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    尿碘測定的注意事項及質(zhì)量控制

    2018-04-11 23:33:29
    當代臨床醫(yī)刊 2018年1期
    關(guān)鍵詞:比色硫酸間隔

    (雅安市疾病預(yù)防控制中心,四川 雅安 625000)

    1 采樣要求

    1.1 采樣器具的準備 器具:可用玻璃瓶或聚乙烯塑料瓶,必須能夠用塞或蓋緊密密封,用前無碘化處理:10%鹽酸浸泡(必要時還可用硫代硫酸鈉溶液泡),然后用自來水和去離子水沖洗,晾干備用。

    1.2 采樣量 推薦50~100mL

    1.3 樣品的采集與保存

    1.3.1 依據(jù)GB/T5750.5~2006

    1.3.2 采樣后應(yīng)盡快送實驗室檢測,不能盡快檢測可4℃冰箱保存,若超過一周需低溫冷凍保存。

    2 實驗前準備

    2.1 實驗環(huán)境 防止碘污染,實驗室環(huán)境嚴格避免碘污染,實驗室內(nèi)不允許常量碘測定或用存放其他碘試劑,實驗室與采血室間也要保持足夠距離,避免碘消毒劑影響。為防止碘污染,實驗前用1%硫代硫酸鈉溶液擦拭桌面。

    2.2 儀器試劑

    2.2.1 玻璃器皿的清洗 初次使用或長時間不用的玻璃器皿經(jīng)1+1硝酸 浸泡24h后,先用去離子水沖洗2~3遍,再將這些玻璃器皿用1%硫代酸鈉溶液浸泡12h以上,然后用去離子沖洗干凈,在溫室下晾干備用。所有的玻璃皿不能用鉻酸洗液浸泡,同時還要慎用消毒劑和清洗劑。

    2.2.1.1 器皿注意切不可與測定碘鹽的玻璃器皿混用;另外水質(zhì)衛(wèi)生檢驗的氨氮納氏比色法、砷的銀鹽比色法使用的試劑含高濃度的碘離子,這些檢驗工作所用的器皿不可與尿碘檢驗的混用,對此還須注意避免這些試劑對光度計比色皿的污染

    2.2.1.2 配制試劑所用的氫氧化鈉、氯化鈉較可能碘雜質(zhì)較高,所以宜選用合適的并留用(專用);亦有發(fā)現(xiàn)某一過硫酸銨固體、三氧化二砷試劑中含較高碘雜質(zhì)。

    2.2.1.3 過硫酸銨的性質(zhì)不是太穩(wěn)定,見光容易分解,應(yīng)該存放在4℃冰箱內(nèi);硫酸鈰試劑較易受潮,會影響配制濃度,將試劑放于干燥內(nèi)或經(jīng)100℃干燥后配制使用;三氧化二砷有劇毒,剩余的試劑不要隨便廢棄,溶液污染環(huán)境;碘標準使用液最好在臨用前配制,以防止低濃度的碘被存放容器吸附引起偏差,存放盡量不要與其他試劑一起存放。

    2.2.1.4 試劑的純度要符合測定方法的要求,同批樣品的測定所用試劑必須是同一批號,且最好嚴格按要求一次性配好,而每一次試劑的配制做好由專人負責(zé),盡可能避免配制條件的差異帶來的誤差。

    2.2.2 實驗用水:建議使用電阻高于100萬歐姆的去離子水,而蒸餾水需要進行無碘化處理。

    2.2.3 器皿校準 刻度吸管、移液管、加樣槍使用前要校準,才能保證結(jié)果準確。

    3 分析過程的控制

    3.1 水浴溫度 30℃,波動范圍正負1℃。

    3.2 排管 因為砷鈰反應(yīng)時褪色反應(yīng),碘濃度越高,褪色越快,因此將標準系列溶液按碘濃度由高到低排列,各試劑均按此順序加入。

    3.3 取樣 取250ul尿樣最好用刻度吸管吸取,用加樣槍取樣尿液有可能打不干凈,塑料吸頭有時會吸附少許尿液,導(dǎo)致測定結(jié)果不準確。

    3.4 消化 盡可能使用消解儀中部消化樣品,最好對全部消解儀孔進行溫度檢測,溫度相差大于1℃時應(yīng)標出不用。

    3.4.1 樣品消化時的消化管孔徑大小、管壁薄厚盡可能一致;以減輕少因受熱不均勻而產(chǎn)生的誤差;消解儀消化溫度適中,過高消化樣液損失過多,過低消化不完全;條件不允許時刻采用電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱進行消化,因為箱體內(nèi)裝有鼓風(fēng)系統(tǒng),樣品消化后消化液的最終體積也非常接近。

