雞毒支原體活疫苗對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

王文道，王選增，馬 迪

（山東省蓬萊市大辛店畜牧獸醫(yī)站，山東 蓬萊 265612）

1 雞毒支原體概述

1.1 雞毒支原體（MG）的病原學(xué)特征

雞毒支原體（MG），其大小為250～500nm，能通過450nm的細(xì)菌濾器，形態(tài)不一，呈高度多形性，常見的有球狀、絲狀，還有桿狀、環(huán)狀、螺旋狀等不規(guī)則形態(tài)。姬姆薩染色著色良好，革蘭氏染色陰性，著色較淡。MG可吸附于雞、火雞和倉(cāng)鼠等動(dòng)物的紅細(xì)胞，這是與非致病性禽源支原體的主要區(qū)別。MG為需氧或兼性厭氧菌；在人工培養(yǎng)時(shí)對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高，需要在培養(yǎng)基中加入10%～15%的滅活豬或馬血清、胰酶水解物和酵母浸出物才能生長(zhǎng)。在固體培養(yǎng)基上，需置潮濕的環(huán)境中培養(yǎng)3～10d才能形成表面光澤透明、邊緣整齊、露滴樣的小菌落，且菌落為“煎蛋樣”，菌落很小，最大不超過1mm，肉眼不可見，光學(xué)顯微鏡下可清楚觀察到菌落形態(tài)。

MG對(duì)理化因素的抵抗力不強(qiáng)，對(duì)紫外線敏感，陽光直射便迅速喪失活力，一般常用的化學(xué)消毒劑均能迅速將其殺死；50℃約20min即可將其滅活，在沸水中立刻死亡。液體培養(yǎng)物在4℃保存不超過1個(gè)月，在-30℃中可保存1～2年。MG對(duì)鏈霉素、四環(huán)素族、氯霉素、紅霉素、泰樂菌素敏感，但也易產(chǎn)生耐藥性。

1.2 臨床癥狀與剖檢變化

MG單獨(dú)感染時(shí)臨床癥狀較輕，感染雞偶有夜間咳嗽，不影響雞的食欲和精神狀態(tài)。但是MG極易和其他病原混合感染，癥狀明顯:病雞咳嗽、流鼻涕、流淚、呼吸時(shí)發(fā)出濕鑼音，死亡率高。

1.3 診 斷

血清學(xué)方法是臨床診斷MG感染應(yīng)用最普遍的方法，血清學(xué)試驗(yàn)呈陽性者，結(jié)合臨床癥狀就可以在MG分離和鑒定之前作出初步診斷。用于檢測(cè)MG的血清學(xué)試驗(yàn)很多，但都不同程度的缺乏特異性和敏感性。分子生物學(xué)方法也常用于MG的感染。

1.3.1 病原體的分離和鑒定

分離病原體適用的培養(yǎng)基有人工培養(yǎng)基 (FM24培養(yǎng)基和PPLO培養(yǎng)基)、雞胚、組織培養(yǎng)物(雞腎細(xì)胞培養(yǎng)物和雞氣管培養(yǎng)物)。病料為可疑感染雞的氣管或氣囊的滲出液、肺的懸浮液或鼻竇的滲出液，均可選擇上述培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，同時(shí)還需結(jié)合血清學(xué)方法來確定。此法工作量大，耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，不適合于生產(chǎn)上的快速診斷和監(jiān)測(cè)。

1.3.2 血清學(xué)方法

生產(chǎn)上多用血清學(xué)方法結(jié)合病史和臨床癥狀來診斷MG感染。常用的血清學(xué)方法有血清平板凝集試驗(yàn)(SPA)、血凝抑制試驗(yàn)(HI)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(Dot2ELISA)等，該方法可用于檢測(cè)卵和血清中的MG抗體，也有人利用該方法檢測(cè)MG抗原。

