李 東,魯炳懷,張樹琛
(民航總醫(yī)院 檢驗科,北京100123)
隨著性傳播疾病患病人數的增多,感染沙眼衣原體(CT)與淋球菌(NG)所致生殖系統(tǒng)炎癥的患者也隨之增多[1,2]。此外,解脲脲原體(UU)在生殖道特別是女性,常??梢詸z出,但是其致病性還有一定爭議[3]。女性感染CT或NG常常引起非孕期女性陰道炎、尿道炎、宮頸炎、子宮內膜炎、輸卵管炎、盆腔炎、不孕等各類疾病。在妊娠期間,CT和NG還能通過胎盤垂直傳播,從而引起孕產婦不良妊娠結局,此外,有的研究認為UU的攜帶與妊娠不良及預后有關,會嚴重危害孕產婦及新生兒的健康生命,但爭議較大[4]。男性的CT病原體感染,可表現為隱匿性感染,如不及時治療,可引起附睪炎、前列腺炎等并發(fā)癥,從而造成男性不育[5]。為了了解北京地區(qū)的泌尿生殖道感染患者NG與CT感染情況及UU的攜帶,本實驗采用實時熒光PCR技術對2011-2016年就診的患者進行檢測,結果報告如下。
1.1一般資料選取 2010 年1月-2016年12月在我院就診及檢查的婦女患者1588例,男性就診患者293例,年齡分布為16-67歲。取材方法,女性:用窺陰器擴開陰道后,取消毒棉簽,拭凈宮頸外口分泌物,棄去;取一支一次性無菌拭子,分別伸入宮頸管1-2 cm,輕輕旋轉,停留 20 s 以上,送入無菌試管中蓋合緊密,立即送入檢驗科檢測。男性:消毒的無菌棉拭子插入尿道口內1 cm,置留60 s后輕輕取出,置于帶旋蓋的無菌試管中送檢。標本置于-20℃冷凍保存待檢。
1.2主要儀器與試劑
1.2.1試劑 沙眼衣原體核酸測定試劑盒、解脲脲原體核酸測定試劑盒、淋球菌核酸測定試劑盒(熒光 PCR法 )均購自上??迫A生物科技股份有限公司。
1.2.2儀器 羅氏LC480熒光定量 PCR儀。
1.3標本處理
在分泌物標本中加入 1 ml無菌生理鹽水,充分震蕩混勻,將液體轉移至 1.5 ml EP管中。然后吸取每一管中的100 μl混懸液到0.5 ml EP 中,0.5 ml EP管中再加入 100 μl反應液A震蕩混勻,13 000 r/min 離心10 min,離心半徑 =9.35am后棄上清。沉淀加入50 μl反應液B,震蕩混勻,瞬時離心后100℃沸水浴 10 min,再 13 000 r/min離心10 min,取上清2 μl作為 PCR模板,使用上述3種試劑盒對標本進行檢測。設置陰陽性對照管各一個。擴增完分析軟件自動分析,得到的各標本的檢測結果,Ct < 37樣本結果為陽性。
1.4統(tǒng)計學處理
所有數據利用SPSS18.0 統(tǒng)計軟件進行數據分析,計數資料率的比較采用χ2檢驗,計量資料選擇t檢驗,檢驗水準α= 0.05,分析差異是否具有統(tǒng)計學意義。
2.1男女性之間CT、NG與UU陽性檢出率的比較
女性患者中,UU的陽性檢出率顯著高于NG和CT(P均<0.01),CT的陽性檢出率顯著高于NG(P<0.01);男性患者中,NG的陽性檢出率顯著高于女性(P<0.05),而UU的檢出率顯著低于女性。不同性別的CT檢出率無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表1。多重感染者,分別計入感染的病原菌的陽性例數內,因此表1中的陽性例數要高于實際的陽性患者數。
2.2感染類型的分布
男性生殖道標本共計檢測293例,NG+CT+UU陽性例數為188例,陽性率為64.2%。女性生殖道標本共計1588例,NG+CT+UU陽性例數1368例,陽性率為86.1%。其混合感染率見表2。從男性混合感染的感染類型來分,CT+UU以及CT+NG為主要感染類型。而女性則以CT+UU以及NG+UU為主要感染類型。
表1 男性和女性組的CT、NG與UU陽性率的比較
表2 不同性別間混合感染者不同感染類型分布
2.3不同年齡段感染陽性率的比較
男女在不同年齡陽性率分析顯示年齡的關系,見表3。
