陳啟才 韋茁萍 廖晉楠 黃云柳 韋旅研 陳景飛
(1.廣西河池民族農(nóng)業(yè)學校,廣西河池 546300;2.宜州市廖哥山食用菌合作社 546300)
河池是全國矚目的蠶桑生產(chǎn)大市,種桑養(yǎng)蠶的農(nóng)業(yè)廢棄桑枝年產(chǎn)達70萬噸以上。2016年宜州區(qū)廖哥山食用菌合作社檢測桑枝粉時發(fā)現(xiàn)含硒在0.05mg/kg左右,2017年廣西富硒農(nóng)產(chǎn)品協(xié)會對宜州區(qū)多家合作社種植的桑枝秀珍菇進行測定,硒含量在0.178mg/kg左右,按廣西富硒協(xié)會標準,宜州產(chǎn)桑枝秀珍菇硒含量在0.15~2.0mg/kg范圍內(nèi),即符合富硒食用菌標準,目前已有三家合作社獲得富硒秀珍菇證書。因此,河池市可利用桑枝種植出大量的天然富硒秀珍菇,富硒桑枝秀珍菇已成為河池市亟待開發(fā)的高端食用菌產(chǎn)品。
秀珍菇生產(chǎn)時是通過人為制造溫差剌激出菇,可多潮次生產(chǎn)。受栽培技術(shù)、基質(zhì)配方和潮次的影響,秀珍菇子實體中硒含量變化較大,而產(chǎn)品中硒含量又是判斷富硒食用菌重要標準。宜州區(qū)產(chǎn)桑枝秀珍菇硒含量僅高于富硒食用菌下限標準的0.028mg/kg左右,硒含量屬中下偏低。因此,為獲得穩(wěn)定的優(yōu)質(zhì)富硒秀珍菇產(chǎn)品,有必要對桑枝秀珍菇富硒特性和配方進行研究探討,本試驗以當?shù)仄毡椴捎玫纳Vε浞奖壤秊閷φ?研究各潮次桑枝秀珍菇硒含量的變化規(guī)律;探討必要時添加硒肥后,硒肥濃度對桑枝秀珍菇菌絲和產(chǎn)量的有何影響,并以此為依據(jù)制定出最佳的種植方案。
①供試菌種:臺秀57號,產(chǎn)于福建省羅源縣,高溫型出菇溫度:25~35℃。
②栽培原料:取新鮮、無霉變桑枝粉,粉碎粒徑3~5毫米,來源于河池市宜州區(qū)同德鄉(xiāng),硒含量:0.05mg/kg。收購新鮮桑枝、雜木粉碎后,堆置淋水發(fā)酵20天,中途翻堆2次,待基質(zhì)變暗褐色后用于菌包制作。
③硒肥:由桂林桂珠生物科技有限公司、廣西農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)資源與環(huán)境研究所、北京中農(nóng)新科生物科技有限公司聯(lián)合研發(fā)生產(chǎn)的螯合態(tài)硒肥“聚福硒”,硒元素濃度:0.2%。
1.2.1 試驗配方 ①平板PDA培養(yǎng)基+硒肥配方。馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂20g,水1000mL,硒肥濃度依次設(shè) 0、1、3、5、7、10、15、20、25、30(單位:毫微克/mL,共10個水平三個重復處理。
②栽培種培養(yǎng)基配方:對照配方為桑枝屑47%,雜木屑38%,麩皮12%,石灰2%,輕質(zhì)碳酸鈣l%,硒肥配方按用量設(shè)置1個對照和5個硒添加水平,見表1。
表1 栽培種原料配言表
1.2.2 平板菌絲生長試驗觀察 每平板置入30毫升培養(yǎng)基,高壓滅菌冷卻后取直徑為5mm的秀珍菇菌絲塊,置于平板培養(yǎng)基中部,在24~25℃恒溫箱中倒置培養(yǎng)。接種后第三天,觀察菌落長勢、密度和色澤,菌絲長勢用“+”表示,“+”長勢最弱,“+++”表示長勢最強。第七天測量菌落外緣直徑,計算出菌絲日平均生長量和生長抑制率研究硒對秀珍菇菌絲生長的影響。
1.2.3 栽培種配方試驗設(shè)計 試驗地點在宜州區(qū)廖哥山食用菌合作社。按表1共6個配方進行單因素試驗設(shè)計,共設(shè)置6個處理,每處理100包,3次重復共1800包,統(tǒng)一放2號大棚第7出菇庫中第4,5排,以保證試驗環(huán)境的一致性。