1.3.3 分子生物學(xué)方法

主要包括核酸探針和PCR方法，敏感性和特異性均較血清學(xué)方法高，并且可用于MG和MS的鑒別診斷。

1.4 疫苗預(yù)防

國(guó)內(nèi)使用的活疫苗為MG康涅狄克F株疫苗，F(xiàn)株是由Carpenter等(1981)命名并用于疫苗生產(chǎn)的，其致病力極弱，給1、3、20日齡的雛雞滴眼接種，不會(huì)引起任何可見的癥狀和氣囊病變，不影響增重。它比野毒株致病性低，可經(jīng)點(diǎn)眼、噴霧或飲水途徑免疫，以點(diǎn)眼法最為安全。中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所用弱毒株F-36制成的活疫苗免疫接種雞，不影響雞體增重，不引起氣囊損傷，接種雞不表現(xiàn)任何臨床癥狀。

活苗研究中，美國(guó)將F株、TS11株及6/85株制成疫苗應(yīng)用，TS11株及6/85株為MG溫度敏感變異株，6/85疫苗株為凍干制品，通過噴霧法接種后，可在呼吸道存在幾周，須注意的是6/85株引起的免疫應(yīng)答幾乎檢測(cè)不到，TS11株引起的抗體應(yīng)答也很弱。因此，通過血清學(xué)方法無法檢測(cè)到6/85株的免疫效果。

根據(jù)市場(chǎng)調(diào)查，TS-11株（澳大利亞生物資源公司生產(chǎn)）說明書的用法與用量：用于蛋雞和種雞點(diǎn)眼接種，每只0.03mL。推薦在3～6周齡時(shí)進(jìn)行接種。MG6/85株（英特威美國(guó)分公司生產(chǎn)）商品名：邁可威，說明書的用法與用量：用水稀釋后噴霧接種6周齡以上的雞每只1羽份。由于肉雞飼養(yǎng)周期一般為38～42日齡，以上兩種疫苗不適合肉雞免疫。

目前，在蓬萊市部分肉雞場(chǎng)雞毒支原體感染率較高，為有效控制該病，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，主要研究7日齡肉雞點(diǎn)眼1羽份和1.5羽份的雞毒支原體活疫苗（F-36株）后，通過與空白組做對(duì)照試驗(yàn)，觀察各組肉雞的成活率、日增重以及料重比的變化，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，為有效控制雞毒支原體感染肉雞提供理論基礎(chǔ)和依據(jù)。

2 材料與方法

2.1 實(shí)驗(yàn)疫苗

雞毒支原體活疫苗（F-36株），福州大北農(nóng)生物技術(shù)有限公司；

雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗(LaSota株+H120株)，瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司（商品名：新支妥）；

雞傳染性法氏囊病活疫苗（B87株），瑞普（保定）生物藥業(yè)有限公司（商品名：法必妥）；

雞新城疫活疫苗(LaSota株)，齊魯動(dòng)物保健品有限公司；全程蓬萊福潤(rùn)牧業(yè)有限公司飼料廠全價(jià)顆粒飼料。

2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、地點(diǎn)

愛拔益加白羽肉雞2萬只，購(gòu)自山東民和牧業(yè)股份有限責(zé)任公司；

實(shí)驗(yàn)場(chǎng)所為蓬萊市某肉雞養(yǎng)殖場(chǎng)。

2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

將愛拔益加白羽肉雞2萬只，隨機(jī)分布在2棟雞舍中，每棟雞舍飼養(yǎng)1萬只，第一棟雞舍中隨機(jī)選取一個(gè)位置，飼養(yǎng)300只雞，隔離分組，每組飼養(yǎng)100只。第二棟雞舍同第一棟雞舍分組，做重復(fù)試驗(yàn)。