    3.4.2 因消化過程無終點指示以及消化時間、溫度又批間差異,每批樣品消化要與標準系列及空白試驗同時進行,以減少誤差,提高試驗的標準性。如果兩臺恒溫消解儀同時消化,每臺消解儀應(yīng)分別設(shè)置一套空白盒標準系列。

    3.5 (1)加入硫酸鈰銨溶液時,要求準確、快速,加樣槍要求校準。由于硫酸鈰溶液容易附壁,所以加入時不能使硫酸鈰試劑接觸反應(yīng)管內(nèi)壁,加后必須立即充分搖勻放回水浴中,在吸取該溶液的時候要防止產(chǎn)生氣泡,以免影響加入量。(2)加入硫酸鈰銨溶液后的砷鈰反應(yīng)還可在20~35℃之間的某一穩(wěn)定的室溫(或控溫)條件中可進行;每管加入硫酸鈰銨的時間間隔不需要固定為30s,亦可以是1min,只要時間間隔保持一致即可,如果人手少,每次做樣不要超過80份,加入硫酸鈰銨溶液時間間隔大于30s,不超過1min,因為后面的管子在加硫酸鈰銨溶液時,前面的標準已經(jīng)到比色時間。

    3.6 終點判斷 反應(yīng)時間以監(jiān)控碘標準濃度300ug/L管的吸光度達到0.15~0.20時,依順序進行廣度測定[3]。實際操作時過早比色碘標準濃度300ug/L管的吸光度大于0.20,標準曲線相關(guān)系數(shù)r有可能達不到0.999,過遲比色碘標準濃度300ug/L管的顏色有可能退完,標準曲線做不出來,整個試驗得重做。

    3.6.1 建議標準曲線碘標準濃度300ug/L做平行樣,筆者發(fā)現(xiàn)25分鐘時要密切注意300ug/L管顏色深淺,過深繼續(xù)在水浴反應(yīng),當300ug/L管淡黃色拿出來比色,如果吸光度在0.15~0.20時,開始比色;如果300ug/L管的吸光度大于0.20,重新把它放到水浴中繼續(xù)反應(yīng);如果300ug/L管的吸光度小于0.15,將這管舍去馬上將另一管300ug/L作為第一管開始比色。

    3.7 比色 比色時,每管檢測的時間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致。

    3.8 當按照尿碘測定方法操作結(jié)果出現(xiàn)工作曲線碘空白管的吸光值很小時(例如30℃條件下砷鈰反應(yīng)30min時碘空白管的測定吸光度<0.7)。先檢查光度計波長是否準確;是否使用了已風(fēng)化或潮解的過硫酸銨固體試劑;是否配制得的Ce4+溶液濃度偏低;再檢查檢測體系是否存在碘污染,并予以消除。這里的檢測體系包括:所用試劑、水、所用器皿、實驗室環(huán)境。

    3.9 重視利用國家凍干尿碘標準物進行檢測質(zhì)量控制,以便發(fā)現(xiàn)誤差,采取措施消除誤差。

    4 總結(jié)

    尿碘砷鈰催化分光光度法測定干擾因素很多,實驗前一定要保證環(huán)境無碘,所用的器具要進行無碘化處理,所用的試劑和水不得含碘,保持消化溫度100℃,過高過低測得的碘含量都會偏低,每管比色的時間間隔應(yīng)與加硫酸鈰銨溶液的時間間隔一致,碘標準濃度300ug/L做平行樣,終點判斷在加入硫酸鈰銨25分鐘時密切觀察300ug/L管顏色深淺,以它的吸光度達到0.15~0.20時開始比色,每次實驗要帶內(nèi)部質(zhì)控[4],這樣才能保證檢測結(jié)果準確可靠。

    [1]李紅梅. 尿碘測定的質(zhì)量控制— 過硫酸銨消化砷鈰催化分光光度法[J].基層醫(yī)學(xué)論壇,2009, 13(17) : 1672-1673.

    [2] 孫亞維,陳科杰,等. 尿碘檢測實驗室的質(zhì)量控制分析[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2011(4):1016-1016.

    [3]中國疾病預(yù)防控制中心地方病控制中心 WS/T107-2006尿中碘的砷鈰催化分光光度測定方法[R].地方病學(xué),2008.6.102-104.

    [4] 顧儀, 郭威. 尿碘實驗室檢測質(zhì)量保證的現(xiàn)狀及對策[J].中國公共衛(wèi)生2001.17(3):268-268.

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