非洲豬瘟的流行、診斷及綜合防控

徐善之，田質(zhì)高，陳 飛

（江蘇省張家港出入境檢驗(yàn)檢疫局，江蘇 張家港 215600）

非洲豬瘟（ASF）是由非洲豬瘟病毒（ASFV）引起的一種急性、烈性、高度接觸性的傳染病，其發(fā)病率高，死亡率可高達(dá)100%，世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報(bào)告動(dòng)物疫病，我國(guó)將其列為一類動(dòng)物疫病。該病最早在1921年于非洲的肯尼亞國(guó)家確認(rèn)發(fā)生，2007年以來，非洲豬瘟在全球多個(gè)國(guó)家發(fā)生、擴(kuò)散、流行，特別是俄羅斯及其周邊地區(qū)。2017年3月，俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)伊爾庫(kù)茨克州發(fā)生非洲豬瘟疫情，疫情發(fā)生地距離我國(guó)較近，僅為1000km左右；另外，我國(guó)是養(yǎng)豬及豬肉消費(fèi)大國(guó)，生豬出欄量、存欄量以及豬肉消費(fèi)量均位于全球首位，每年種豬及豬肉制品進(jìn)口總量巨大，與多個(gè)國(guó)家貿(mào)易頻繁；而且，我國(guó)與其它國(guó)家的旅客往來頻繁，旅客攜帶的商品數(shù)量多、種類雜。因此，非洲豬瘟傳入我國(guó)的風(fēng)險(xiǎn)日益加大，一旦傳入，其帶來的直接以及間接損失將不可估量。對(duì)此，2017年4月12日，我國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布了關(guān)于進(jìn)一步加強(qiáng)非洲豬瘟風(fēng)險(xiǎn)防范工作的緊急通知。

為切實(shí)做好非洲豬瘟疫情防范工作，本文從非洲豬瘟的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床及實(shí)驗(yàn)室診斷、風(fēng)險(xiǎn)因素、綜合防控等各個(gè)方面進(jìn)行綜述，以期加強(qiáng)人民對(duì)非洲豬瘟的認(rèn)識(shí)，增強(qiáng)各豬場(chǎng)及進(jìn)出口岸對(duì)非洲豬瘟的檢疫防范意識(shí)，加大各部門的檢驗(yàn)力度，為防止非洲豬瘟傳入我國(guó)打下基礎(chǔ)。

1 病原學(xué)

1.1 分類及形態(tài)結(jié)構(gòu)

2005年7月，國(guó)際病毒分類委員會(huì)（ICTV）最新病毒分類第八次報(bào)告中指出，非洲豬瘟病毒屬于DNA病毒目，非洲豬瘟病毒科，非洲豬瘟病毒屬成員，是一種具有20面體結(jié)構(gòu)，直徑為 175～215nm，基因組全長(zhǎng) 170～190kb，含有 151個(gè)開放閱讀框，可編碼150～200種蛋白，具有囊膜的雙股線性DNA病毒。非洲豬瘟病毒是由病毒基因組、完成基因早期轉(zhuǎn)錄所必須的酶以及一些DNA結(jié)合蛋白組成，結(jié)構(gòu)蛋白較多，其中p72是主要的結(jié)構(gòu)蛋白之一，占病毒總蛋白量的1/3，而且該蛋白序列保守，抗原性佳，病毒感染后能夠產(chǎn)生高滴度的抗p72抗體，因此常被用作非洲豬瘟的血清學(xué)診斷；另外，根據(jù)p72基因末端一段478bp的核酸序列，非洲豬瘟可分為23個(gè)基因型，如Benin97/1為基因I型，Malawi Li20/1為基因VIII型，東非埃塞爾比亞分離株屬于基因XXIII型。非洲豬瘟病毒基因組變異頻繁，表現(xiàn)出明顯的遺傳多樣性。非洲豬瘟病毒不能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體，因此還沒有對(duì)血清型進(jìn)行分類。

