系統(tǒng)性紅斑狼瘡孕婦外周血及臍血IL-6、IL-10 和IFN-α水平的變化及評估新生兒免疫功能的價值

楊曉菊 董靜 雷蕾 趙文榮 勵蓓蕾

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是多系統(tǒng)受累的慢性炎癥性自身免疫性疾病。妊娠后免疫失衡及紊亂容易導致SLE病情活動及重要器官損害，嚴重威脅母兒健康[1]。此病受遺傳和免疫學等多因素影響而發(fā)病，存在家族聚集的傾向[2]。孕婦免疫損傷和免疫異常，可導致胎兒發(fā)育不良、畸形甚至早產(chǎn)、流產(chǎn)[3]。血清中SLE相關(guān)細胞因子包括白介素(IL)-6，IL-10和干擾素(IFN)-α在內(nèi)的多種細胞因子已被證實參與狼瘡的發(fā)病和病情進展。但SLE對其生命早期的免疫功能是否存在影響，國內(nèi)報道較少。本研究擬通過聯(lián)合檢測SLE孕婦外周血及新生兒臍血中細胞因子IL-6、IL-10、IFN-α的表達水平，探討其在SLE合并妊娠時的水平變化及其在不同病情狀態(tài)下對新生兒免疫功能的影響及評估價值。

對象與方法

1.對象：2013年3月—2016年3月住院分娩的SLE孕婦共56例，SLE診斷采用1997年美國風濕病學會修訂的SLE分類標準。按SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)評分分組，活動期組(SLEDAI>4分)35例，穩(wěn)定期組(SLEDAI≤4分)21例。隨機選取同期住院分娩的正常健康孕婦30例為對照組。

2.方法：分別抽取上述三組孕婦分娩前靜脈血及新生兒臍血5ml，分離血清于-80 ℃保存留待測定數(shù)據(jù)。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)分析所有樣本血清中IL-6，IL-10和IFN-α的蛋白表達水平。

3.定義：產(chǎn)后病率是指分娩24 h以后的10 d內(nèi)用口表每日測量4次，體溫有2次達到或超過38 ℃。低出生體重兒指出生體重小于2500 g的新生兒。

結(jié)果

1.SLE與對照組孕婦一般情況比較：結(jié)果顯示兩組孕婦年齡、產(chǎn)次與孕周無統(tǒng)計學差異，SLE組產(chǎn)后病率高于正常孕婦組(P均<0.05)；SLE組新生兒體重、1 min Apgar評分低于正常孕婦組(P均<0.05)，低出生體重率高于對照組(P<0.05)。(見表1)。

注：兩組比較，*P<0.05

2.SLE病例組與對照組血清中IL-6，IL-10，IFN-α水平比較：SLE患者活動期組血清中的細胞因子IL-6、IL-10、IFN-α的表達水平均明顯高于穩(wěn)定期組和健康對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；穩(wěn)定期組和健康對照組之間的差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。(見表2)。

表2 SLE病例組與對照組外周血及臍血IL-6、IL-10、IFN-α的水平比較±s)

注：*與穩(wěn)定期組比較，P<0.05；△與對照組比較，P<0.05

SLE活動期新生兒臍血中的IL-6，IL-10，IFN-α的水平均顯著高于SLE穩(wěn)定期和正常新生兒組(P<0.05)。

3.SLE活動組母血與臍血相應(yīng)免疫指標間的相關(guān)性分析：SLE活動組母血與新生兒臍血IL-10、IFN-α間呈正相關(guān)(r= 0.430，P<0.05;r= 0.456，P<0.05)。而母血IL-6與臍血IL-6之間無相關(guān)性(r=0.271，P>0.05)。見圖1，2，3。

圖1 SLE活動期母血與臍血IL-6水平的相關(guān)性分析

4.SLE活動組外周血IL-6，IL-10及IFN-α水平與疾病SLEDAI評分間的相關(guān)性分析：SLE活動組外周血IL-6水平與SLEDAI評分呈非線性相關(guān)，而IL-10及IFN-α水平與疾病SLEDAI評分間則呈線性正相關(guān)。見圖4、5、6。