2.4各組病原體的混合感染情況分析
在各種病原體陽性的患者中,男性數據方面:NG+CT共有9人,CT陽性患者51人,NG感染者有68人,NG伴隨CT感染的概率為13.2%,而CT伴隨NG感染的概率為17.6%。女性患者中,NG+CT感染者共有11人,CT陽性的有195人,NG陽性的有41人,NG伴隨CT感染的概率為26.8%,而CT伴隨NG感染的概率為5.6%。
表3 不同性別泌尿生殖道感染的年齡段陽性率的比較
生殖道病原體CT以及NG可以通過性接觸傳播從而引起感染,多數患者可無明顯癥狀,易被患者忽略,延誤治療。對于女性患者而言,CT和NG病原體可進入孕產婦的泌尿生殖系統(tǒng),誘導白細胞的增殖和前列腺素釋放,導致子宮的異常收縮;而男性的泌尿生殖道炎癥,可導致不孕不育。有報道顯示,在世界各國報道的性傳播疾病中,CT感染患病率最高[6]。
目前對于UU的生殖道致病性還有一定爭議。有研究指出,生殖道的支原體/脲原體是正常菌群的一部分,在無癥狀的婦女體內,特別是脲原體,其定植率高達80%左右[11]。在本次研究中,女性的UU攜帶率為71.3%,和國外的攜帶率大致相同,其中女性婦科攜帶率為71.7%,而產科的攜帶率則為67.4%,說明在婦科的UU攜帶率仍是高于產科,婦科就診的原因主要是陰道病,說明患者存在陰道菌群異常情況較產科人群多見。國外研究指出,陰道菌群異常時,脲原體的檢出率會增高,本數據和該研究結果一致[11]。
本研究顯示,北京地區(qū)的CT、NG、UU三種病原體在泌尿生殖道檢出率存在性別、年齡的差異。女性患者, CT與UU?;旌蠙z出,占總陽性率的10.2%。分析其原因,UU可能是女性生殖道的定植微生物,與其他菌群共生,機體免疫力低下或黏膜受損或其他病原菌存在的情況下可大量繁殖而致病。
與北京地區(qū)的其它研究結果相比,我們研究中NG感染率為3%,CT為12%,與張有江等關于北京地區(qū)的報道趨勢較為一致[7]。張有江等[7]采用的方法為培養(yǎng)的方法,其陽性率明顯低于實時定量PCR的方法。CT的陽性檢出率略低于賀望嬌[8]的報道。說明隨著人群的流動性,病原體的地區(qū)差別差異減小。另外,陽性檢出率的微小差異也可能與入選人群有關。
本次研究還根據女性就診情況分為產科及普通婦科,通過數據可以明顯發(fā)現,女性的CT和NG的感染率在婦科及產科有顯著性差異,產科的NG及CT的感染率明顯降低。產科人群進行NG與CT檢查多為篩查,大致可反映普通人群的感染率,而婦科患者多因生殖道感染的癥狀而就診。
本實驗男性患者共293人,CT與NG感染率均高于女性。男性的尿道不適的最主要病原菌是NG與CT,檢出率分別為23.2%與17.4%。有研究報道指出男性NG發(fā)病主要集中在30歲以下年齡組,而CT好發(fā)于40歲以上年齡組,然而本次研究并未發(fā)現CT與NG感染數量在20-40歲年齡組上的顯著差異[9]。國外學者Naumenko等研究報道,20-45歲的人群是性傳播疾病的高發(fā)人群[10]。本次研究發(fā)現,20-40歲的患者3種病原體的檢出率最高,40-50歲患者次之,隨著年齡的增長病原體感染率逐漸下降。但是在低年齡組0-20歲組,女性的感染率明顯高于男性。
NG、CT 和UU同時檢測顯示,同時檢出2種病原體占有很高的比例,其中以CT+ UU同時檢出最多見。不同性別有明顯區(qū)別,在女性高達10.2%,男性達到4%。NG+CT的混合感染中,男性明顯高于女性,女性僅為0.7%,而男性卻有3.2%。在男性中,NG伴隨CT感染的概率為13.2%,而CT伴隨NG感染的概率為17.6%;在女性中,NG伴隨CT感染的概率為26.8%,而CT伴隨NG感染的概率為5.6%。說明在男性中,不論感染了NG或者是CT的,伴發(fā)概率大致一致,而女性則表現出明顯不同,女性在感染了NG后,感染CT的概率明顯高于CT感染后再感染NG的機會。NG+ UU 的混合感染中,男性為2.7%,女性為2%,差別較小。泌尿生殖道的混合感染,說明性傳播疾病患者經常不是單一病原體感染,因一種病原體感染后導致人體局部抵抗力降低,從而容易合并其他病原體的協同感染。同時這也可能是一些患者在治療后出現病情反復、遷延、癥狀久治不愈。CT+ UU+ NG 同時檢出幾率最低,女性為0.6%,男性未同時檢出上述3種微生物。說明三種混合感染在泌尿生殖道發(fā)生率較低。