第一棟雞舍分別為試驗(yàn)1組、試驗(yàn)2組和對(duì)照1組，第二棟雞舍分別為試驗(yàn)3組、試驗(yàn)4組和對(duì)照2組；試驗(yàn)1組和試驗(yàn)3組在7日齡點(diǎn)眼1羽份雞毒支原體活疫苗（F-36株），試驗(yàn)2組和試驗(yàn)4組在7日齡點(diǎn)眼1.5羽份雞毒支原體活疫苗（F-36株），對(duì)照1組和對(duì)照2組，不做雞毒支原體活疫苗免疫，各組肉雞均在同一條件下進(jìn)行飼養(yǎng)。

實(shí)驗(yàn)于2017年3月1日～4月9日進(jìn)行，為期40d。

2.4 免疫程序

表1 免疫程序

2.5 測(cè)定記錄與統(tǒng)計(jì)分析

出欄時(shí)記錄出欄數(shù)，計(jì)算成活率；1日齡和出欄時(shí)，測(cè)定每組試驗(yàn)雞只的初始重量、出欄重量，計(jì)算日增重；記錄飼料用量，計(jì)算料重比。

采用Excell軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，利用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)。

3 結(jié)果與分析

試驗(yàn)1組和試驗(yàn)3組平均值為第一組，試驗(yàn)2組和試驗(yàn)4組平均值為第2組，對(duì)照1組和對(duì)照2組平均值為對(duì)照組。

3.1 對(duì)肉雞成活率的影響

表2 各組肉雞成活率

從表2看出：第一組、第二組成活率高于對(duì)照組，差異顯著（p＜0.05）；第一組和第二組之間成活率差異不顯著（p＞0.05）。

圖1 各組肉雞成活率結(jié)果柱狀圖

實(shí)驗(yàn)過程中每天記錄死亡的只數(shù)，40日齡計(jì)算每組的死亡個(gè)數(shù)，用總數(shù)200減去死亡個(gè)數(shù)，除以200得出每組成活率。

3.2 對(duì)肉雞日增重的影響

表3 各組肉雞日增重

從表3看出：第1組、第2組日增重高于對(duì)照組，差異顯著（p＜0.05）；第1組和第2組之間日增重差異不顯著（p＞0.05）。

圖2 各組肉雞日增重結(jié)果柱狀圖

實(shí)驗(yàn)過程中記錄1日齡平均體重和出欄時(shí)的平均體重，計(jì)算40日齡每天的日增重。

3.3 對(duì)肉雞料重比的影響

表4 各組肉雞的料重比

圖3 各組肉雞的料重比柱狀圖

料重比（F/G）:記錄各組實(shí)驗(yàn)期內(nèi)的飼料總消耗量與雞只總重量，兩者之比。

4 小結(jié)與討論

通過實(shí)驗(yàn)，可以看出，愛拔益加白羽肉雞在使用雞毒支原體活疫苗（F-36株）1羽份和1.5羽份后，第1組和第2組成活率、日增重顯著高于對(duì)照組（p＜0.05）；第1組和第2組料重比顯著低于對(duì)照組（p＜0.05），表明免疫疫苗效果確切；免疫接種量1羽份和1.5羽份，組間差異不顯著（p＞0.05）。

（1）免疫效果確切，免疫能增強(qiáng)機(jī)體抵抗力，提高成活率；

（2）雞群在健康未發(fā)病的情況下，日增重明顯；

（3）免疫后，飼料轉(zhuǎn)化率提高，料重比低，經(jīng)濟(jì)效益顯著。

5 結(jié)論

5.1為有效控制雞毒支原體感染肉雞，對(duì)肉雞進(jìn)行雞毒支原體活疫苗（F-36株）免疫試驗(yàn)，通過對(duì)結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析表明，雞毒支原體活疫苗接種劑量1羽份，即可有效抵抗野毒的攻擊，增強(qiáng)免疫力，有效降低雞毒支原體感染帶來的風(fēng)險(xiǎn)。

5.2雞毒支原體活疫苗（F-36株）在我市的免疫應(yīng)用表明，肉雞成活率、日增重明顯提高，料重比明顯降低，為提升肉雞的生產(chǎn)性能提供了技術(shù)支撐。

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