雄激素對(duì)高尿酸血癥大鼠骨代謝的影響

魏云霄 何 龍 張夢(mèng)嬌 凌 麗

(河北大學(xué)附屬醫(yī)院，河北 保定 071000)

研究證實(shí)高尿酸血癥(HUA)與骨質(zhì)疏松存在相關(guān)性〔1～3 〕，高尿酸(UA)狀態(tài)能引起骨質(zhì)改變，破壞機(jī)體骨質(zhì)。雄激素在骨代謝中有著非常重要的影響，但其對(duì)HUA機(jī)體的骨質(zhì)及骨代謝的作用研究尚少，本研究探討雄激素對(duì)HUA大鼠骨代謝的作用。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料 主要試劑：氧嗪酸鉀：山東中科泰斗有限公司產(chǎn)品，純度>98%；腺嘌呤：上海甄準(zhǔn)生物有限公司產(chǎn)品，純度>95%；臨用前用0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)溶解。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：4個(gè)月齡雄性健康清潔級(jí)Wistar大鼠40只，體重280～320 g，由維通利華有限公司提供，適應(yīng)性飼養(yǎng)7 d后，按隨機(jī)數(shù)字表平均分為假手術(shù)組、HUA組、去勢(shì)HUA組、去勢(shì)組，各10只。飼養(yǎng)管理?xiàng)l件：SPF動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，室溫(20±2)℃，相對(duì)濕度60%～70%，每周稱量監(jiān)測(cè)大鼠體重變化，并記錄，依據(jù)體重給予各組相應(yīng)藥物。

1.2動(dòng)物模型的制作 ①去勢(shì)大鼠模型制作：去勢(shì)組給予切除睪丸及附睪手術(shù)處理，假手術(shù)組給予切除睪丸附近的脂肪組織。②HUA模型大鼠制作〔4,5〕：上午10點(diǎn)給予HUA組大鼠氧嗪酸鉀1.0 g/kg,1次/d持續(xù)灌胃，去勢(shì)HUA組給予氧嗪酸鉀1.0 g/kg灌胃+氧嗪酸鉀100 mg/kg皮下注射，其余組給予等體積蒸餾水灌胃處理。③HUA模型大鼠的調(diào)整〔5〕：待HUA、去勢(shì)HUA組大鼠UA水平下降后，改變?cè)炷７椒?，HUA組大鼠氧嗪酸鉀1.5 g/kg,1次/d持續(xù)灌胃+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，去勢(shì)HUA組給予氧嗪酸鉀1.5 g/kg灌胃+氧嗪酸鉀100 mg/kg皮下注射+乙胺丁醇200 mg/kg皮下注射，共持續(xù)12 w。根據(jù)大鼠體質(zhì)量相應(yīng)調(diào)整藥物劑量，不同組別的大鼠給藥時(shí)間和給藥途徑相同。

1.3血清UA、骨代謝指標(biāo)的測(cè)定 大鼠取血前禁食12 h，腹腔注射3%戊巴比妥鈉1.5 ml/kg，麻醉后內(nèi)眥靜脈取血2 ml。分別在第0、4、6、8、12 w取內(nèi)眥靜脈血測(cè)UA、鈣(Ca)、磷(P)、堿性磷酸酶(ALP)指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS19.0軟件行方差分析。

2 結(jié) 果

2.1各組一般情況變化 HUA組大鼠體重呈先上升后下降趨勢(shì)，精神萎靡，毛色干枯發(fā)黃，活動(dòng)減少。假手術(shù)組反應(yīng)機(jī)敏，活動(dòng)正常，體毛有光澤，體重增加。各組大鼠在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中均自由飲水、攝食。造模后第8周，去勢(shì)HUA組有1只大鼠死亡；第12周HUA組有2只大鼠死亡，去勢(shì)HUA組有1只大鼠死亡；實(shí)驗(yàn)期間總共4只大鼠死亡，存活36只，可能原因與大鼠長(zhǎng)期高尿酸狀態(tài)有關(guān)。

