牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物聯(lián)合α-硫辛酸治療老年痛性糖尿病性神經(jīng)病變的效果及機(jī)制

李改仙 張 虹 劉 萍 車秀英 楊 靜

(河北醫(yī)科大學(xué)附屬華北石油總醫(yī)院內(nèi)分泌科，河北 滄州 062552)

糖尿病(DM)神經(jīng)病變(DN)是DM的三大慢性并發(fā)癥之一，其中以DM周圍神經(jīng)病變(DPN)最常見，約90%DM患者存在DPN。DPN發(fā)病機(jī)制與機(jī)體代謝異常(多元醇通路激活機(jī)制、非酶促糖基化反應(yīng)、氧化應(yīng)激)、缺血缺氧、神經(jīng)營養(yǎng)因子缺乏等有關(guān)〔1〕，臨床表現(xiàn)包括感覺障礙、運(yùn)動(dòng)障礙。感覺障礙中以對稱性下肢疼痛多見。目前DPN治療主要包括控制血糖、營養(yǎng)神經(jīng)、改善循環(huán)、抗氧化應(yīng)激及藥物治療，而藥物包括改善循環(huán)藥物、神經(jīng)生長因子、自由基清除劑、B族維生素類藥物等〔2〕。本文觀察牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物聯(lián)合α-硫辛酸應(yīng)用于痛性DN治療前后氧化、炎癥因子等指標(biāo)的變化，旨在探討兩藥聯(lián)合應(yīng)用的臨床價(jià)值及作用機(jī)制。

1 資料和方法

1.1一般資料 2015年3～12月唐山市工人醫(yī)院內(nèi)分泌科住院治療的DPN患者58例，其中男33例，女25例，年齡45～70歲，平均(58.6±12.1)歲，DM病程5～13年，平均(9.8±3.7)年。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合1999年世界衛(wèi)生組織(WHO)提出的2型DM診斷標(biāo)準(zhǔn)；②有明顯的神經(jīng)性疼痛癥狀，表現(xiàn)為四肢遠(yuǎn)端(以下肢為主)的電擊樣痛、灼痛、刺痛、刀割樣痛；③神經(jīng)電生理檢查右側(cè)腓總運(yùn)動(dòng)神經(jīng)傳導(dǎo)速度(MCV)<45 m/s，感覺神經(jīng)傳導(dǎo)速度(SCV)<40 m/s；④血糖穩(wěn)定至少3個(gè)月以上〔糖化血紅蛋白(HbA1c)<9%〕；⑤停用DN的藥物至少2 w。排除標(biāo)準(zhǔn)：①其他原因所致的周圍神經(jīng)病變，如顱腦病變、脊椎病變、酒精、藥物中毒等；②有嚴(yán)重的心肝腎等臟器功能不全；③合并腫瘤、結(jié)締組織病者；④足潰瘍、感染及水腫；⑤近半個(gè)月發(fā)生DM酮癥酸中毒、嚴(yán)重感染者；⑥精神疾病或其他原因不能合作者。按照入組順序隨機(jī)分為對照組和試驗(yàn)組各29例。均知情同意，且經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會同意。兩組性別、年齡、DM病程、DPN病程、空腹血糖、 HbA1c差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

1.2治療方法 基礎(chǔ)治療：患者均通過胰島素泵(門冬胰島素)與口服降糖藥物，監(jiān)測三餐前、三餐后2 h、當(dāng)天22時(shí)共7次末梢血糖，調(diào)整胰島素用量，目標(biāo)血糖為空腹<7.0 mmol/L，餐后<10.0 mmol/L。在基礎(chǔ)治療上兩組均加用α-硫辛酸(奧力寶，德國STADA，批號90527)治療：α-硫辛酸注射液600 mg+生理鹽水250 ml靜脈滴注，1次/d，連續(xù)使用2 w。試驗(yàn)組加用牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物注射液〔日本臟器制藥株式會社生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號：S20010023，規(guī)格：每支3 ml中含有3.6個(gè)神經(jīng)妥樂平(NU)〕3 ml+生理鹽水3 ml，靜脈推注，1次/d，連續(xù)使用2 w。治療期間均不服用止痛藥及應(yīng)用抗血小板藥物、抗纖溶、活血化瘀藥、維生素B族、抗抑郁藥等。兩組療程均為2 w。

表1 兩組一般臨床指標(biāo)比較

1.3觀察指標(biāo) ①一般指標(biāo)及血糖水平：比較兩組入組時(shí)年齡、DM病程、DPN病程、空腹血糖、HbA1c等一般臨床指標(biāo)。②疼痛緩解情況:治療過程中每日8時(shí)以疼痛視覺模擬評分(VAS)10分法評定患者疼痛情況。治療前后VAS下降率>80%為顯效，20%～80%為有效，<20%為無效，上升為惡化。比較兩組的疼痛緩解時(shí)間(VAS下降率≥20%)、有效率(顯效+有效)。③神經(jīng)電生理狀況:治療前后分別以肌電圖儀測定兩組右側(cè)腓總MCV和右側(cè)腓淺神經(jīng)感覺傳導(dǎo)速度(SSCV)。④氧化因子及炎癥因子:治療前后抽取空腹肘靜脈血5 ml，采集血漿，檢測丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。酶聯(lián)免疫吸附法檢測治療前后血漿顆粒蛋白前體(PGRN)、白細(xì)胞介素(IL)-6，熒光免疫法檢測超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)，硝酸還原酶法測定血漿一氧化氮(NO)水平。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件行t，χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1兩組疼痛緩解情況比較 治療前，對照組和試驗(yàn)組VAS分別為(5.72±1.63)分、(5.63±1.71)分，治療后兩組分別為(3.58±1.35)分、(2.03±1.32)分；治療后，兩組VAS均較治療前顯著下降(t=5.445，8.974，均P<0.05)，且試驗(yàn)組下降較對照組更明顯(t=4.421，P<0.05)。試驗(yàn)組疼痛緩解時(shí)間〔(5.17±1.09)d〕、有效率〔93.1%，顯效7例(24.1%)、有效20例(69.0%)、無效2例(6.9%)〕均顯著優(yōu)于對照組〔(7.13±0.95)d,t=2.022，P<0.05；72.4%,顯效2例(6.9%)、有效19例(65.5%)、無效8例(27.6%)，χ2=6.138，P<0.05〕。

