三種殺蟲劑對攜帶TYLCV煙粉虱的驅(qū)避效應

劉茹 張鄧壯 劉佰明 谷希樹

摘要：煙粉虱及其傳播的番茄黃化曲葉病毒病（TYLCD）近年來危害嚴重，使用殺蟲劑抑制傳毒介體在植物間傳毒是目前防控該病蟲組合的常用手段。本研究通過選擇試驗探討了氟吡呋喃酮、溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪三種殺蟲劑分別在亞致死濃度（LC?15?、LC?40?）和田間應用濃度處理下番茄苗對攜帶番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）Q煙粉虱的驅(qū)避效應。結(jié)果表明：氟吡呋喃酮在各濃度處理下均對Q煙粉虱具有顯著的驅(qū)避效果，且隨著處理濃度的升高和處理時間的延長驅(qū)避效應越顯著;溴氰蟲酰胺和噻蟲嗪只在田間應用濃度處理下對Q煙粉虱有顯著的驅(qū)避效果;噻蟲嗪在LC?15?亞致死濃度作用下對煙粉虱具有一定的吸引作用。氟吡呋喃酮可作為良好的煙粉虱驅(qū)避劑，對其傳播TYLCV具有很大預防潛力，噻蟲嗪則不宜用來作為病毒病的防控藥劑。

關鍵詞：殺蟲劑;煙粉虱;驅(qū)避效應;番茄黃化曲葉病毒（TYLCV）

中圖分類號：S482.3文獻標識號：A文章編號：1001-4942（2019）01-0119-05

Repellent Effects of Three Insecticides on

Bemisia tabaci Vectored TYLCV

Liu Ru?Zhang Dengzhuang?Liu Baiming?2， Gu Xishu?2

（1. College of Life Sciences， Tianjin Normal University， Tianjin300387， China;

2. Tianjin Institute of Plant Protection， Tianjin 300384， China）

Abstract?Bemisa tabaci propagating tomato yellow leaf curl virus disease has damaged seriously in recent years. Insecticides used to block the virus transmission by vectors between plants is the common methods to control the insect-disease group. In this research， we studied the repellent effects of three insecticides including flurofuranone， cyantraniliprole and thiamethoxam on TYLCV vectored by Bemisa tabaci at the sublethal concentration （LC?15?， LC?40?） and field applied concentration. The results indicated that flurofuranone had significant repellent effect on B. tabaci Q at the three concentrations， and the higher the insecticide concentration and the longer the treatment time was， the more significant the effect was. But the significant repellent effects of cyantraniliprole and thiamethoxam to B. tabaci Q only existed at field application concentration. It had attraction effect on B. tabaci at the LC?15treatment of thiamethoxam. In conclusion， flurofuranone could be used as a good anti-feedant to B. tabaci and hold a deep potential to prevent TYLCV disease. In contrast， thiamethoxam was not advised to be applied as virus disease control chemicals.

Keywords?Insecticides; Bemisia tabaci; Repellent effect; Tomato yellow leaf curl virus（TYLCV）

煙粉虱（Bemisia tabaci）是一類重要的農(nóng)業(yè)害蟲，由30多個隱種組成，其中B（MEAM1）和Q（MED）煙粉虱危害最為嚴重[1]。B煙粉虱于20世紀90年代入侵我國，Q煙粉虱則于2003年在云南首次發(fā)現(xiàn)，自2011年起Q煙粉虱在我國大部分地區(qū)取代了B煙粉虱成為我國作物主要的危害種類[2，3]。煙粉虱取食多達600種植物，不但直接取食，傳播植物病毒更是給作物生產(chǎn)帶來嚴重危害[4]。B和Q煙粉虱傳播超過200種植物病毒，其中番茄黃化曲葉病毒是危害較為嚴重的一種入侵性雙生病毒，于2006年在上海首次發(fā)現(xiàn)，給主要的番茄產(chǎn)區(qū)帶來慘重的經(jīng)濟損失[5，6]。刺吸電位（EPG）技術(shù)研究表明，Q較B煙粉虱在番茄上取食能力更強[7]。煙粉虱取食行為與傳播TYLCV密切相關，分別通過在植物韌皮部吸食汁液和分泌唾液行為傳播和獲取病毒[8]。進一步研究表明，Q煙粉虱的傳毒能力強于B煙粉虱，這也是TYLCV伴隨Q煙粉虱暴發(fā)危害的重要原因[9]。

由TYLCV引起的番茄黃化曲葉病毒病較難防治，生產(chǎn)中普遍的做法是大量使用噻蟲嗪等新煙堿類殺蟲劑防治煙粉虱以減輕病毒病的發(fā)生，但是效果并不顯著。在無毒煙粉虱吸食發(fā)病植物獲毒和帶毒煙粉虱在健康植物上分泌唾液傳毒兩種取食行為中間，帶毒煙粉虱在植物間的遷飛是TYLCV實現(xiàn)在植物間傳播的關鍵[10，11]。因此挖掘并充分利用殺蟲劑對帶毒煙粉虱遷移行為的阻斷作用是科學利用殺蟲劑防治煙粉虱傳播TYLCD的重要途徑。本研究采用選擇試驗，利用不感染病毒的健康番茄苗測試三種殺蟲劑對攜帶TYLCV煙粉虱的趨避作用，從阻斷傳毒媒介角度探討利用殺蟲劑抑制煙粉虱傳毒的可能性。