2.2各組UA、骨代謝指標(biāo)水平比較 造模前，各組UA、Ca、P、ALP指標(biāo)均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。造模后第4周，HUA組及去勢(shì)HUA組血UA水平顯著高于假手術(shù)組及去勢(shì)組(P<0.05)，此時(shí)HUA造模成功；各組Ca、P、ALP水平均差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。造模后第6周，HUA組及去勢(shì)HUA組UA水平均顯著高于假手術(shù)組及去勢(shì)組(P<0.05)，但有下降趨勢(shì)。準(zhǔn)備改進(jìn)造模方法。HUA及去勢(shì)HUA組Ca顯著低于假手術(shù)組及去勢(shì)組(均P<0.05)，說(shuō)明高UA此時(shí)引起骨代謝變化。第8周改進(jìn)造模方法后，HUA組、HUA去勢(shì)組UA水平與假手術(shù)組及去勢(shì)組差異性再次顯著(P<0.05)，HUA模型再次造模成功；HUA組、去勢(shì)HUA組及去勢(shì)組Ca水平顯著低于假手術(shù)組(P<0.05)；各組P、ALP差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。造模后第12周，HUA組及去勢(shì)HUA組UA水平顯著高于假手術(shù)組，去勢(shì)組UA水平顯著低于假手術(shù)組；HUA組、去勢(shì)HUA組及去勢(shì)組Ca水平顯著低于假手術(shù)組；去勢(shì)HUA組P水平顯著低于其他3組；去勢(shì)HUA組ALP水平顯著低于假手術(shù)組及HUA組；去勢(shì)組ALP水平顯著低于假手術(shù)組(均P<0.05)。見(jiàn)表1～5。

表1 第0周各組UA及骨代謝指標(biāo)比較

表2 第4周各組UA及骨代謝指標(biāo)比較

與假手術(shù)組比較：1)P<0.05；與去勢(shì)組比較：2)P<0.05，表3、表4同

表3 第6周各組UA及骨代謝指標(biāo)比較

表4 第8周各組UA及骨代謝指標(biāo)比較

表5 第12周各組UA及骨代謝指標(biāo)比較

與假手術(shù)組比較：1)P<0.05；與去勢(shì)組比較：2)P<0.05；與去勢(shì)HUA組比較：3)P<0.05

3 討 論

骨質(zhì)疏松是以骨量減少、骨代謝異常為特征的代謝性骨病。發(fā)病機(jī)制除遺傳、生活方式、環(huán)境因素外，還有其他重要因素的參與。雄激素在骨骼生長(zhǎng)、代謝，骨量維持及抗骨量丟失方面起重要作用。同時(shí)，血UA水平亦受雄激素影響，雄激素有抑制UA排泄和增加UA生成的作用。而且高UA本身也可以引起骨質(zhì)改變，機(jī)制可能與UA結(jié)晶引起腎功能改變和高UA機(jī)體的富蛋白飲食，引起Ca吸收減少有關(guān)。本研究顯示，第4周時(shí)HUA和雄激素均未使各組的骨代謝發(fā)生變化。第6周時(shí)，HUA組大鼠體內(nèi)UA水平有下降趨勢(shì)，可能與體內(nèi)酶類(lèi)變化與代償性排泄增多有關(guān)。UA狀態(tài)已經(jīng)引起了大鼠體內(nèi)Ca水平的變化，證實(shí)高UA可以引起骨代謝變化〔6～9〕。有觀點(diǎn)認(rèn)為〔1〕骨質(zhì)疏松的發(fā)生與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化紊亂有關(guān)，即骨質(zhì)疏松患者的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞過(guò)度分化為脂肪細(xì)胞，同時(shí)伴隨成骨分化能力減弱、骨量丟失是引起骨質(zhì)疏松的一個(gè)重要原因。研究表明〔10〕，男性HUA患病率明顯高于絕經(jīng)前女性，即雄激素相比雌激素，更能升高UA水平。其機(jī)制可能是雄激素中睪酮使UA重吸收，使UA在男性體內(nèi)水平更易升高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在HUA大鼠中，雄激素依舊有可能使骨代謝下降。但因本實(shí)驗(yàn)為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，大鼠與人的體內(nèi)環(huán)境及調(diào)節(jié)機(jī)制可能不同，需進(jìn)一步深入研究。

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