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    前列腺癌組織中Nrf2、c-Myc蛋白表達變化及意義

    2018-03-15 07:18:11郝斌苗志剛袁媛季德才
    山東醫(yī)藥 2018年5期
    關(guān)鍵詞:陽性細胞前列腺癌前列腺

    郝斌,苗志剛,袁媛,季德才

    (滄州市中心醫(yī)院,河北滄州061000)

    前列腺癌是男性泌尿生殖系統(tǒng)常見的惡性腫瘤。在美國,前列腺癌發(fā)病率居男性惡性腫瘤的第1位[1]。近年來隨著人口老齡化、飲食習(xí)慣及生活方式的改變,我國前列腺癌的發(fā)病率呈現(xiàn)持續(xù)快速增長趨勢[2,3]。前列腺癌早期癥狀隱匿,臨床發(fā)現(xiàn)多屬于中晚期,5年生存率低,預(yù)后較差。凋亡抑制蛋白核轉(zhuǎn)錄因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)及c-Myc基因在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。本研究探討二者在前列腺腫瘤發(fā)病過程中的作用,從而為探索前列腺癌新的診斷及防治方法提供依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 選取2007年6月~2013年3月于本院手術(shù)治療的前列腺癌患者42例,年齡47~82(61.23±7.43)歲,均為腺癌,術(shù)前均未行放化療;依據(jù)Gleason評分標(biāo)準(zhǔn)[4]分為高分化9例、中分化23例、低分化10例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移29例、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移13例;TNM分期Ⅰ、Ⅱ期17例,Ⅲ、Ⅳ期25例;排除有前列腺癌家族史、前列腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)者。選擇同期手術(shù)治療的前列腺增生患者50例,年齡48~65(58.13±4.81)歲。術(shù)中取前列腺癌組織及前列腺增生患者的正常組織,均經(jīng)病理檢查證實。前列腺癌患者與前列腺增生患者年齡比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

    1.2 前列腺癌組織及正常組織中Nrf2、c-Myc蛋白表達檢測 采用免疫組化SP法。標(biāo)本均經(jīng)甲醛溶液固定,常規(guī)石蠟包埋,4 μm厚連續(xù)切片。按照免疫組化SP法說明書進行操作。采用10 mmol/L的檸檬酸抗原修復(fù)液(pH值6.0)高溫修復(fù)3 min,以PBS代替一抗作為陰性對照。Nrf2、c-Myc陽性染色為棕黃色,Nrf2主要定位于細胞質(zhì)和胞核,c-Myc主要定位于細胞核。結(jié)果判斷:著色強度無色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分;陽性細胞百分比0為0分,0<陽性細胞百分數(shù)≤25%為1分,25%<陽性細胞百分數(shù)≤50%為2分,50%<陽性細胞百分數(shù)≤75%為3分,75%<陽性細胞百分數(shù)≤100%為4分。以上兩項評分乘積>3為陽性,≤3為陰性[5]。Nrf2、c-Myc兔抗人單克隆抗體購自Santa Cruz生物技術(shù)公司,工作濃度1∶1 000;免疫組化二抗試劑盒、DAB染色劑購自泰科蘭博(北京)生物技術(shù)有限公司。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料以例數(shù)表示,比較應(yīng)用χ2檢驗;相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 前列腺癌組織及正常組織中Nrf2、c-Myc蛋白表達比較 前列腺癌組織及正常組織中Nrf2蛋白陽性表達率分別為78.57%(33/42)、8.00%(4/50),比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);前列腺癌組織及正常組織中c-Myc蛋白陽性表達率分別為90.48%(38/42)、12.00%(6/50),比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

    2.2 Nrf2、c-Myc蛋白陽性表達與前列腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系 Nrf2及c-Myc蛋白陽性表達率與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分期有關(guān)(P均<0.05),與前列腺癌患者年齡、腫瘤大小及分化程度無關(guān)(P均>0.05)。見表1。

    表1 Nrf2、c-Myc蛋白表達與前列腺癌患者臨床病理特征的關(guān)系(例)

    2.3 前列腺癌組織中Nrf2與c-Myc蛋白表達的相關(guān)性 前列腺癌組織中c-Myc及Nrf2蛋白表達均陽性30例。對二者免疫組織化學(xué)染色積分進行分析,結(jié)果顯示呈正相關(guān)(r=0.418,P<0.05)。

    3 討論

    前列腺癌是歐美國家男性最常見的惡性腫瘤,其病死率位列癌癥第2位[6]。流行病學(xué)研究顯示,隨著人們生活方式的改變、人口老齡化及診斷技術(shù)的提高,我國前列腺癌發(fā)病率的年度變化百分比從1988~1994年的2.1%上升至1994~2002年的13.4%。前列腺癌已嚴重威脅我國男性健康[7,8]。然而,目前對于前列腺癌發(fā)病及進展機制仍不完全清楚,亟需深入探索。

    Nrf2介導(dǎo)的細胞適應(yīng)性氧化應(yīng)激是重要的抗氧化防御系統(tǒng),對于抗致癌因素的氧化損傷起重要的作用。但是該信號通路的持續(xù)激活又進一步促使腫瘤的發(fā)生及耐藥性的增加。研究結(jié)果顯示,Nrf2在正常前列腺組織中無表達或低表達,在前列腺癌組織中高表達,且與腫瘤的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期相關(guān)[9,10]。本研究結(jié)果顯示,前列腺癌組織中Nrf2蛋白陽性表達率高于正常前列腺組織,其高表達與腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)。提示Nrf2可能為前列腺癌特異性表達的一種分子生物學(xué)標(biāo)志物,可作為前列腺癌早期診斷和預(yù)后評判的指標(biāo)。

    c-Myc作為一種癌基因,可使腫瘤細胞無限增殖、永生化,在腫瘤細胞增殖、分化、凋亡及代謝等過程中發(fā)揮重要作用[11,12]。c-Myc編碼為一類絲氨酸/蘇氨酸的磷酸化蛋白質(zhì),具有與DNA結(jié)合的功能。c-Myc蛋白具有促進細胞增殖和誘導(dǎo)細胞凋亡的雙重功能。c-Myc基因表達失調(diào)和過度在腫瘤發(fā)生的各階段起關(guān)鍵作用[13]。研究發(fā)現(xiàn),c-Myc在肺癌、胃癌及乳腺癌等多種惡性腫瘤組織中高表達,通過調(diào)節(jié)基因組10%~15%基因的異常表達影響腫瘤進程[14,15]。本研究發(fā)現(xiàn)與前列腺正常組織相比,c-Myc蛋白在前列腺癌組織中呈現(xiàn)高表達,且其高表達與腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)。通過進一步分析,c-Myc與Nrf2在前列腺癌組織中的陽性表達呈正相關(guān)。提示二者共同促進了前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。

    綜上所述,前列腺癌組織中Nrf2、c-Myc蛋白呈高表達。Nrf2、c-Myc蛋白異常表達與前列腺癌的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān),進一步分析表明二者的表達呈協(xié)同效應(yīng),提示二者共同促進前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。

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