1.2.4 栽培與管理 栽培種生產(chǎn)時,將稱量好的原材料人工預(yù)混好,各處理添加劑溶于20kg水中,再分三次加入料中攪拌,拌勻后用黑寶牌雙沖壓裝包機制袋。為避免各處理之間交叉污染,制袋時從對照開始按濃度由低到高順序生產(chǎn),生產(chǎn)完每一處理菌包后將裝包機清洗干凈,再開始下一處理菌包生產(chǎn)。試驗栽培袋采用規(guī)格為17cm×33cm×0.005cm聚乙烯塑料袋裝料,每袋裝料量為干料0.5kg,嚴格控制含水量65%。常壓高溫滅菌10小時,栽培滅菌接種后統(tǒng)一置大棚內(nèi)避光培養(yǎng)菌絲。
接種兩天后觀察菌絲萌發(fā)吃料情況,待菌絲吃料走滿開口處0.5cm后,每配方隨機抽樣12袋統(tǒng)一畫線做標記,觀測菌絲長勢(用+表示,分三個等級)、生長速度(單位cm.d-1)。
1.2.5 秀珍菇測產(chǎn)及硒、重金屬含量分析 桑枝秀珍菇采用人工制冷條件下,可采菇6~7個潮次。本試驗統(tǒng)計前3潮菇產(chǎn)量和硒含量栓測,轉(zhuǎn)潮期統(tǒng)一設(shè)定為15天,轉(zhuǎn)潮期間每天噴水兩次。菇體成熟后葉片展開4~5cm品相最佳時采收,產(chǎn)量統(tǒng)計包括步菇蕾、商品等級菇和殘次菇,采收時連同菌腳收取后稱鮮重,對產(chǎn)量結(jié)果進行差異顯著性檢驗。
取前三潮產(chǎn)量依據(jù)GB5009,93-2017標準,檢測產(chǎn)品中硒及重金屬鎘、鉛含量。
試驗數(shù)據(jù)表明,PDA平板培養(yǎng)基中硒的濃度在1~7μg/mL范圍內(nèi)和對照相比無太大影響,菌絲生長速度快,菌絲粗壯濃白,長勢旺盛。當PDA培養(yǎng)基中硒濃度增至10μg/mL以上時,硒對秀珍菇菌絲生長的抑制作用開始顯現(xiàn),隨著硒濃度的增加,菌絲生長抑制率逐步提高,首先從菌落中部開始,菌絲顏色變淡黃、稀疏、倒伏;濃度增至25μg/mL時,菌絲先是在原培養(yǎng)基上及周邊萌發(fā)生長,但難以定植,菌絲生長緩慢抑制率提高;當濃度增至50μg/mL時,菌絲則難定植生長并死亡(見表2)。
表2 PDA平板培養(yǎng)基秀珍菇菌絲生產(chǎn)長記載表
表3 栽培種菌絲生長抑制率及鮮菇產(chǎn)量表
秀珍菇菌絲在PDA培養(yǎng)基上對硒濃度的表現(xiàn)極為敏感,但在栽培種菌包上的生長上耐受力較強,試驗表明硒濃度在c1~c5相對較大的濃度變化范圍內(nèi),對秀珍菇菌絲的生長并無影響,菌絲生長速率上差異不顯著。鮮菇產(chǎn)量生物統(tǒng)計結(jié)果表明,除c1與其他處理差異顯著(見表3),但無明顯規(guī)律可循,視為試驗誤差所致(見表4)。
表4 不同配方培養(yǎng)鮮菇產(chǎn)量
從檢驗結(jié)果看,使用硒添加劑后,桑枝秀珍菇中硒含量均比對照組明顯增加,并且隨著采收潮次的增加,菇體中硒含量不降反增,第三潮與第一潮硒含量以對照增幅最大(3倍),其他各處理增由點到面1.5~2倍左右(見表5)。
表5 各處理前三潮菇體硒含量檢測表(mg/kg)
3.1 平板PDA培養(yǎng)中硒對秀珍菇菌絲生長影響明顯,影響的濃度范圍極窄,當培養(yǎng)基中硒濃度10μg/mL時,開始影響秀珍菇菌絲生長,當濃度達30μg/mL以上時,難以萌發(fā)定植,并出現(xiàn)秀珍菇菌絲死亡現(xiàn)象。
3.2 在栽培種加硒添加劑時,對秀珍菇菌絲的影響不明顯,對比試驗表明秀珍菇產(chǎn)品中硒含量隨硒濃度的增加而顯著增加,但對秀珍菇菌絲的生長速度和產(chǎn)量無影響,統(tǒng)計檢驗差異不顯著。
3.3 在栽培基質(zhì)含硒0.05 mg/kg條件下,可以生產(chǎn)天然的富硒桑枝秀珍菇,但檢測結(jié)果表明,桑枝秀珍菇中硒濃度較低,處于標準的下限值左右。
3.4 隨著秀珍菇的潮次增加,秀珍菇中硒含量反而有所增加。在栽培種中添加硒元素是獲得穩(wěn)定的富硒秀珍菇有效手段,硒添加的濃度范圍應(yīng)在處理c1~c2范圍內(nèi),過高過低都易產(chǎn)生硒含量不合格產(chǎn)品。
3.5 桑枝富硒秀珍菇硒工廠化生產(chǎn)時,添加劑的使用應(yīng)嚴格準確控制用量,先用水溶解添加劑并多次少量加入拌勻,否則會因局部添加劑濃度過高極易造成秀珍菇硒含量嚴重超標。