1.2 理化特性

非洲豬瘟病毒粒子在Percoll細(xì)胞分離液和氯化銫中的浮密度分別為1.095g/cm3和1.19～1.24g/cm3。該病毒為囊膜病毒，能夠抵抗蛋白酶的作用，對(duì)乙醚及氯仿等脂溶劑敏感，但易被胰酶滅活。病毒在pH 4～10的溶液中比較穩(wěn)定，但對(duì)溫度非常敏感，病毒可在5℃的血清中存活6年，56℃加熱70min或60℃加熱30min可使其滅活。

1.3 體外生長(zhǎng)特性

非洲豬瘟病毒體內(nèi)感染的主要細(xì)胞類型為單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，包括組織巨噬細(xì)胞和網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞，也能在雞胚卵黃囊和骨髓細(xì)胞中增殖。在體外，用于病毒分離培養(yǎng)的細(xì)胞分2類：一類為原代細(xì)胞，主要為單核-巨噬細(xì)胞，接種48h后，細(xì)胞圓縮腫大，隨后脫落、溶解；另一類為傳代細(xì)胞系，比如豬腎細(xì)胞系（PK）、乳倉(cāng)鼠腎細(xì)胞（BHK-21）、非洲綠猴腎細(xì)胞（Vero）以及豬睪丸細(xì)胞（ST）等，但傳代細(xì)胞對(duì)野毒株較不敏感。一些分離株已適應(yīng)傳代細(xì)胞系，并可以產(chǎn)生細(xì)胞病變。

1.4 不同環(huán)境下的存活狀態(tài)

非洲豬瘟病毒在環(huán)境中比較穩(wěn)定，能夠在污染的環(huán)境中保持感染性超過3d，在豬的糞便中感染能力可持續(xù)數(shù)周，在死亡野豬尸體中可以存活長(zhǎng)達(dá)1年；病毒在肉制食品中亦比較穩(wěn)定，冰凍肉中可存活數(shù)年，半熟肉以及泔水可長(zhǎng)時(shí)間存活，腌制火腿中可存活數(shù)月，未經(jīng)燒煮或高溫?zé)熝幕鹜群拖隳c中能存活3～6個(gè)月，4℃保存的帶骨肉中至少存活5個(gè)月。

2 流行病學(xué)

2.1 傳染源

豬是非洲豬瘟病毒唯一的自然宿主，除家豬和野豬外，其它動(dòng)物不感染該病毒。發(fā)病豬和帶毒豬是非洲豬瘟病毒的主要傳播宿主，病豬各組織器官、體液、各種分泌物、排泄物中均含有高滴度的病毒，因此可經(jīng)病豬的唾液、鼻分泌物、淚液、尿液、糞便、生殖道分泌物以及破潰的皮膚、病豬血液等進(jìn)行傳播。歐洲野豬比較容易被病毒感染，表現(xiàn)出的癥狀跟家豬相似，有三種非洲野豬（疣豬、大林豬、非洲野豬）不表現(xiàn)出癥狀，隱性帶毒，成為病毒的貯存器。非洲豬瘟病毒是唯一的蟲媒DNA病毒，軟蜱是主要的傳播媒介和貯存宿主。因此，在非洲，非洲豬瘟病毒在蜱和野豬感染圈中長(zhǎng)期存在，難以根除，并在一定條件下感染家豬，引起暴發(fā)。

另外，豬肉及豬肉制品，被污染的飼料、水源、器具、泔水、工作人員及其服裝以及污染空氣均能成為傳染源，經(jīng)口和上呼吸道途徑傳播。

2.2 傳播途徑

非洲豬瘟的傳播途徑較為廣泛。比如，直接接觸感染豬（直接傳播途徑），飼喂污染的豬產(chǎn)品、飼料、泔水，接觸污染的糞便、墊料等（間接傳播途徑），以及蜱媒介傳播。根據(jù)俄羅斯相關(guān)部門的調(diào)查顯示動(dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品的移動(dòng)或接觸、飼喂泔水是主要的傳播方式。

