魏會廷
(四川省農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所/農(nóng)業(yè)部西南地區(qū)小麥生物學與遺傳育種重點實驗室,四川 成都 610066)
籽粒消毒是進行籽粒發(fā)芽試驗的前提保證。小麥籽粒消毒常用消毒液有次氯酸鈉、酒精、氯化汞、雙氧水等。而消毒液的濃度配比及消毒時間多樣[1-4]。本試驗利用4種常用消毒液進行濃度配比及消毒時間測試,以期獲得合理實用的消毒方法。
供試小麥籽粒為川麥104。供試消毒試劑均為分析純,分別為次氯酸鈉、酒精、雙氧水、氯化汞。
選取籽粒飽滿、大小一致、無病蟲害的種子50粒。流動水洗5min(并用手揉捏表皮濕潤),蒸餾水5min,消毒處理后蒸餾水水洗3次,分別5min、2min、2min。放入直徑為9cm的玻璃培養(yǎng)皿內(nèi),將籽粒腹溝朝下擺放于高溫滅菌的濕潤的雙層濾紙芽床上(每處理設置3個培養(yǎng)皿),于室溫下(室內(nèi)日最高溫25℃~30℃)進行發(fā)芽試驗。以胚部破裂露白為萌動, 以胚芽鞘達種子長度1/2 時為發(fā)芽。3d統(tǒng)計發(fā)芽籽粒數(shù),并計算發(fā)芽率。
發(fā)芽率(%)=發(fā)芽籽粒數(shù)/總粒數(shù)×100%
從表1可以看出,1%次氯酸鈉、8%次氯酸鈉(消毒20min內(nèi))、70%酒精(消毒3min內(nèi))、3%雙氧水、30%雙氧水(消毒10min內(nèi))、0.1%的氯化汞處理均不影響發(fā)芽率(97.0%~99.7%);而8%次氯酸鈉消毒時間達到30min、70%酒精消毒時間達到4min,30%雙氧水消毒時間達到30min均大幅度降低發(fā)芽率(30.0%~78.0%)。
表1 不同種消毒試劑對發(fā)芽率影響
注:*為3d內(nèi)無霉變;**為7min酒精消毒水洗法。
較對照(蒸餾水處理),1%次氯酸鈉、8%次氯酸鈉(消毒20min內(nèi))、70%酒精(消毒2min內(nèi))、0.1%的氯化汞處理均不影響發(fā)芽后的生長快慢。8%次氯酸鈉(原液)、70%酒精、30%的雙氧水過長時間消毒將減緩發(fā)芽,而70%酒精消毒時長達5min減緩籽粒露白并抑制繼續(xù)生長。雙氧水(30%雙氧水消毒30min處理除外)將加快籽粒發(fā)芽后的生長。
從表1可以看出,70%酒精2min消毒、0.1%氯化汞消毒,不影響籽粒的發(fā)芽率及發(fā)芽后生長,且72h內(nèi)籽粒無霉變點發(fā)生,為理想消毒液。鑒于氯化汞為劇毒試劑,現(xiàn)對酒精消毒方法進行優(yōu)化與簡化。相同試驗條件下,將小麥籽粒水洗并充分捏濕2min,70%酒精浸泡并攪拌2min消毒,后分別培養(yǎng)皿內(nèi)晃動蒸餾水洗2min、1min,消毒及清洗共用時7min,72h內(nèi)未出現(xiàn)霉變點。
70%酒精2min浸泡法為較為實用的籽粒發(fā)芽消毒方法,并可進一步簡化為7min酒精消毒水洗法。
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