總之,臨床醫(yī)生在診治的過程中,應對是否同時存在NG、CT 和(或)UU 感染提高警惕,尤其是對患者治療后仍有臨床癥狀者,或者病情反復出現的患者必須進行聯合檢查,特別是CT 和NG的感染,力求早期發(fā)現,及時治療,以提高治愈率,促進患者的康復。
[1]Leli C,Mencacci A,Bombaci JC,et al.Prevalence and antimicrobial susceptibility of Ureaplasma urealyticum and Mycoplasma hominis in a population of Italian and immigrant outpatients[J].Infez Med,2012,20(2):82.
[2]王淑貞,袁耀萼,蘇應寬,等.實用婦產科[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1995:437-564.
[3]明 巖.妊娠期婦女泌尿生殖道解脲支原體與人支原體感染調查及藥敏分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2010,20(11):1625.
[4]謝 幸,茍文麗.婦產科學[M].8 版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2013:369.
[5]王千秋,劉全忠,徐金華.性傳播疾病臨床診療與防治指南[M].上海:上??茖W技術出版社,2014.
[6]James AB.Geisler WM.Predictors of high chlamydia and gonorrhea positivity rates among men in the southern United States[J].Natl Med ASSOC,2012,104:20.
[7]張有江,張軍民,羅燕萍,等.400例泌尿生殖道支原體、衣原體檢測機藥敏結果分析[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2003,13:689.
[8]賀望嬌.522例患者沙眼衣原體、解脲脲原體和淋病奈瑟菌感染情況分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床,2013,10:826.
[9]龍 彥.泌尿生殖道感染患者淋病奈瑟菌、沙眼衣原體和解脲脲原體感染臨床分析[J].中國婦產科臨床雜志,2014,15:322.
[10]Naumenko V,Tyulenev Y,Kurilo L.Detection and quantification of human herpes viruses types 4-6 in sperm samples of patients with fertility disorders and chronic inflammatory urogenital tract diseases[J].Andrology,2014,5(1):110.
[11]Donders GGG,Ruban K,Bellen G,Petricevic L.Mycoplasma/Ureaplasma infection in pregnancy:to screen or not to screen[J].J Perinat Med,2017,45(5):505.