2.3 流行現(xiàn)狀

非洲豬瘟于1921年首次發(fā)現(xiàn)于非洲的肯尼亞地區(qū)，1957年傳入西歐，1971年傳入南美洲及中美洲地區(qū)，隨后一段時(shí)間內(nèi)，疫情較為穩(wěn)定。2007年以來，非洲豬瘟在全球多個(gè)國(guó)家發(fā)生、擴(kuò)散、流行，根據(jù)孫洪濤等人的調(diào)查分析，截止到2015年，全球約有52個(gè)國(guó)家發(fā)生過非洲豬瘟疫情或檢測(cè)到病毒，其中包括31個(gè)非洲國(guó)家、17個(gè)歐洲國(guó)家和4個(gè)拉丁美洲國(guó)家。根據(jù)翁善鋼統(tǒng)計(jì)，2016年共有10個(gè)國(guó)家的多個(gè)地區(qū)發(fā)生非洲豬瘟疫情，分別是拉脫維亞，烏克蘭敖德薩市，俄羅斯克拉斯諾達(dá)爾邊疆區(qū)，南非西北省和自由省，摩爾多瓦敦杜舍尼區(qū)，波德拉謝省，立陶宛烏田納縣，馬里塞古省，布隆迪恩戈齊，肯尼亞西部州。

根據(jù)OIE通報(bào)，截止2017年10月底，全球共有11個(gè)國(guó)家（波蘭、拉脫維亞、立陶宛、烏克蘭、俄羅斯、捷克、贊比亞、南非、摩爾多瓦、羅馬尼亞、科特迪瓦）發(fā)生非洲豬瘟疫情。其中波蘭疫情數(shù)高達(dá)470多起，拉脫維亞高達(dá)220多起，立陶宛高達(dá)210多起，三個(gè)國(guó)家疫情多發(fā)生于野豬；羅馬尼亞首次發(fā)生該疫情，感染動(dòng)物為家豬，感染來源尚不清楚；另外值得注意的是，自2014年以來，俄羅斯非洲豬瘟疫情嚴(yán)重，今年又有多個(gè)地區(qū)發(fā)生，截止目前疫情數(shù)高達(dá)120多起，且絕大多數(shù)疫情發(fā)生于家豬。

3 臨床癥狀及診斷

3.1 臨床癥狀

非洲豬瘟病毒自然感染的潛伏期一般為4～19d。非洲野豬對(duì)該病有很強(qiáng)的抵抗力，一般不表現(xiàn)出臨床癥狀，但家豬和歐洲野豬一旦感染，則表現(xiàn)出明顯的臨床癥狀。根據(jù)病毒的毒力、感染劑量和感染途徑的不同，臨床癥狀存在差異，可表現(xiàn)為最急性、急性、亞急性或隱性感染。

最急性型多發(fā)生在非洲地區(qū)，往往無明顯癥狀就突然倒地死亡。急性型表現(xiàn)為食欲減退，高溫（達(dá)40～42℃），擠成一團(tuán)，共濟(jì)失調(diào)，心跳加快，呼吸困難，部分咳嗽，眼、鼻有漿液性或粘液性膿性分泌物，皮膚發(fā)紺和出血，偶爾會(huì)出現(xiàn)嘔吐和腹瀉，血液學(xué)檢測(cè)會(huì)出現(xiàn)白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞減少等。臨床癥狀出現(xiàn)后7～10d內(nèi)發(fā)生死亡，死亡率高，可達(dá)100%。

亞急性或慢性非洲豬瘟多發(fā)生在非洲以外的地區(qū)，表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn)，呼吸改變，關(guān)節(jié)腫大，跛行，皮膚潰瘍，消瘦，病死率低。

3.2 病理變化

非洲豬瘟病毒會(huì)引起多種病變類型，這取決于病毒毒株的毒力。急性和亞急性以廣泛性的出血和淋巴組織的壞死為病變特征。在一些慢性或者亞臨床病例中病變很輕或者幾乎不存在病變。

病變主要發(fā)生在脾臟、淋巴結(jié)、腎臟、心臟等器官組織上。內(nèi)臟器官?gòu)V泛性出血。脾臟腫大、梗死，呈暗黑色，質(zhì)地脆弱。淋巴結(jié)腫大、出血，暗紅色血腫，切面呈大理石樣。腎臟表明及皮質(zhì)有點(diǎn)狀出血。心包中含有猩紅液體，心內(nèi)膜及漿膜可見斑點(diǎn)狀出血。

