UPLC法同時(shí)測定復(fù)配甜味劑中安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜的研究

岑 琴，趙 卉，胡夢坤

（沈陽產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，沈陽 110022）

復(fù)配食品甜味劑由2種或幾種具有不同甜度、不同口感的甜味劑復(fù)配而成，可以克服單一甜味劑甜度不夠、口感發(fā)苦發(fā)澀、成本太高等缺點(diǎn)，具有改善口感、提高甜味穩(wěn)定性、協(xié)同增效、降低成本的作用。復(fù)配食品添加劑往往在包裝上不標(biāo)明所含成份含量，應(yīng)用企業(yè)很難掌握具體的添加量。為此，用水提取復(fù)配食品甜味劑中安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜后，采用超高效液相色譜-二極管陣列檢測器進(jìn)行測定，以期為復(fù)配食品甜味劑中的成分含量測定提供簡單準(zhǔn)確的方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

Waters ACQUITY H-class UPLC超高效液相色譜儀（配二極管陣列檢測器）：美國waters公司；色譜柱：Waters Symetry RP18（2.1 mm ×100 mm，1.7 μm）；電子天平：北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；超純水制備系統(tǒng)：美國Milli-Q公司。

1.2 試劑

安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品：中國計(jì)量科學(xué)研究院；甲醇（色譜純）：美國fisher公司；色譜用水：符合GB／T 6682-2008規(guī)定的一級水。

1.3 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取 1 g粉末樣品 （精確至 0.000 2 g）至100 mL容量瓶中，用水溶解并定容至100 mL；移取1.0 mL至100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL，混勻；取適量上清液過0.22 μm的GHP濾膜，待測定。

1.4 色譜條件

1.4.1 流動(dòng)相選擇甲醇、0.02 mol／L 乙酸銨緩沖溶液和水為流動(dòng)相。在流速0.3 mL／min、柱溫30℃的條件下，當(dāng)甲醇、0.02 mol／L乙酸銨緩沖溶液和水的比例為 35∶5∶60（v／v）時(shí)，3種甜味劑分離效果理想，分析時(shí)間短。

1.4.2 檢測波長在 190～400 nm 之間進(jìn)行全波長掃描，確定安賽蜜和糖精鈉的檢測波長為225 nm，阿斯巴甜的檢測波長為210 nm。

在以上色譜條件下進(jìn)樣0.4 μL，以色譜峰面積外標(biāo)法定量，在225 nm下測得安賽蜜和糖精鈉的色譜圖（見圖 1）。

圖1 安賽蜜、糖精鈉標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Figure 1 Standard chromatogram of acesulfame and saccharin sodium

在以上色譜條件下進(jìn)樣0.4 μL，以色譜峰面積外標(biāo)法定量，在210 nm下測得阿斯巴甜的色譜圖（見圖2）。

圖2 阿斯巴甜標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖Figure 2 Standard chromatogram of aspartame

1.5 標(biāo)準(zhǔn)曲線

準(zhǔn)確稱取安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜各100 mg，加水溶解，移入100 mL容量瓶中，用水定容至100 mL，作為儲(chǔ)備溶液，每毫升相當(dāng)于含安賽蜜、糖精鈉、阿斯巴甜 1 mg。 分別移取 0.2，0.4，1.0，2.5，5.0 mL 儲(chǔ)備液于100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，得到濃度分別為 2.0，5.0，10.0，25.0，50.0 mg／L 的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，在 1.2.2 色譜條件下進(jìn)樣 0.4 μL，根據(jù)濃度與峰面積的關(guān)系繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.6 方法回收率及精密度

為考察方法的可靠性，對添加劑進(jìn)行加標(biāo)樣的回收率測定。安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜加標(biāo)量分別為150、250和 180g／kg的樣品，平行測定 6次。

2 結(jié)果與分析

2.1 線性范圍及檢出限

色譜峰高為噪聲信號的10倍（S／N＝10）相對應(yīng)的濃度為定量限。各組分的線性方程、相關(guān)系數(shù)、線性范圍及定量限見表1。

表1 各組分的線性范圍及檢出限Table 1 Linear range and detection limit of each component

從表1可以看出，各組分在線性范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 方法回收率及精密度

通過加標(biāo)回收率試驗(yàn)對方法進(jìn)行回收率和精密度測定，結(jié)果見表2。

由表2可知：安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜的回收率為 96.3%～100.4%，RSD≤2.1% （n＝6），表明該方法的精密度和準(zhǔn)確度能滿足分析要求。

表2 回收率及精密度（n＝6）Table 2 Recovery and precision results（n＝6）

3 結(jié)論

應(yīng)用超高效液相色譜法測定復(fù)配食品甜味劑中安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜的含量。樣品用水提取后，以甲醇、0.02 mol／L 乙酸銨和水 35：5：60（v／v）為流動(dòng)相洗脫， 經(jīng) Waters Symetry RP18 （2.1mm ×100mm，1.7μm）色譜柱分離，二極管陣列檢測器檢測，檢測波長為225 nm和210 nm。

試驗(yàn)結(jié)果表明：安賽蜜、糖精鈉和阿斯巴甜在質(zhì)量濃度 2.0～50.0 mg／L 的范圍內(nèi)與其峰面積成線性關(guān)系， 線性方程分別為y＝4 604x-1 511、y＝4 965x-1 344、y＝6 069x-2 418，定量限均為 1.0%，平均回收率為 96.3%～100.4%，RSD≤2.1%（n＝6）。 該方法精密度和準(zhǔn)確性好、靈敏度高，樣品預(yù)處理簡單，避免了滴定分析方法中復(fù)配甜味劑之間相互干擾的問題，是復(fù)配食品甜味劑中成分含量的理想檢測方法。