，臨床上仍要引起重視，并及時(shí)采取全面的防治措施和合適的治療手段，以降低母豬生殖疾病的發(fā)生率和母豬淘汰率。

3.2 藥物預(yù)防與白細(xì)胞陽性的關(guān)系

本次研究中針對正常分娩的68頭母豬采取了碘液、雙抗、雙抗-碘液和不用藥4種處理方式，來觀察其白細(xì)胞陽性的持續(xù)天數(shù)發(fā)現(xiàn)，正常分娩且未患子宮內(nèi)膜炎的母豬用碘液與不用藥的母豬相比其白細(xì)胞陽性平均天數(shù)顯著減少（P＜0.05），而正常分娩時(shí)患子宮內(nèi)膜炎的母豬，用碘液或雙抗預(yù)防的母豬白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)相較于不用藥的母豬差異顯著（P＜0.05），這說明碘液和雙抗的預(yù)防方式對白細(xì)胞陽性的出現(xiàn)有一定的控制效果，有較好的生殖道消炎作用，可以作為豬場正常分娩前后的一個(gè)預(yù)防手段。

同時(shí)在異常分娩時(shí)用碘液或雙抗預(yù)防，未患子宮內(nèi)膜炎的母豬白細(xì)胞陽性平均持續(xù)天數(shù)變化差異不顯著（P＞0.05），而患子宮內(nèi)膜炎的母豬變化差異顯著（P＜0.05），這說明碘液和雙抗的預(yù)防方式對異常分娩的子宮內(nèi)膜炎情況下白細(xì)胞陽性的出現(xiàn)有一定的控制效果，但仍需尋求更有效的藥物和手段來作為豬場異常分娩前后的一個(gè)預(yù)防措施。

本次試驗(yàn)中還采取了雙抗-碘液的預(yù)防手段來分別處理正常分娩和異常分娩的母豬，雖然預(yù)防后白細(xì)胞持續(xù)天數(shù)明顯降低，但由于樣本數(shù)小不具代表性，還需要進(jìn)一步的研究來證實(shí)其效果。

3.3 子宮內(nèi)膜炎與白細(xì)胞陽性的關(guān)系

正常分娩或異常分娩情況下，有無子宮內(nèi)膜炎的母豬白細(xì)胞陽性持續(xù)天數(shù)對比差異顯著（P＜0.05），這證明子宮內(nèi)膜炎才是造成母豬陰道分泌物白細(xì)胞狀況變化的主要原因。

同時(shí)，本次研究白細(xì)胞陽性與母豬子宮內(nèi)膜炎的發(fā)生率關(guān)系的抽檢試驗(yàn)中，有12頭母豬產(chǎn)前有明顯的白細(xì)胞升高的現(xiàn)象，其分娩后有10頭母豬被確診為子宮內(nèi)膜炎，其發(fā)病率為83.33%，即產(chǎn)前白細(xì)胞水平與母豬是否發(fā)生子宮內(nèi)膜炎存在極顯著相關(guān)（P＜0.01）。證明產(chǎn)前白細(xì)胞增多可在生產(chǎn)試驗(yàn)中作為子宮內(nèi)膜炎產(chǎn)前的一個(gè)預(yù)示指標(biāo)，提示飼養(yǎng)人員把產(chǎn)前白細(xì)胞明顯增多的母豬作為產(chǎn)后重點(diǎn)觀察對象。同時(shí)，研究結(jié)果還表明在產(chǎn)后1周內(nèi)用碘液或雙抗2種預(yù)防方式來預(yù)防子宮內(nèi)膜炎其白細(xì)胞陽性平均天數(shù)均顯著減少（P＜0.05），在臨床上兩種藥物可以作為子宮內(nèi)膜炎初期預(yù)防用藥來一定程度地避免發(fā)展成慢性子宮內(nèi)膜炎，避免母豬被淘汰。

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