在急性病例中，還會(huì)出現(xiàn)其他病變，例如，腹腔內(nèi)有漿液性出血性滲出物，整個(gè)消化道黏膜水腫、出血。肝臟和膽囊充血，膀胱黏膜斑點(diǎn)狀出血。腦膜、脈絡(luò)膜、腦組織發(fā)生較為嚴(yán)重的水腫出血。

亞急性型感染豬可見淋巴結(jié)和腎臟出血，脾腫大、出血，肺臟充血、水腫，有時(shí)可見間質(zhì)性肺炎。

慢性型感染豬可見肺實(shí)變或局灶性干酪樣壞死和鈣化。病程較長(zhǎng)者，大多發(fā)生纖維素性心包炎、肺炎以及關(guān)節(jié)腫大等慢性病變。

3.3 臨床診斷

非洲豬瘟的臨床癥狀和病變與豬的其他一些出血性、高度接觸性傳染病很相似，比如，豬瘟、高致病性藍(lán)耳病、豬丹毒、敗血性沙門氏菌等。因此，我們很難或者說不能根據(jù)臨床癥狀和眼觀病變來判斷是否為非洲豬瘟，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)是診斷該病最可靠、最準(zhǔn)確的方法。

3.4 實(shí)驗(yàn)室診斷

從實(shí)驗(yàn)方法上分，非洲豬瘟的實(shí)驗(yàn)室診斷主要有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、PCR、熒光定量PCR、DNA原位雜交、免疫組織化學(xué)檢測(cè)、病毒分離、動(dòng)物接種等多種方法，另外，一些新的方法正在被開發(fā)和評(píng)估，比如檢測(cè)抗原的側(cè)流實(shí)驗(yàn)，膠體金免疫層析試紙條，檢測(cè)抗體的免疫化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)等等。但到目前為止，生產(chǎn)實(shí)際中，應(yīng)用較多的還是Elisa、PCR以及熒光定量PCR等常用方法，現(xiàn)將這幾種方法進(jìn)行簡(jiǎn)單介紹。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,即利用抗原抗體進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)，其已被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。一般情況下，非洲豬瘟病毒進(jìn)入豬體內(nèi)，7d后便可誘導(dǎo)產(chǎn)生較高的IgG抗體，當(dāng)然針對(duì)不同蛋白也會(huì)出現(xiàn)個(gè)別差異，但不管怎樣，該方法仍是最為快速、方便的方法。當(dāng)前，市面上尚未使用非洲豬瘟相關(guān)疫苗，因此只要抗體檢測(cè)陽(yáng)性，便可確診為非洲豬瘟病毒感染。劉豐等人便利用法國(guó)ID VET公司的非洲豬瘟抗體檢測(cè)試劑盒對(duì)對(duì)黑龍江省18個(gè)邊境縣開展了非洲豬瘟的流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果均為陰性。但非洲豬瘟引起的急性病例中需結(jié)合其它檢測(cè)方法進(jìn)行確診，因?yàn)闄C(jī)體可能尚未產(chǎn)生抗體便已死亡。

PCR，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是體外擴(kuò)增基因的一種方法。研究表明，非洲豬瘟感染8h，便可從血液中檢測(cè)到其核酸物質(zhì)，因此，針對(duì)非洲豬瘟病毒保守區(qū)域設(shè)計(jì)引物，對(duì)采集的血液或組織病料等相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行DNA提取，進(jìn)行PCR反應(yīng)，可對(duì)其進(jìn)行快速準(zhǔn)確診斷。熒光定量PCR，通俗講是PCR的升級(jí)版，其更加敏感、準(zhǔn)確。

4 風(fēng)險(xiǎn)分析

根據(jù)非洲豬瘟病毒流行特點(diǎn)及當(dāng)前形勢(shì)，非洲豬瘟傳入我國(guó)的風(fēng)險(xiǎn)日益加大，風(fēng)險(xiǎn)因素主要包括以下幾個(gè)方面：