2.2兩組神經(jīng)電生理狀況比較 治療前，兩組MCV、SSCV水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.799、0.515，均P>0.05)。治療后，兩組MCV、SSCV均較治療前明顯提高(P<0.05)。且試驗(yàn)組治療后MCV、SSCV均顯著高于對照組(t=3.513、3.953，均P<0.01)。見表2。

2.3兩組氧化應(yīng)激指標(biāo)比較 治療前，兩組的MDA、SOD水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.712、0.630，均P>0.05)。對照組治療前后兩指標(biāo)均無明顯變化(P>0.05)，試驗(yàn)組治療后MDA顯著降低，SOD顯著升高，且與對照組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(MDA：t=3.822，P<0.01；SOD：t=7.398，P<0.01)。見表2。

表2 兩組神經(jīng)電生理狀況、氧化應(yīng)激指標(biāo)、炎癥因子、NO、PGRN水平比較

與對照組比較：1)P<0.01

2.4兩組炎癥因子及NO、PGRN水平的比較 治療前，兩組IL-6、hs-CRP及NO、PGRN水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.043、0.199、0.427、0.630，均P>0.05)。治療后，兩組IL-6、hs-CRP、PGRN較治療前明顯降低(P<0.05)，且試驗(yàn)組降低較對照組更加明顯(t=2.082、4.109、3.207，P<0.01)。試驗(yàn)組治療后NO較治療前明顯升高(P<0.01)，而對照組治療前后NO差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

3 討 論

牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物注射液是經(jīng)牛痘疫苗接種于家兔炎癥皮膚提取的物質(zhì)，其可作用于α2受體和5-羥色胺(HT)系統(tǒng)，激活疼痛下行性抑制系統(tǒng)；抑制緩激肽，減輕局部炎癥反應(yīng)；恢復(fù)鈉鉀三磷酸腺苷酶(Na-K-ATP)酶活性，穩(wěn)定細(xì)胞膜，保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞；促進(jìn)神經(jīng)軸突形成及血旺細(xì)胞增殖；改善微循環(huán)等，從而起到營養(yǎng)神經(jīng)細(xì)胞，修復(fù)受損神經(jīng)纖維，鎮(zhèn)痛的藥理作用〔3〕。α-硫辛酸是一種強(qiáng)抗氧化劑，可以抑制脂質(zhì)過氧化，并能清除自由基和活性氧，減弱氧化應(yīng)激反應(yīng)〔4〕，并有研究顯示α-硫辛酸可通過增加核因子(NF)-κB表達(dá)，抑制天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3激活的糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)誘導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡〔5〕，從而起到改善血管內(nèi)皮功能，改善循環(huán)。本研究說明在α-硫辛酸基礎(chǔ)上將牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物用于老年痛性DN的臨床治療可顯著改善臨床癥狀、神經(jīng)電生理，療效優(yōu)于單純應(yīng)用α-硫辛酸組。

DPN的發(fā)病中，氧化應(yīng)激及炎癥損傷是重要機(jī)制。研究證實(shí)DM患者體內(nèi)氧化應(yīng)激增強(qiáng)〔6〕，氧化應(yīng)激可導(dǎo)致神經(jīng)元線粒體功能障礙，軸突變性〔7〕，并可能通過微血管損害影響神經(jīng)微循環(huán)，神經(jīng)血流灌注減少導(dǎo)致DN，氧化應(yīng)激可導(dǎo)致IL、腫瘤壞死因子等炎性因子生成增多，引起內(nèi)皮功能紊亂，影響神經(jīng)血管循環(huán)，加重神經(jīng)病變。SOD活力可反映機(jī)體清除自由基的能力，可通過清除超陰離子而保護(hù)細(xì)胞免受損傷，MDA是脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物，可反映體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度。PGRN是由593個(gè)氨基酸組成的生長因子，具有促進(jìn)炎性因子表達(dá)及刺激巨噬細(xì)胞遷移的作用〔8〕，可促進(jìn)IL-6等炎癥因子的表達(dá)〔9〕，并進(jìn)一步增加胰島素抵抗作用〔10〕、血管內(nèi)皮功能紊亂。因此通過減輕氧化應(yīng)激達(dá)到保護(hù)血管神經(jīng)的作用，延緩或阻止該病變的進(jìn)展。

本研究說明在α-硫辛酸基礎(chǔ)上聯(lián)合應(yīng)用牛痘疫苗接種家兔炎癥皮膚提取物具有明顯的抗氧化及抗感染作用，二者聯(lián)合應(yīng)用具有一定的協(xié)同效應(yīng)。試驗(yàn)組聯(lián)合用藥可增加NO水平，進(jìn)一步改善局部血流量，外周神經(jīng)血管的循環(huán)改善，局部組織營養(yǎng)供給增加，并進(jìn)一步減少神經(jīng)纖維的凋亡和細(xì)胞損傷，改善神經(jīng)電生理及臨床癥狀。

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