重組人表皮生長因子在PHPV 融合因子中的作用

魏啟明

1.中華生物醫(yī)藥研究院 香港 391375

2.美國納米醫(yī)學(xué)研究院 美國華盛頓 21402

3.南京啟明光環(huán)境科技有限公司 江蘇南京 210011

1、表皮生長因子

1962年，美國Dr.Stanley Cohen博士與意大利科學(xué)家Rita Levi-Montalcini教授在小鼠頜下腺提取出的一種多肽，這種多肽是廣泛存在于人或其他動物體內(nèi)的，極微量既能強(qiáng)烈刺激細(xì)胞生長，抑制衰老，因此定名為表皮生長因子（EGF）。1986年，這項發(fā)現(xiàn)因開辟了全新的生命科學(xué)領(lǐng)域而被授予諾貝爾生理醫(yī)學(xué)獎。1974年從人尿中提純出的人表皮生長因子（hEGF）因其高效的修復(fù)功能而廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域治療角膜損傷、燒燙傷、及手術(shù)等創(chuàng)面的修復(fù)和愈合。

2、表皮生長因子的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展

龐大的市場需要激發(fā)hEGF產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。20世紀(jì)80年代以前，EGF主要來源是通過組織和體液提取。由于hEGF含量極微，造成提取成本高且產(chǎn)品純度低。80年代以后，隨著基因工程技術(shù)的發(fā)展，科研領(lǐng)域通過基因重組技術(shù)，利用大腸桿菌生產(chǎn)重組人表皮生長因子（EGF）獲得成功，為工業(yè)化生產(chǎn)EGF打下科技基礎(chǔ)。重組人表皮生長因子又稱為人寡肽-1，具有直接促進(jìn)皮膚粘膜的修復(fù)和表皮細(xì)胞的生長，并能使衰老的細(xì)胞逆分化為年輕細(xì)胞，有促進(jìn)膠原蛋白和彈力蛋白的合成，能促進(jìn)肉芽組織再生，延緩細(xì)胞衰老、滋養(yǎng)女性生殖器官、淡化表皮皺紋與色斑的作用，它是人類醫(yī)學(xué)與美學(xué)史上最偉大的發(fā)現(xiàn)之一。

3、表皮生長因子的結(jié)構(gòu)和功能

EGF由53個氨基酸組成，并包括3個二硫鍵的多肽。EGF前體的分子量為130KD，體積比細(xì)菌還要小300倍，人的EGF基因位于4號染色體的長臂。EGF能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖分化，從而以新生細(xì)胞代替衰老細(xì)胞和死亡細(xì)胞的過程。傳統(tǒng)化妝品起的是外部修飾作用，不能從根本上解決皮膚問題，而EGF應(yīng)用在美容化妝品中是依據(jù)人體皮膚的生理結(jié)構(gòu)，在分子水平上對細(xì)胞進(jìn)行修復(fù)和調(diào)整。EGF是唯一獲得諾貝爾學(xué)獎肯定的化妝品成分。1999年EGF的研究成果被世界權(quán)威期刊美國《Science》雜質(zhì)評為當(dāng)年十大科技成就之首。被美容界譽(yù)為“美麗因子”。人寡肽-1（EGF）是人體內(nèi)的一種活性物質(zhì)，藉由刺激人寡肽-1受體之酪氨酸磷酸化，達(dá)到修補(bǔ)增生肌膚表層細(xì)胞，對創(chuàng)傷、潰瘍等受損之表皮肌膚擁有絕佳之療效。其最大特點是能夠促進(jìn)細(xì)胞的增殖逆分化，從而以新生的細(xì)胞代替衰老和死亡的細(xì)胞。

4、表皮生長因子的臨床作用

人寡肽-1（EGF）的臨床作用：表皮生長因子在醫(yī)藥領(lǐng)域具有重要的意義，研究表明它能促進(jìn)受傷的皮膚組織生長，抑制胃酸的分泌，可促進(jìn)燒傷皮膚的生長和皮膚潰瘍的愈合，它將在皮膚病、胃病治療、角膜移植手術(shù)中起重要作用。（1）快速修復(fù)受損皮膚，以及改善皮膚的修復(fù)、護(hù)理。（2）平復(fù)眼部皺紋，緊致皮膚，使皮膚組織的平均年齡降低，可滋潤皮膚，增強(qiáng)皮膚彈性。（3）美白祛斑，降低皮膚細(xì)胞中黑色素和有色細(xì)胞的含量，加快黑色素細(xì)胞代謝脫落。（4）防曬及曬后修復(fù)，減輕紫外線輻射對皮膚的傷害，減少曬后皮膚的黑斑生長。（5）防粉刺、去疤痕，縮短創(chuàng)傷愈合時間以及減少疤痕形成，對防止和護(hù)理痤瘡有很好的效果。

5、細(xì)胞穿膜肽

細(xì)胞穿膜肽是一類能攜帶大分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞的短肽，其穿膜能力不依賴經(jīng)典的胞吞作用[1]。穿膜肽是由小于30個氨基酸組成的具有細(xì)胞穿透功能的小肽，它能通過與細(xì)胞膜的相互交聯(lián)作用而穿過細(xì)胞膜這一天然屏障。目前已有科學(xué)家將細(xì)胞穿膜肽應(yīng)用于基因治療[1]。細(xì)胞穿膜肽具有以下特性：①具有凈正電荷性和兩親性；②穿膜轉(zhuǎn)運效率高；③可以導(dǎo)入近乎所有的細(xì)胞；④可以攜帶多種活性物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞；⑤可靶向穿透細(xì)胞膜，達(dá)到滅活多種病毒且不造成細(xì)胞損傷。

6、PHPV融合因子的作用原理

PHPV融合因子包含了人寡肽-1和穿膜肽，因此具有預(yù)防和治療HPV病毒的良好功能。PHPV融合因子是在人寡肽-1的基礎(chǔ)上創(chuàng)造性的引入穿膜肽，PHPV融合因子不僅具有穿膜肽與人寡肽-1的多效功能，而且其交聯(lián)融合后的新蛋白表面的負(fù)電荷（陰離子）與人乳頭瘤病毒HPV顆粒上的N端正電荷（陽離子）相互絡(luò)合，將膜轉(zhuǎn)位信號與核定位信號的NLS偶聯(lián)，從而阻斷人乳頭瘤病毒侵入宿主細(xì)胞內(nèi)，再通過細(xì)胞膜的相互作用而穿透細(xì)胞膜這一天然屏障，起到破壞病毒胞膜外殼來滅活病毒，達(dá)到預(yù)防宮頸癌前病變并最終實現(xiàn)清除HPV感染的目的。