（1）非洲豬瘟疫情國(guó)家逐年增多，鄰國(guó)俄羅斯疫情嚴(yán)峻；（2）我國(guó)與多個(gè)國(guó)家貿(mào)易往來頻繁；（3）我國(guó)出境及進(jìn)境游客人數(shù)多；

（4）我國(guó)生豬及豬肉相關(guān)制品進(jìn)口量大；

（5）口岸中生活垃圾與各種廢棄物的未安全處理；（6）中俄邊境地區(qū)野豬的流動(dòng)；

（7）我國(guó)仍以中小規(guī)模豬場(chǎng)為主，且豬場(chǎng)生物安全意識(shí)較差；

（8）由于價(jià)差，存在非法動(dòng)物產(chǎn)品貿(mào)易等現(xiàn)象；

（9）不排除恐怖組織及其它敵對(duì)勢(shì)力對(duì)我國(guó)的生物襲擊。

5 防控措施

5.1 普及非洲豬瘟相關(guān)知識(shí)

加大非洲豬瘟危害的宣傳力度，引起全民重視。非洲豬瘟一旦傳入我國(guó)，危害巨大，且必將造成一系列的連鎖反應(yīng)，影響人們正常生活。因此，防范非洲豬瘟傳入我國(guó)，不僅僅是各地方動(dòng)物疾控中心、各出入境有關(guān)部門、獸醫(yī)工作者的職責(zé)，更是我們每個(gè)人應(yīng)盡的義務(wù)。外出旅游及工作人員，不去疫情地區(qū)，不從疫情地區(qū)攜帶相關(guān)豬肉制品進(jìn)境；個(gè)別生豬及豬肉商販，要做良心買賣，不進(jìn)行非法走私買賣活動(dòng)。

5.2 加大國(guó)家、政府職能

及時(shí)準(zhǔn)確掌握貿(mào)易國(guó)的疫情史和近期疫情狀況，發(fā)布貿(mào)易禁令，嚴(yán)禁與疫情國(guó)家進(jìn)行貿(mào)易往來；強(qiáng)化監(jiān)測(cè)預(yù)警，開展省級(jí)和區(qū)域性獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)，加大檢疫力度；加強(qiáng)防疫監(jiān)管，各邊境省份，切實(shí)落實(shí)邊境巡查、檢疫監(jiān)管、消毒滅源等綜合防控措施；建立邊境疫情防范屏障，對(duì)監(jiān)測(cè)帶內(nèi)的家豬和野豬群進(jìn)行采樣監(jiān)測(cè)，做到“早發(fā)現(xiàn)、快報(bào)告、速診斷、嚴(yán)處置”；加強(qiáng)對(duì)往來疫情國(guó)家的游客檢疫，嚴(yán)禁游客從疫情國(guó)家地區(qū)攜帶豬肉制品進(jìn)境；另外，積極引導(dǎo)邊境地區(qū)養(yǎng)殖戶杜絕散養(yǎng)散放，發(fā)展規(guī)模養(yǎng)殖，實(shí)行嚴(yán)格的防疫消毒措施，做好生物安全措施。

5.3 強(qiáng)化應(yīng)急準(zhǔn)備

相關(guān)部門舉行突發(fā)非洲豬瘟疫情演練，嚴(yán)格疫情處置，一旦發(fā)現(xiàn)疫情，按非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范和防控應(yīng)急預(yù)案規(guī)范處置。

5.4 研制安全有效的疫苗

相關(guān)部門可組織進(jìn)行科研攻關(guān)，致力于非洲豬瘟的疫苗研發(fā)，防患于未然。

雖然我國(guó)歷史上從未發(fā)生過非洲豬瘟，但從全球范圍看，非洲豬瘟疫情愈發(fā)嚴(yán)重，因此，我們每個(gè)人尤其動(dòng)物檢疫、獸醫(yī)相關(guān)從業(yè)者應(yīng)齊心協(xié)力，嚴(yán)防非洲豬瘟傳入我境。

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