1?材料與方法

1.1?供試昆蟲與植物

Q煙粉虱從中國農(nóng)業(yè)科學院蔬菜花卉所引進，種群保育在棉花苗上。試驗前轉(zhuǎn)移到注射TYLCV農(nóng)桿菌侵染性克隆的發(fā)病番茄苗上飼養(yǎng)2代以上，得到帶毒Q煙粉虱種群，經(jīng)過PCR擴增方法鑒定煙粉虱帶毒情況，利用酶切方法鑒定生物型為Q煙粉虱[12，13]。試驗所用番茄品種為中雜9號，在溫度為20～28℃日光溫室內(nèi)培養(yǎng)。

1.2?試驗設計與方法

選取3種殺蟲劑分別在3個劑量下對番茄苗進行噴藥處理。清水處理作為對照，供帶毒煙粉虱選擇，共9個獨立選擇試驗，每個試驗重復10次，各重復同時進行。殺蟲劑和劑量分別為：①20%氟吡呋喃酮可溶性液劑[德國拜耳作物科學（中國）有限公司]，試驗濃度分別為LC?15?=11.75 a.i. mg/kg，LC?40?=24.91 a.i. mg/kg，田間應用濃度=200 a.i. mg/kg;②19%溴氰蟲酰胺懸浮劑（美國杜邦公司），試驗濃度分別為LC?15?=1.75 a.i. mg/kg，LC?40?=7.6 a.i. mg/kg，田間應用濃度=126.7 a.i. mg/kg;③25%噻蟲嗪水分散粒劑（瑞士先正達作物保護有限公司），試驗濃度分別為LC?15?= 37.02 a.i. mg/kg，LC?40?=?86.39a.i. mg/kg，田間應用濃度C=125 a.i. mg/kg。亞致死濃度為用藥48 h測得，田間應用濃度為田間實際應用劑量。

藥劑施用方法：將制劑溶于水后用小噴壺噴施在6-7葉期的番茄苗上，至葉片滴水為止，24 h后用于試驗。選擇試驗在長、寬、高分別為45 cm×45 cm×50 cm的80目尼龍紗網(wǎng)籠里進行，紗網(wǎng)籠頂面為透明軟性塑料板，籠子底面放置40 cm×40 cm的方形塑料托盤。將2株藥劑處理和2株清水對照番茄苗分別對角放置在籠內(nèi)方形托盤上，將大約200頭帶毒煙粉虱成蟲收集在一個2 mL離心管內(nèi)，并將離心管放置在托盤對角線中心位置，離心管開口向上，管底用泡沫塑料固定，如圖1所示。每個重復試驗用一個獨立籠子，放置在（26±2）℃實驗室內(nèi)，分別在放入蟲子24、48、72 h后調(diào)查籠內(nèi)每株番茄苗活蟲數(shù)量。

1.3?統(tǒng)計分析方法

采用SPSS軟件進行方差分析（Repeated Measures ANOVA）[14]。

2?結(jié)果與分析

2.1?氟吡呋喃酮對帶毒Q煙粉虱的驅(qū)避效應

圖2顯示，不同濃度氟吡呋喃酮處理的健康番茄苗均對攜帶TYLCV的Q煙粉虱有顯著的趨避效應（LC?15?， F=37.74， P<0.001; LC?40?， F=489.719， P<0.001; 田間應用濃度， F=17 479.877，P<?0.001）。每個處理濃度均隨處理時間的延長，對帶毒Q煙粉虱的驅(qū)避效應越顯著，且隨著處理濃度的升高，處理間的差異越顯著。

2.2?溴氰蟲酰胺對帶毒Q煙粉虱的驅(qū)避效應

圖3顯示，帶毒Q煙粉虱在對照和溴氰蟲酰胺LC?15?、LC?40?處理下的番茄苗間選擇性差異不顯著（LC?15?， F=2.461， P=0.134; LC?40?， F=2.034， P<0.171），且不同處理時間對煙粉虱選擇性差異影響不明顯。與對照相比，溴氰蟲酰胺田間應用濃度處理對帶毒Q煙粉虱表現(xiàn)出顯著趨避效應（F=21.558， P<0.001）。

