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    山東省部分地區(qū)豬場PRV疫苗免疫狀況調(diào)查

    2018-04-03 02:59:55
    中國畜牧獸醫(yī)文摘 2018年3期
    關鍵詞:恒溫箱頭份豬場

    (山東省聊城市畜牧獸醫(yī)局,山東聊城 252000)

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 被檢血清

    本次試驗抽取的110個樣本豬場多為存欄母豬在50頭份以下的中小規(guī)模豬場,試驗用樣本豬共429頭份,其中已進行PRV疫苗免疫的豬為337頭份,未進行PRV疫苗免疫的豬只為92頭份;10月份66頭份,11月份92頭份,12月份81頭份,2月份47頭份,3月份143頭份;青島(包括平度)78頭份,濰坊(包括高密、昌邑、安丘、臨朐、青州)217頭份,淄博(包括臨淄)31頭份,泰安(包括肥城)75頭份,臨沂(包括莒南)28頭份;仔豬49頭份,保育豬65頭份,育肥豬36頭份,后備母豬32頭份,經(jīng)產(chǎn)母豬227頭份,種公豬20頭份。

    1.1.2 儀器設備

    試驗要用到GT10-1高速離心機,電爐,DHP-9162型電熱恒溫培養(yǎng)箱,單道、多道可調(diào)微量移液器,BCD-212HDA普通冰箱,分光光度計,DG5033A酶標儀。

    1.1.3 檢測試劑

    PRV抗原包被的酶標板、辣根過氧化物酶(HRPO)標陽性對照血清、PRV抗體陰性對照血清、去離子水(本試驗購自北京愛德士元亨生物科技有限公司的IDEXX試劑及試劑盒)。

    1.2 檢測方法

    所有試劑在使用前先放入18℃~25℃恒溫箱中恢復至室溫。濃縮液用去離子水進行10倍稀釋,被檢樣品血清用樣品稀釋液2倍稀釋。

    取出PRV抗原包被板,向A1、B1孔中加入100μl 2倍稀釋陰性對照血清,C1、D1孔中加入100 μl 2倍稀釋陽性對照血清,相應孔中加入100μl稀釋樣品。然后放到18℃~25℃恒溫箱中孵育60 min。每孔用 300μl左右稀釋洗滌液洗滌3~5次后入100 μl抗PRVgB酶標抗體。在恒溫箱(18℃~25℃)中孵育20 min。每孔用300μl左右稀釋洗滌液洗滌3~5次后加入100μlTMB底物溶液。在恒溫箱(18℃~25℃)中孵育15 min。每孔加入50μl終止液終止反應。在650nm,A(650)下測量并記錄樣品的吸光值。

    1.3 結果計算

    本次試驗使用的是IDEXX提供的計算方法。

    1.3.1 試驗有效條件

    若陰性對照平均值減去陽性對照后的平均值大于0.300則結果有效,否則無效。

    1.3.2 計算方法

    陰性對照平均值=(A1 A(650)+B1 A(650))/2。

    陽性對照平均值=(C1 A(650)+D1 A(650))/2。

    對照比率S/N值=樣本A(650)/陰性對照平均值。

    2 結果

    此110個豬場的8817頭份豬中429頭份豬的血樣ELISA方法檢測,陽性豬292頭份,陰性豬137頭份,陽性率為68.07 %;陽性豬場為95個,陰性豬場15個,陽性率為86.36 %。

    2.1 不同免疫情況下抗體水平檢測陰陽比例對照

    已進行PRV疫苗免疫的豬為337頭份,未進行PRV疫苗免疫的豬為92頭份,免疫率達到78.55 %,如表1所示。

    表1 不同免疫狀況下抗體水平檢測陰陽比例對照表

    由表1分析可得示,在未進行免疫防護的豬中陽性率偏高,豬場的隱性感染率很高。在已進行免疫防護的豬中仍有1/4的沒有得到有效的抗體保護,免疫效果不理想。

    2.2 不同時間抗體水平檢測陰陽比例對照

    表2 不同時間抗體水平檢測陰陽比例對照表

    由表2分析可得,不同時間抗體水平有著明顯的差異,在2017年的10、11、12,2018年的2、3這五個月份中抗體水平始終圍繞68.07 %這條線上下波動,并無明顯規(guī)律可循。但是11月和3月的波動范圍相對較大,抗體水平不穩(wěn)定,尤其在3月的中旬和下旬陽性率差值竟超過25 %,可能與多變的天氣有關,要關注氣候變化,及時防護。

    2.3 不同地區(qū)豬場抗體水平檢測陰陽比例對照

    各地區(qū)的免疫狀況各不相同,抗體水平存在差異,在濰坊以東和以北的地區(qū)免疫效果相對偏好一些,如青島的平度、濰坊的昌邑、安丘、淄博的臨淄等地抗體水平相對較高,臨淄抗體陽性率達到了86.67 %,而臨朐、青州、泰安的肥城、臨沂的莒南等地抗體水平相對較低,應加強這幾個地區(qū)的免疫程序。導致免疫效果差異的因素有:選擇的疫苗不同或者是防疫與管理太過粗放等引起。

    2.4 不同階段豬場抗體水平檢測陰陽比例對照

    已產(chǎn)母豬的73.06%的陽性率效果還是比較理想的,后備母豬68.75%的陽性率較低于已產(chǎn)母豬,可加強此階段的免疫防護。哺乳階段仔豬通過從母體乳汁中獲得抗體可減少發(fā)病概率,陽性率為71.43%,表明獲得了有效的免疫保護。但是保育豬和育肥豬的陽性率分別為40.00%和30.56%,表明斷奶后的商品豬免疫工作有明顯的不足,這也加重了豬場偽狂犬病感染的概率。

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