討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是一種典型的免疫功能紊亂、累及多系統(tǒng)的慢性炎癥性自身免疫性疾病，主要表現(xiàn)為T、B淋巴細胞異常活化、增殖和分化，產(chǎn)生多種自身抗體[4]。細胞因子的分泌調(diào)控人體的正常免疫反應(yīng)，當其分泌異常時，機體免疫高度活化。近年來多項研究均證明，許多細胞因子參與SLE的病理過程，并決定其受累器官[5]。參與免疫調(diào)節(jié)的細胞因子網(wǎng)絡(luò)失調(diào)在SLE發(fā)病及疾病進展中發(fā)揮著重要作用。

SLE合并妊娠時不僅會影響母親自身健康還會影響新生兒健康。本研究進一步證明SLE孕婦不僅可導致產(chǎn)婦產(chǎn)后病率提高，還可引起新生兒出生體重降低，低Apgar評分從而直接影響新生兒預后及健康。

SLE是典型的Th2細胞因子介導的自身免疫性疾病，其中IL-6是一種重要的Th2細胞因子。IL-6可由多種細胞分泌產(chǎn)生，并且影響多種細胞的功能，參與炎性反應(yīng)。多項研究證實SLE患者血清中IL-6水平顯著升高，且與疾病活動度呈正相關(guān)[6,7]。本研究也顯示，SLE妊娠活動期患者外周血及新生兒臍血中的IL-6水平明顯升高，其實反映了機體的一種慢性炎性狀態(tài)，繼而表明胎兒及新生兒時期的一種機體的異常免疫狀態(tài)，由此可見新生兒出生時細胞免疫功能即受到了損傷。

IL-10也稱細胞因子合成抑制因子，它可抑制許多炎癥性細胞因子的合成，同時對B淋巴細胞有免疫刺激作用。IL-10主要由Th2細胞分泌，它能刺激B淋巴細胞的增殖和分化，促進炎癥反應(yīng)的發(fā)生，誘導自身抗體的產(chǎn)生；另一方面，作為一種免疫抑制因子，可導致體液免疫功能紊亂的發(fā)生。本研究表明，活動期SLE患者血清及臍血IL-10水平均較穩(wěn)定期和正常對照組顯著升高，說明IL-10與SLE發(fā)病存在一定的相關(guān)性，且孕婦血與其臍血的IL-10呈正相關(guān)，可能高水平的IL-10使體內(nèi)B細胞過度活化，產(chǎn)生大量的自身抗體和免疫復合物，從而導致SLE孕婦與新生兒的免疫系統(tǒng)同時受到損傷[8,9]，致使SLE患者可能在其生命早期即潛在開始發(fā)病。

IFN-α主要由漿細胞樣樹突狀細胞(pDC)合成分泌，具有免疫調(diào)節(jié)功能。機體內(nèi)源性的免疫復合物也可激活pDC，使其產(chǎn)生大量IFN-α，從而導致SLE發(fā)病。本研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者血清中IFN-α水平較正常人明顯升高，這與Wills等[10]的研究報道一致。IFN-α是SLE的標志性細胞因子，也是研究最多的與SLE相關(guān)的細胞因子，其與疾病活動度、病情輕重及免疫活化等密切相關(guān)。本研究顯示，SLE活動期患者及新生兒IFN-α水平明顯高于穩(wěn)定期患者和對照組，且孕婦外周血與其臍血的IFN-α呈正相關(guān)，IFN-α濃度與SLEDAI積分亦呈正相關(guān)，提示孕婦體內(nèi)IFN-α的水平可能影響胎兒體內(nèi)IFN-α的水平，表明機體內(nèi)由于免疫失衡與紊亂激發(fā)了巨噬細胞及T細胞的活性，導致IFN-α產(chǎn)生增多，從而導致新生兒免疫功能發(fā)生異常改變。

綜上所述，SLE患者妊娠后除直接影響孕婦本身體內(nèi)的細胞因子水平，還可影響其新生兒的細胞因子分泌水平，從而間接影響到該細胞因子介導的免疫反應(yīng)和免疫功能，而監(jiān)測SLE活動期孕婦外周血及IL-6、IL-10 和IFN-α水平變化對評估新生兒免疫功能具有重要的臨床價值。SLE妊娠期監(jiān)測細胞因子對確定疾病活動和判斷病情變化有著重要指導意義，為了下一代的健康成長，應(yīng)盡可能選擇在SLE病情非活動期懷孕，且妊娠期間嚴密監(jiān)測SLE病情變化，必要時給予適當?shù)募に刂委熆刂撇∏椤?/p>

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