2.3?噻蟲嗪對帶毒Q煙粉虱的驅(qū)避效應

噻蟲嗪在LC?15?（圖4A）處理下的番茄苗對帶毒Q煙粉虱有顯著的引誘效果（F=8.51， P=?0.009），?且隨著處理時間的延長選擇差異逐漸減小。相反，噻蟲嗪田間應用濃度處理（圖4C）番茄苗對帶毒Q煙粉虱表現(xiàn)出顯著的趨避效果（F=27.035， P<0.001），處理時間對煙粉虱的選擇比率影響不顯著;LC?40?處理（圖4B）番茄苗對帶毒Q煙粉虱的選擇性沒有顯著影響（F=0.302， P=0.590），處理時間對煙粉虱選擇比率同樣沒有顯著影響。

3?討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明氟吡呋喃酮對Q煙粉虱具有很好的驅(qū)避效果。氟吡呋喃酮屬于丁烯（羧）酸內(nèi)酯類，作用于乙酰膽堿受體。該藥劑于2018年上市，商品名為“極顯”，是一種新型殺蟲劑。室內(nèi)生測表明海南煙粉虱種群對氟吡呋喃酮敏感性較高，田間試驗表明對山東地區(qū)煙粉虱成蟲藥后7天防治效果達到92.08%[15， 16]。本研究發(fā)現(xiàn)氟吡呋喃酮亞致死濃度和田間應用濃度（200SL稀釋1 000倍）處理均對攜帶TYLCV煙粉虱表現(xiàn)較好的驅(qū)避效果，且隨施藥時間延長，效果越明顯，表明該藥劑對病毒遷移介體具有一定的阻斷能力。對煙粉虱直接毒殺和驅(qū)避作用試驗表明，氟吡呋喃酮對防御煙粉虱傳播病毒具有一定潛力。實際應用效果需要田間試驗進一步驗證并開發(fā)配套的應用技術(shù)。

溴氰蟲酰胺屬鄰氨基苯甲酰胺類殺蟲劑，作用于魚尼丁受體[17]。王海娜等[18]報道溴氰蟲酰胺對B和Q煙粉虱的卵和若蟲具有很高的活性，但是對成蟲的毒力不高。溴氰蟲酰胺對西班牙Q煙粉虱種群取食行為具有抑制作用，經(jīng)過該藥劑處理后煙粉虱不能刺吸到韌皮部[19]。本試驗條件下LC?15?和LC?40?亞致死濃度處理番茄苗各個時間均對攜帶TYLCV煙粉虱驅(qū)避效應不顯著，但是在田間應用濃度處理下達到顯著水平，表明溴氰蟲酰胺對帶毒煙粉虱的驅(qū)避效果有限。

盡管噻蟲嗪田間應用濃度處理表現(xiàn)顯著的驅(qū)避效應，但在LC?40?處理下對帶毒煙粉虱選擇影響不顯著，在LC?15?亞致死濃度處理則表現(xiàn)顯著的誘集效應。噻蟲嗪是煙堿型乙酰膽堿受體激動劑，作用于昆蟲神經(jīng)系統(tǒng)，使得昆蟲興奮[20]，出現(xiàn)誘集效應可能和其作用機理有關。煙粉虱傳播雙生病毒的效率很高，在發(fā)病番茄上取食1 h后，就能在中腸檢測到病毒粒子，7 h后在唾液腺檢測到病毒[21]。煙粉虱在田間用藥后長期處于亞致死狀態(tài)，誘集效應顯然會對植物抵御煙粉虱傳毒產(chǎn)生極為不利的影響。噻蟲嗪在上市之初對煙粉虱防效較好，并且可降低煙粉虱遺傳多樣性[10，22]，但是隨著近年來煙粉虱對噻蟲嗪等抗性持續(xù)增強，在田間單獨使用噻蟲嗪對煙粉虱效果已不理想[23，24]。盡管利用EPG技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)煙粉虱對噻蟲嗪抗性增加不會引起取食行為的變化[25]，但是在低亞致死濃度處理下導致對煙粉虱的誘集作用顯然不適宜用來防治煙粉虱傳播病毒病。

充分利用寄主本身的選擇性以及黃板、性誘等外界干擾是綠色防控煙粉虱的重要途徑[25-28]。昆蟲介體在植物間的遷移行為是植物病毒得以傳播的重要途徑，帶毒植物吸引昆蟲介體和無毒植物驅(qū)避昆蟲介體無疑將加速病毒的傳播，相反，健康植物排斥帶毒昆蟲介體將減少健康植物的感毒幾率[11]。毫無疑問，外界施加較強的低毒化學品干擾煙粉虱的選擇性對田間減輕延緩病毒病傳播和發(fā)展具有重要的現(xiàn)實意義。氟吡呋喃酮作為新型拒食性較好的低毒殺蟲劑，對控制煙粉虱傳毒具有良好的應用前景。

致謝：本文由青島農(nóng)業(yè)大學褚棟研究員幫助潤色，在數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析過程中得到湖北大學焦曉國教授的幫助，氟吡呋喃酮藥劑由拜耳作物科學（中國）有限公司胡全勝博士提供，在此一并表示感謝。

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